目的:卒中是全球人類殘疾和死亡的主要的原因,缺血性梗死是其最常見的亞型之一。溶栓和機械取栓雖然有效,但僅限于急性期治療。與之相比,缺血后腦組織的修復及其可塑性能夠為多種治療方法提供長達數(shù)月的治療時間窗。缺血性梗死后腦組織的修復及其可塑性包括神經元發(fā)生,軸突再生,少突膠質細胞,前體細胞發(fā)生及少突膠質細胞髓鞘化等,這與其運動功能恢復密切相關。尋求一種有效的能夠增強缺血性梗死后腦組織修復及其可塑性,進一步促進缺血性梗死后功能恢復的治療方法對缺血性梗死患者運動功能的恢復至關重要。腸道微生物影響神經生理和行為學,腸道細菌也可通過調節(jié)宿主代謝產物,影響中樞神經系統(tǒng)(central nervous system,CNS)功能。代謝產物可以通過血腦屏障(blood brain barrier,BBB)進入中樞神經系統(tǒng)直接影響神經活動。腸道營養(yǎng)支持已被應用在腦梗死患者中,長期的腸道營養(yǎng)可以塑造腸道微生物群落,也可以影響宿主的免疫腸道營養(yǎng),這些作用可能對腦梗死的預后產生積極的影響。高膳食纖維飲食(High fiber diet,HFD),是近年來最被廣泛應用的腸道營養(yǎng)干預之一,在高血壓,糖尿病,炎癥性腸病...

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分:各干預組對腦缺血后腸道菌群與腸道內容物SCFAs含量影響
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 材料
            2.1.1 實驗對象
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 顱內注射ET-1制作局部腦缺血模型
            2.2.2 HFD干預
            2.2.3 VSL#3干預
            2.2.4 糞菌移植
            2.2.5 SCFAs干預
            2.2.6 靶向短鏈脂肪酸代謝定量分析
            2.2.7 微生物組 16srRNA
            2.2.8 生物信息分析
        2.3 統(tǒng)計學分析
    3 結果
        3.1 缺血后不同時間點大鼠腸道菌群豐度及多樣性變化
        3.2 各干預組對腦梗死大鼠腸道菌群豐度及多樣性影響
        3.3 各干預組對大鼠腸道菌群門分類水平的影響
        3.4 各干預組對大鼠腸道菌群重要菌群屬水平的影響
        3.5 各干預組對大鼠腸道菌群整體結構的影響
        3.6 各干預組對大鼠腸道內容物 SCFAs 含量的影響
        3.7 腸道菌群與腸道內容物 SCFAs 含量聯(lián)合分析
    4 討論
    5 結論
第二部分:HFD促進神經功能恢復歸功于SCFAs的增加促進神經發(fā)生
    6 前言
    7 材料和方法
        7.1 材料
            7.1.1 實驗對象
            7.1.2 實驗材料
            7.1.3 主要儀器
        7.2 實驗方法
            7.2.1 大鼠梯形平衡木行走實驗
            7.2.2 圓筒實驗
            7.2.3 粘貼實驗
            7.2.4 免疫熒光
            7.2.5 免疫組化
            7.2.6 流式細胞術
            7.2.7 Western Blot
            7.2.8 RT-qPCR實驗步驟詳見第三部分
            7.2.9 圖像處理及數(shù)據(jù)分析
        7.3 統(tǒng)計學分析方法同第一部分
    8 結果
        8.1 SCFAS和益生菌能夠部分恢復缺血后大鼠的運動功能
        8.2 SCFAS和益生菌促進神經功能恢復歸功于SCFAS的增加
        8.3 SCFAs不影響缺血后大鼠梗死區(qū)域神經元凋亡
        8.4 SCFAS能夠促進缺血后大鼠的SVZ神經發(fā)生
        8.5 SCFAS能夠調節(jié)小膠質細胞炎癥反應及表型
    9 討論
    10 結論
第三部分:SCFAs對于小膠質細胞功能及表型的影響及所涉及的通路
    11 前言
    12 材料和方法
        12.1 材料
            12.1.1 細胞系
            12.1.2 實驗動物
            12.1.3 主要材料
            12.1.4 主要儀器
        12.2 方法
            12.2.1 BV2細胞培養(yǎng)及處理
            12.2.2 ERK1/2和JNK信號通路抑制劑處理細胞實驗
            12.2.3 原代提取神經干細胞
            12.2.4 神經干細胞條件性培養(yǎng)
            12.2.5 細胞RNA提取實驗
            12.2.6 動物RNA提取實驗
            12.2.7 PCR array實驗
            12.2.8 RNA逆轉錄及實時定量PCR實驗
            12.2.9 ELISA實驗
            12.2.10 Western Blot實驗詳見第二部分
            12.2.11 流式細胞術實驗詳見第二部分
        12.3 統(tǒng)計學分析方法同第一部分
    13 結果
        13.1 SCFAs 對于小膠質細胞免疫炎癥調節(jié)作用關鍵基因初篩結果
        13.2 SCFAs 對于 SVZ 區(qū)神經發(fā)生調節(jié)作用關鍵基因初篩結果
        13.3 SCFAs 對于小膠質細胞免疫炎癥調節(jié)作用的體外實驗驗證
        13.4 體外實驗 SCFAs 對小鼠小膠質細胞炎癥反應和表型的影響
        13.5 MAPK信號通路在SCFAs促進小膠質細胞炎癥反應的研究
        13.6 小膠質細胞培養(yǎng)上清促進神經再生與分化作用的研究
    14 討論
    15 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3758226