本文關(guān)鍵詞：健脾補(bǔ)腎方對實驗性自身免疫性重癥肌無力（EAMG）小鼠血清IL-4及TGF-β的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察健脾補(bǔ)腎方對實驗性自身免疫性重癥肌無力(EAMG)小鼠的肌無力癥狀改善及發(fā)病過程中血清白介素-4(IL-4)和轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)的變化,探討重癥肌無力(MG)發(fā)病過程中的免疫學(xué)機(jī)制,為尋求中醫(yī)藥治療重癥肌無力提供有意義的基礎(chǔ)實驗依據(jù)。方法:將60只8-10周齡的健康SPF級C57BL/6雌性小鼠隨機(jī)分為兩組:正常對照組(10只)、模型組(50只)。模型組小鼠以人工合成的鼠源性乙酰膽堿受體a亞基97-116肽段作為免疫原建立EAMG模型。初次免疫以每只小鼠雙肩部及雙后足墊皮下注射含鼠源乙酰膽堿受體a亞基97-116肽段50μg的抗原乳劑200μL,其中每個部位注射50μL,初次免疫后第30天、50天時模型組小鼠仍以相同部位及劑量再次加強(qiáng)免疫。正常對照組給予皮下注射生理鹽水,劑量與模型組相同。初次免疫70天后行模型評價,通過酶聯(lián)免疫法檢測小鼠血清中乙酰膽堿受體抗體(Ach R-Ab)滴度,行新斯的明試驗,并觀察肌無力癥狀評分等綜合指標(biāo)來確定模型標(biāo)準(zhǔn),造模期間隔日記錄體重變化。最終納入模型小鼠共26只,將造模成功的模型組小鼠隨機(jī)分為健脾補(bǔ)腎方中藥組8只(4.5g/kg·d)、激素組9只(9mg/kg·d)、生理鹽水組9只(0.2ml),最終同造模期間的正常對照組10只(0.2ml),自分組當(dāng)天起每日灌胃給藥一次,療程2周。期間記錄小鼠肌無力癥狀評分及體重變化,治療前后采用酶聯(lián)免疫法檢測血清白介素-4(IL-4)、轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)含量。結(jié)果:依據(jù)模型判定標(biāo)準(zhǔn)最終納入模型組小鼠為26只,成模率為52%,造模成功后的模型組小鼠出現(xiàn)明顯肌無力癥狀,具體表現(xiàn)為行動緩慢,飲食量減少,體重增長緩慢。正常對照組行動及飲食均正常,未出現(xiàn)肌無力癥狀。模型組在抗體滴度及肌無力癥狀評分方面與正常對照組相比有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。模型組小鼠行新斯的明試驗后在肌無力癥狀改善方面,給藥后較給藥前對比有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。將模型組隨機(jī)分三組治療2周后,各組在癥狀評分及體重方面相比,中藥組及激素組較生理鹽水組有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),而中藥組改善程度低于激素組,組間對比有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01)。在治療2周后小鼠血清IL-4、TGF-β滴度變化方面,中藥組與激素組較生理鹽水組對比有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),而中藥組滴度變化低于激素組,組間對比有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01)。結(jié)論:1、采用鼠源乙酰膽堿受體a亞基97-116肽段免疫C57BL/6小鼠能夠成功建立EAMG模型,造模成功率相對較高。2、模型制備成功后經(jīng)健脾補(bǔ)腎方中藥治療可以顯著減少EAMG小鼠的癥狀評分,緩解肌無力癥狀,提示健脾補(bǔ)腎方對EAMG小鼠治療有效。3、健脾補(bǔ)腎方對EAMG小鼠作用的免疫學(xué)機(jī)制是通過下調(diào)血清中IL-4水平的表達(dá),或提高TGF-β水平的表達(dá),使T細(xì)胞、B細(xì)胞的活化及增值程度降低,從而抑制自身免疫反應(yīng),起到改善肌無力癥狀的作用。
【關(guān)鍵詞】：實驗性自身免疫性重癥肌無力 健脾補(bǔ)腎方 白介素-4(IL-4) 轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β) 重癥肌無力
【學(xué)位授予單位】：河南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R746.1
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 英文縮略詞表10-11
• 第一章 前言11-13
• 第二章 鼠源乙酰膽堿受體a亞基97-116肽段建立EAMG模型(實驗1)13-20
• 2.1 材料與方法13-16
• 2.1.1 實驗材料與儀器13-14
• 2.1.2 實驗步驟與方法14-16
• 2.2 結(jié)果16-20
• 2.2.1 EAMG模型組小鼠成模率及實驗小鼠的死亡情況16
• 2.2.2 EAMG模型組小鼠肌無力癥狀評分16-17
• 2.2.3 EAMG模型組小鼠體重的變化17-18
• 2.2.4 EAMG模型組小鼠新斯的明試驗后癥狀評分18
• 2.2.5 EAMG模型組小鼠AChR-Ab滴度18-20
• 第三章 健脾補(bǔ)腎方治療EAMG小鼠的療效與機(jī)制研究(實驗2)20-27
• 3.1 材料與方法20-22
• 3.1.1 實驗材料與儀器20
• 3.1.2 實驗步驟與方法20-22
• 3.2 結(jié)果22-27
• 3.2.1 健脾補(bǔ)腎方對EAMG小鼠癥狀評分的影響22-23
• 3.2.2 健脾補(bǔ)腎方對EAMG小鼠體重的影響23-24
• 3.2.3 健脾補(bǔ)腎方對EAMG小鼠血清IL-4水平的影響24-25
• 3.2.4 健脾補(bǔ)腎方對EAMG小鼠血清TGF-β水平的影響25-27
• 第四章 討論27-33
• 4.1 EAMG小鼠模型誘導(dǎo)27-28
• 4.2 健脾補(bǔ)腎方來源及解析28-29
• 4.3 健脾補(bǔ)腎方治療EAMG小鼠機(jī)制探討29-31
• 4.4 本實驗的不足之及下一步設(shè)想31-33
• 第五章 結(jié)論33-34
• 致謝34-35
• 參考文獻(xiàn)35-37
• 附錄 文獻(xiàn)綜述37-47
• 參考文獻(xiàn)45-47

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  本文關(guān)鍵詞：健脾補(bǔ)腎方對實驗性自身免疫性重癥肌無力（EAMG）小鼠血清IL-4及TGF-β的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：375440