本文關(guān)鍵詞：膠質(zhì)瘤uPA基因啟動子甲基化及其表達(dá)的臨床意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的通過甲基化特異性多聚酶鏈反應(yīng)法(Methylation special-PCR,MSP)和免疫組織化學(xué)染色半定量法((Immunohistochemistry, IHC))測定膠質(zhì)瘤中尿激酶型纖維酶原激活劑(Urokinase type plasminogen activator, uPA)基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)和蛋白表達(dá)情況。運用統(tǒng)計學(xué)方法分析uPA啟動子甲基化狀態(tài)及其蛋白表達(dá)分別與性別、年齡情況和腫瘤病理學(xué)分級的關(guān)系,并分析uPA啟動子甲基化與uPA蛋白表達(dá)二者之間的相關(guān)性。探討uPA基因啟動子甲基化在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中所產(chǎn)生的的作用以及uPA蛋白表達(dá)與膠質(zhì)瘤病理級別的的關(guān)系。探究DNA甲基化在惡性腫瘤細(xì)胞中的表觀遺傳學(xué)作用機(jī)制并為個體化治療提供指導(dǎo)。方法取自2013年1月-2014年8月間蘭州大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)外科經(jīng)手術(shù)切除后的膠質(zhì)瘤組織標(biāo)本54例。采用WHO(2007年)分類和分級標(biāo)準(zhǔn),運用甲基化特異性多聚酶鏈反應(yīng)法檢測uPA基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài),計算不同級別膠質(zhì)瘤中發(fā)生甲基化、部分甲基化和未甲基化的比率。運用鏈霉素抗生物-過氧化物酶(SP法)進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,細(xì)胞漿中出現(xiàn)為棕紅色顆粒為uPA蛋白陽性表達(dá)。在光學(xué)顯微鏡下觀察陽性細(xì)胞染色深淺并對視野內(nèi)的陽性細(xì)胞數(shù)計數(shù),計算得出陽性細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的百分比,結(jié)果計分標(biāo)準(zhǔn)采用免疫反應(yīng)積分法。通過SPSS13.0軟件分析uPA基因啟動子甲基化、uPA蛋白表達(dá)分別與臨床資料和病理資料的相關(guān)性。結(jié)果54例膠質(zhì)瘤組織標(biāo)本中uPA基因啟動子在Ⅱ級、Ⅲ級和Ⅳ級膠質(zhì)瘤中的甲基化率分別是72.2、38.9和16.7%,病理級別組間的差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。其甲基化情況在患者性別、年齡和病理類型(組織分型)各組組間均無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)；uPA蛋白在Ⅱ級、Ⅲ級和Ⅳ級膠質(zhì)瘤中的陽性表達(dá)率分別是72.2、77.8和94.4%,病理級別組間的差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其表達(dá)情況在患者性別、年齡和病理類型(組織分型)各組組間均無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。該試驗表明了uPA基因啟動子區(qū)的甲基化率是隨膠質(zhì)瘤的病理分級的增高而降低。uPA蛋白的表達(dá)水平是隨膠質(zhì)瘤的病理分級的增高而增高。在Ⅳ級膠質(zhì)瘤中uPA基因啟動子區(qū)的甲基化和uPA蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs=0.233,P=0.029)。結(jié)論1.uPA基因啟動子區(qū)甲基化情況與膠質(zhì)瘤病理分級呈負(fù)相關(guān),特別見于Ⅳ級的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中。該啟動子甲基化和膠質(zhì)瘤的生長和侵襲有關(guān)。2.低程度的甲基化可能激活uPA蛋白或促進(jìn)uPA蛋白的表達(dá)。3.uPA蛋白表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤病理分級呈正相關(guān),與膠質(zhì)瘤的惡性增值有關(guān)。4.膠質(zhì)瘤中uPA基因啟動子甲基化導(dǎo)致uPA蛋白低表達(dá)。在Ⅳ級膠質(zhì)瘤中uPA基因啟動子甲基化狀態(tài)與uPA蛋白表達(dá)二者之間呈負(fù)相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：膠質(zhì)瘤 尿激酶型纖維酶原激活劑 DNA甲基化
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R739.4
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 前言9-12
• 材料與實驗方法12-21
• 2.1 主要儀器與試劑12-13
• 2.1.1 主要儀器12
• 2.1.2 主要試劑12
• 2.1.3 其他常用試劑及設(shè)備12-13
• 2.1.4 常用試劑配制13
• 2.1.5 PCR甲基化引物及免疫組化抗體13
• 2.2 實驗研究對象及資料13-14
• 2.2.1 研究對象13
• 2.2.2 臨床資料13-14
• 2.3 實驗方法及步驟14-20
• 2.3.1 技術(shù)路線圖14
• 2.3.2 甲基化實驗步驟14-19
• 2.3.3 甲基化結(jié)果判定19
• 2.3.4 免疫組化實驗步驟19-20
• 2.3.5 免疫組化結(jié)果判定20
• 2.4 統(tǒng)計學(xué)處理20-21
• 結(jié)果21-28
• 3.1 膠質(zhì)瘤組織DNA中uPA基因啟動子的甲基化21-24
• 3.1.1 uPA基因啟動子甲基化與膠質(zhì)瘤患者性別、年齡的關(guān)系21-22
• 3.1.2 uPA基因啟動子甲基化與膠質(zhì)瘤病理學(xué)特征的關(guān)系22-24
• 3.2 膠質(zhì)瘤組織DNA中uPA蛋白的表達(dá)24-27
• 3.2.1 uPA蛋白的表達(dá)與膠質(zhì)瘤患者性別、年齡的關(guān)系24-25
• 3.2.2 uPA蛋白表達(dá)與膠質(zhì)瘤病理學(xué)特征的關(guān)系25-27
• 3.3 膠質(zhì)瘤中uPA基因啟動子甲基化和uPA蛋白表達(dá)的相關(guān)性27-28
• 討論28-33
• 4.1 uPA的甲基化位點28
• 4.2 uPA基因啟動子甲基化與膠質(zhì)瘤28-29
• 4.3 uPA基因啟動子部分甲基化、未甲基化和膠質(zhì)瘤29-30
• 4.4 uPA蛋白表達(dá)與膠質(zhì)瘤30-31
• 4.5 uPA基因啟動子甲基化對uPA蛋白表達(dá)的影響31-33
• 研究展望33-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 綜述38-46
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 附錄46-49
• 在科研期間的成果49-50
• 致謝50

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張壯;李寧毅;陳萬濤;尚偉;;口腔鱗癌中MMP-1、MMP-2、uPA的表達(dá)與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J];實用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2006年04期

  本文關(guān)鍵詞：膠質(zhì)瘤uPA基因啟動子甲基化及其表達(dá)的臨床意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：366712