發(fā)布時間：2017-05-14 16:23

  本文關(guān)鍵詞：PDTC增強(qiáng)腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞系對TMZ敏感性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景腦膠質(zhì)瘤是人類最常見的顱內(nèi)原發(fā)性腫瘤,也是中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤患者最重要的死亡原因。盡管臨床上積極采用包括手術(shù)切除、放射和化療等的綜合治療方案,惡性膠質(zhì)瘤患者的總生存率仍然很低。替莫唑胺(temozolomide,TMZ)是一種新型烷化劑,它對治療腦膠質(zhì)瘤有確切的臨床療效。采用“手術(shù)+放療同步TMZ化療+輔助TMZ化療”的綜合治療策略,對患者的無進(jìn)展生存期(PFS)和五年生存率有顯著的改善,但對總生存率無明顯提高。然而,很多因素影響了TMZ的臨床療效,其中腦膠質(zhì)瘤耐藥現(xiàn)象的產(chǎn)生是主要原因之一。包括O6-甲基鳥嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(O-6-methylguanine DNA-methyltransferase,MGMT)的內(nèi)源性和誘導(dǎo)性高表達(dá)等原因促進(jìn)了腦膠質(zhì)瘤對TMZ治療的抵抗。MGMT能專門去除TMZ添加的鳥嘌呤殘基O6位置的甲基,從而逆轉(zhuǎn)TMZ的細(xì)胞毒性效果。因此TMZ化療效果可能通過抑制MGMT的活性得到明顯的改善。NF-κB通路的異常激活促進(jìn)了多種實體瘤(包括膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)的發(fā)生、進(jìn)展和放療或化療抵抗密切相關(guān)。更深入的分子實驗發(fā)現(xiàn),MGMT的表達(dá)在一定程度上受NF-κB通路的調(diào)控,同時NF-κB通路本身,MGMT,以及BCL-XL、Bcl-2、Survivin等NF-κB通路的靶基因,可被放、化療刺激表達(dá),在細(xì)胞存活、抗凋亡和抵抗治療方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。本實驗以腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞系為實驗對象,利用二硫代氨基甲酸吡咯烷(ammonium pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC),一種NF-κB特異抑制劑,單獨或與TMZ一起處理U251細(xì)胞系,觀察抑制NF-κB的功能對TMZ化療效果的改變;同時檢測TMZ處理條件下,PDTC如何改變MGMT和BCL-XL、Survivin等抗凋亡蛋白的表達(dá)水平。目的觀察NF-κB抑制劑PDTC對腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞生物性狀的改變;探究PDTC是否能增強(qiáng)U251細(xì)胞對TMZ化療的敏感性;探討PDTC改變TMZ效果可能涉及的分子機(jī)制。方法1.根據(jù)不同處理將細(xì)胞分為對照組(control)、TMZ組、PDTC組和TMZ+PDTC組,后兩組又根據(jù)PDTC濃度的改變設(shè)立不同亞組。2.細(xì)胞增殖抑制用MTT實驗檢測,細(xì)胞周期分布和細(xì)胞凋亡比例的改變應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測。3.q RT-PCR和Western blot分別檢測基因MGMT、BCL-XL和survivin的mRNA和蛋白表達(dá)改變。結(jié)果1.聯(lián)合使用PDTC時,TMZ對U251細(xì)胞的增殖抑制,凋亡誘導(dǎo)和周期阻滯作用顯著增強(qiáng)(P0.05);2.PDTC處理后MGMT、BCL-XL和survivin的mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯下降。3.TMZ聯(lián)合PDTC組MGMT和BCL-XL的mRNA和蛋白表達(dá)水平顯著低于TMZ組(P0.05)。結(jié)論1.NF-κB抑制劑PDTC能顯著提高U251對TMZ的敏感性2.PDTC提高TMZ的化療效果的作用機(jī)制很可能與抑制DNA損傷修復(fù)基因MGMT和抗凋亡基因BCL-XL的表達(dá)相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC) 腦膠質(zhì)瘤 NF-κB O~6-甲基鳥嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MGMT) 替莫唑胺(TMZ)
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 英文摘要6-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-11
• 第二章 PDTC對膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞生物性狀的改變11-23
• 2.1 材料與方法11-16
• 2.2 實驗結(jié)果16-20
• 2.3 討論20-22
• 2.4 小結(jié)22-23
• 第三章 PDTC對U251細(xì)胞MGMT、BCL-XL和survivin表達(dá)的改變23-42
• 3.1 材料與方法23-37
• 3.2 實驗結(jié)果37-39
• 3.3 討論39-41
• 3.4 小結(jié)41-42
• 全文總結(jié)42-43
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 文獻(xiàn)綜述 腦膠質(zhì)瘤治療現(xiàn)狀及其藥物抵抗的產(chǎn)生機(jī)制46-58
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 碩士期間主要發(fā)表論文58-59
• 致謝59-60

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：365681