本文關(guān)鍵詞：電針聯(lián)合BMSCs移植治療對腦出血大鼠腦組織內(nèi)Glu及其受體GluR2、NMDAR2A表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察腦出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠在電針(electro-acupuncture,Ea)聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治療下,血清中髓磷脂堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)的含量和血腫周邊腦組織興奮性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸(glutamate,Glu)及其受體N-甲基-D-天門冬氨酸受體-2A(N-methyl-D-aspartate receptor-2A,NMDAR2A)、谷氨酸受體-2(glutamate receptor-2,Glu R2)的表達(dá),探討聯(lián)合治療方案的可能機(jī)制。方法:(1)培養(yǎng)BMSCs:將凍存的BMSCs通過常規(guī)復(fù)蘇、傳代及誘導(dǎo)后,調(diào)整細(xì)胞濃度至2.5×107個/m L待移植使用。(2)構(gòu)建ICH大鼠模型:選用SD大鼠,向其右側(cè)尾殼核注射膠原酶和肝素以構(gòu)建ICH模型。術(shù)后分3次(2h、24h、48h時)行神經(jīng)損害程度評分(neurological severity score,NSS評分),任意1次得分在9分以上者視為造模成功。(3)動物分組:將造模成功的大鼠隨機(jī)分成BMSCs移植組(BMSCs組)、生理鹽水組(NS組)、電針聯(lián)合BMSCs細(xì)胞移植組(Ea-BMSCs組)、電針治療組(Ea組)4組,于造模成功后第3d分別采用注入20μl BMSCs、20μl生理鹽水、20μl BMSCs并輔以電針刺激(百會穴和大椎穴)及單純電針刺激予以治療。各組繼分為治療后1d、3d、5d、7d和14d共5個亞組,于相應(yīng)時間點(diǎn)對大鼠NSS評分后再采血收集血清,處死大鼠取腦備用。(4)酶聯(lián)免疫吸附測定血清中MBP的含量。(5)免疫組織化學(xué)檢測Glu及其受體Glu R2、NMDAR2A的表達(dá)。結(jié)果:(1)NSS評分結(jié)果(造模成功第3d,對各組分別實(shí)施干預(yù)后):Ea-BMSCs組在第3d、5d、7d、14d與同時間點(diǎn)NS組、Ea組、BMSCs組比較,NSS評分顯著下降(P0.05);BMSCs組在第3d、5d、7d、14d與同時間點(diǎn)NS組比較,NSS評分顯著下降(P0.05);Ea組在第3d、5d、7d和14d與同時間點(diǎn)NS組比較,NSS評分明顯下降(P0.05)。(2)出血灶周圍表達(dá)的Glu積分光密度值(integral optical density,IOD):各組Glu表達(dá)在1d時均快速上升,3d時達(dá)峰值,隨后緩慢下降。Ea-BMSCs組Glu的表達(dá),在各時間點(diǎn)與同一時間NS組、Ea組、BMSCs組比較,明顯下降,差異顯著(P0.05)。BMSCs組、Ea組Glu的表達(dá),在3d、5d、7d時與同時間點(diǎn)NS組比較,明顯下降,差異顯著(P0.05)。(3)出血灶周圍表達(dá)的NMDAR2A的IOD:各組NMDAR2A表達(dá)均在第1d時開始升高,第3d時達(dá)到峰值;然后回落。Ea-BMSCs組NMDAR2A的表達(dá)在各時間點(diǎn)與同時間點(diǎn)NS組相比較,表達(dá)下降,差異顯著(P0.05);在第3d、5d、7d與同時間點(diǎn)Ea組比較,表達(dá)下降,差異顯著(P0.05);在第3d、5d與同時間點(diǎn)BMSCs組比較,表達(dá)下降,差異顯著(P0.05)。BMSCs組NMDAR2A的表達(dá)在第1d、3d、5d、7d時與同時間點(diǎn)NS組相比較,表達(dá)下降,差異顯著(P0.05);Ea組NMDAR2A的表達(dá)在第3d、5d、7d時與同時間點(diǎn)NS組相比較,表達(dá)下降,差異顯著(P0.05)。(4)出血灶周圍表達(dá)的Glu R2的IOD:各組Glu R2表達(dá)在第1d時輕微升高,呈弱陽性表達(dá)。隨時間推移,陽性表達(dá)逐漸增強(qiáng),第7d時達(dá)最高,以Ea-BMSCs組的升高最為顯著。Ea-BMSCs組Glu R2的表達(dá)在各時間點(diǎn)與同時間點(diǎn)BMSCs組、Ea組、NS組相比較,均表達(dá)增高,差異顯著(P0.05)。BMSCs組、Ea組Glu R2的表達(dá)在各時間點(diǎn)與同時間點(diǎn)NS組相比較,表達(dá)增高,差異顯著(P0.05)。(5)各組血清MBP含量的檢測結(jié)果:BMSCs組MBP表達(dá)第5d、7d、14d高于Ea-BMSCs組(P0.05);Ea組第1d、3 d時MBP表達(dá)低于Ea-BMSCs組(P0.05),第14 d高于Ea-BMSCs組(P0.05)。與NS組比較:Ea-BMSCs組第5d、7d、14d MBP表達(dá)明顯低于NS組(P0.01);BMSCs組第14d低于NS組(P0.05);Ea組第5d、7d、14 d低于NS組(P0.05)。結(jié)論:(1)電針聯(lián)合BMSCs移植治療ICH大鼠較單純電針刺激或BMSCs移植更能降低出血灶周邊區(qū)Glu、NMDAR2A的表達(dá),減輕其介導(dǎo)的興奮毒性作用對腦的損傷;(2)電針聯(lián)合BMSCs移植治療ICH大鼠較單純電針刺激或BMSCs移植更能促進(jìn)出血灶周邊區(qū)Glu R2的表達(dá),減少Ca2+內(nèi)流,減輕鈣超載所致腦組織的損傷;(3)電針聯(lián)合BMSCs移植治療ICH大鼠較單純電針刺激或BMSCs移植更能降低血清MBP的含量,減輕其脫髓鞘反應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：腦出血 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 電針 Glu Glu R2 NMDAR2A MBP
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R743.34
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-14
• 材料與方法14-28
• 結(jié)果28-44
• 討論44-59
• 結(jié)論59-60
• 參考文獻(xiàn)60-64
• 英漢縮略詞對照表64-66
• 致謝66-68
• 綜述68-78
• 參考文獻(xiàn)76-78
• 發(fā)表論文78-81

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 蔣曉江,董為偉,許志強(qiáng),李書林,楊海棠;腦出血血腫周邊腦區(qū)谷氨酸及受體的變化[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2000年12期

2 李寧,吳建中,蔣京生;腦缺血時海馬細(xì)胞外液中興奮性氨基酸的變化[J];中國病理生理雜志;1993年06期

  本文關(guān)鍵詞：電針聯(lián)合BMSCs移植治療對腦出血大鼠腦組織內(nèi)Glu及其受體GluR2、NMDAR2A表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：344045