本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)的PARP-1 siRNA對腦梗死后神經(jīng)血管單元的調(diào)控，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景缺血性腦血管病作為當(dāng)今世界影響健康的主要危險因素,并且當(dāng)今的溶栓治療效果并不理想。缺血后腦組織損傷機(jī)制復(fù)雜繁多,腦缺血不僅導(dǎo)致神經(jīng)元受損,而且還損傷膠質(zhì)細(xì)胞、血管以及細(xì)胞外基質(zhì),即神經(jīng)血管單元各個成分均受累。研究顯示：聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[PARP-1]是腦缺血后腦組織損傷的重要調(diào)控因子,腦缺血后過度激活的PARP-1可以誘導(dǎo)神經(jīng)血管單元中各成分的損傷。研究目的觀察慢病毒介導(dǎo)的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1) RNA干擾對大鼠腦梗死后神經(jīng)血管單元的影響。研究方法1.細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染神經(jīng)元取自24h SD大鼠乳鼠,隨機(jī)分為正常對照組(CON), Control siRNA組(CON, LV-control-siRNA), siRNA1, siRNA2以及siRNA3組,rtPCR檢測各組PARP-1的表達(dá),以選擇有效的siRNA。2.動物實驗SD大鼠152只,隨機(jī)分為假手術(shù)組、梗死組、Control siRNA組(側(cè)腦室注射空病毒)和LV-PARP1-siRNA組(側(cè)腦室注射LV-PARP1-siRNA),每組又分6個亞組。另外18只SD大鼠用于檢測大鼠LV-PARP1-siRNA的轉(zhuǎn)染效率,18只大鼠用于western blotting實驗以檢測腦梗死后PARP-1的活性。3.神經(jīng)功能評分評價各組大鼠神經(jīng)功能缺損情況。4.TTC染色評估腦梗死體積。5.伊文思藍(lán)EB通透率及腦組織干濕重測量評價血腦屏障通透性改變。6.HE染色觀察腦梗死區(qū)的病理變化。7.電鏡觀察神經(jīng)血管單元超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果1. SiRNA1,siRNA2和siRNA3均可顯著抑制PARP-1的表達(dá)(p0.01)；2.與假手術(shù)組相比,PARP-1酶活性在腦梗死后1h和3h顯著升高；3.與空病毒組相比,LV-PARP1-siRNA組PARP-1 mRNA表達(dá)水平明顯下降(P0.05),且于轉(zhuǎn)染后第5天時,PARP-1 mRNA水平降至最低,之后持續(xù)維持此水平；4.與假手術(shù)組相比,腦梗死組和Control siRNA組大鼠神經(jīng)功能評分顯著增高(P0.05)；與腦梗死組相比,LV-PARP1-siRNA組大鼠神經(jīng)功能評分顯著降低(P0.05)：5.與腦梗死組和Control siRNA組相比,LV-PARP1-siRNA組大鼠腦梗死體積明顯減小(9.875%±0.611%,P0.05);6.與假手術(shù)組相比,腦梗死組和Control siRNA組大鼠腦組織中EB和水含量顯著增多(P0.05)；與腦梗死組相比,LV-PARP1-siRNA組大鼠腦組織中EB和水含量減少(P0.05)；7.HE染色結(jié)果顯示：腦梗死組海馬神經(jīng)細(xì)胞腫脹、破裂、輪廓模糊,染色較深,而LV-PARP1-siRNA組神經(jīng)細(xì)胞排列整齊,染色均勻；8.電鏡可見梗死組神經(jīng)細(xì)胞變性,線粒體腫脹、嵴減少,髓鞘變薄、分層,血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡、基底膜不連續(xù),突觸數(shù)量減少、結(jié)構(gòu)破壞,而LV-PARP1-siRNA組海馬神經(jīng)血管單元超微結(jié)構(gòu)損傷明顯減輕。結(jié)論抑制PARP-1的表達(dá),可明顯減輕腦梗死后神經(jīng)血管單元的損傷,縮小腦梗死體積,改善神經(jīng)功能。
【關(guān)鍵詞】：PARP-1 RNA干擾 腦梗死 神經(jīng)血管單元 超微結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R743.3
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 符號說明12-14
• 研究背景14-16
• 材料與方法16-28
• 結(jié)果28-31
• 討論31-35
• 結(jié)論35-36
• 附圖表36-44
• 參考文獻(xiàn)44-49
• 綜述49-58
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 致謝58-59
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及參與課題59-60
• 附件60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 錢敏;郭軍;;PARP-1對缺血后神經(jīng)元修復(fù)與損傷機(jī)制研究[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2009年06期

2 張可輝;張亮仁;張禮和;;PARP-1抑制劑在抗腫瘤方面的研究進(jìn)展[J];中國藥學(xué)雜志;2010年22期

  本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)的PARP-1 siRNA對腦梗死后神經(jīng)血管單元的調(diào)控，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：336438