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微囊化嗅鞘細(xì)胞移植對(duì)P2X4受體介導(dǎo)神經(jīng)病理痛的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-30 04:05

  本文關(guān)鍵詞:微囊化嗅鞘細(xì)胞移植對(duì)P2X4受體介導(dǎo)神經(jīng)病理痛的作用研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:探討微囊化嗅鞘細(xì)胞移植治療神經(jīng)病理性疼痛對(duì)P2X4受體在背根神經(jīng)節(jié)表達(dá)的影響及作用。方法:⒈將一只SD大鼠處死,取其嗅球,用NASH差速貼壁法培養(yǎng)嗅鞘細(xì)胞,并做嗅鞘細(xì)胞形態(tài)及純度鑒定;⒉制作微囊化嗅鞘細(xì)胞(microencapsulated olfactory ensheathing cells.MC-OECs);⒊將96只雌雄不拘健康的SD大鼠,隨機(jī)分為4組(每組24只):即假手術(shù)組(sham組)、坐骨神經(jīng)損傷模型組(CCI組)、嗅鞘細(xì)胞移植組(OECs組)及微囊化嗅鞘細(xì)胞移植組(MC-OECs組):將OECs及微囊化OECs移植到損傷坐骨神經(jīng)周圍;4.術(shù)后7、14d用行為學(xué)方法測(cè)定大鼠機(jī)械縮足反射閾值,運(yùn)用RT-PCR、免疫組織化學(xué)染色及蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)L4-5處背根神經(jīng)節(jié)P2X4受體的表達(dá)水平情況。結(jié)果:術(shù)后7、14d,(1)采用行為學(xué)方法檢測(cè)大鼠機(jī)械縮足反射閾值:與sham組對(duì)比,CCI組大鼠機(jī)械縮足反射閾值明顯減低;與CCI組對(duì)比,OECs組與MC-OECs組大鼠機(jī)械縮足反射閾值明顯增加;與OECs組對(duì)比,MC-OECs組大鼠機(jī)械縮足反射閾值稍增加。(2)L4-5處背根神經(jīng)節(jié)P2X4受體RT-PCR m RNA表達(dá)水平:CCI組與sham組相比,m RNA表達(dá)量明顯增加;而與CCI組對(duì)比,嗅鞘細(xì)胞組及微囊化嗅鞘細(xì)胞組表達(dá)水平明顯減低。(3)免疫組織化學(xué)染色:與sham組對(duì)比,CCI組L4-5背根神經(jīng)節(jié)陽(yáng)性細(xì)胞P2X4受體陽(yáng)性細(xì)胞平均吸光度明顯增加,而與CCI組對(duì)比,OECs組及MC-OECs組則明顯減低。(4)蛋白印跡:與sham組對(duì)比,CCI組P2X4受體蛋白表達(dá)明顯增加;而與CCI組對(duì)比,OECs組及MC-OECs組則明顯減低。與OECs組對(duì)比,MC-OECs組在L4-5背根神經(jīng)節(jié)P2X4受體m RNA、陽(yáng)性細(xì)胞平均吸光度及蛋白表達(dá)水平稍低于OECs組。結(jié)論:嗅鞘細(xì)胞及微囊化嗅鞘細(xì)胞移植能減輕坐骨神經(jīng)損傷后引起的神經(jīng)病理性疼痛,可能是通過(guò)降低L4-5處背根神經(jīng)節(jié)P2X4受體的表達(dá)水平,而且微囊化嗅鞘細(xì)胞組治療效果優(yōu)于嗅鞘細(xì)胞移植組。
【關(guān)鍵詞】:微囊化 嗅鞘細(xì)胞 背根神經(jīng)節(jié) 神經(jīng)病理性疼痛 P2X4受體
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R741
【目錄】:
  • 摘要3-5
  • ABSTRACT5-9
  • 中英文縮略詞表9-10
  • 第1章 引言10-14
  • 第2章 材料與方法14-28
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)材料14-19
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
  • 2.1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑14-15
  • 2.1.3 主要儀器15-16
  • 2.1.4 主要試劑及培養(yǎng)液16-19
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法19-28
  • 2.2.1 動(dòng)物模型建立19-20
  • 2.2.2 嗅鞘細(xì)胞的取材及培養(yǎng)20
  • 2.2.3 嗅鞘細(xì)胞的鑒定20-21
  • 2.2.4 微囊化嗅鞘細(xì)胞的制作21
  • 2.2.5 大鼠機(jī)械縮足反射閾值檢測(cè)21
  • 2.2.6 免疫組化染色檢測(cè)21-22
  • 2.2.7 RT-PCR檢測(cè)22-25
  • 2.2.8 蛋白印跡(Western Blot)25-27
  • 2.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析27-28
  • 第3章 結(jié)果28-34
  • 3.1 嗅鞘細(xì)胞培養(yǎng)情況及免疫熒光染色結(jié)果28-29
  • 3.2 大鼠機(jī)械縮足反射閾值測(cè)量結(jié)果29-30
  • 3.3 RT-PCR結(jié)果30-31
  • 3.4 蛋白印跡結(jié)果31-32
  • 3.5 免疫組化染色結(jié)果32-34
  • 第4章 討論34-37
  • 4.1 嗅鞘細(xì)胞的來(lái)源及培養(yǎng)34-35
  • 4.2 OECs移植對(duì)疼痛相關(guān)P2X4受體的影響35
  • 4.3 微囊化OECs移植對(duì)神經(jīng)病理性疼痛相關(guān)P2X4受體影響作用35-37
  • 第5章 結(jié)論與展望37-38
  • 5.1 結(jié)論37
  • 5.2 展望37-38
  • 致謝38-39
  • 參考文獻(xiàn)39-43
  • 攻讀學(xué)位期間的研究成果43-44
  • 綜述 移植嗅鞘細(xì)胞修復(fù)神經(jīng)損傷作用的研究進(jìn)展44-50
  • 參考文獻(xiàn)49-50

【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞:微囊化嗅鞘細(xì)胞移植對(duì)P2X4受體介導(dǎo)神經(jīng)病理痛的作用研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):336184

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