目的探究經(jīng)β-琉基乙醇（β-Mercatoethanol,βME）誘導(dǎo)的脂肪基質(zhì)細(xì)胞（Adipose-derived stromal cells,ADSC）源性神經(jīng)元是否具備正常成熟神經(jīng)元突觸釋放功能相關(guān)的分子基礎(chǔ)及結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。方法1體外提取ADSC并進(jìn)行培養(yǎng)、傳代。2利用βME誘導(dǎo)ADSC向神經(jīng)元進(jìn)行分化。3 ADSC源性神經(jīng)元的鑒定:免疫細(xì)胞化學(xué)法和Western-blotting法檢測ADSC組、誘導(dǎo)1h、3h、5h、8h組細(xì)胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶（Neurons specific enolase,NSE）和神經(jīng)元特異性的微管相關(guān)蛋白2（Microtubule associated protein 2,MAP2）的表達(dá)情況。4應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)法、免疫熒光雙標(biāo)法和Western blotting法檢測各組細(xì)胞中神經(jīng)元突觸釋放功能的核心分子突觸蛋白I（Synapsin I）、突觸囊泡蛋白2（Vesicle-associated membrane protein 2,VAMP2）、突觸融合蛋白（Syntaxin 1A）、突觸小體相關(guān)蛋白（SNAP-25）和突觸結(jié)合蛋白1（Synaptot... 

【文章來源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ADSC向神經(jīng)元誘導(dǎo)分化過程中NSE和MAP2表達(dá)水平的Western-blotting法檢測結(jié)果

注：1-5 依次為 ADSC 組、誘導(dǎo) 1h 組、誘導(dǎo) 3h 組、誘導(dǎo) 5h 組、誘導(dǎo) 8h 組。 圖 A1-A5 為各組細(xì)胞 Synapsin I的表達(dá)情況；圖 B1-B5 為各組細(xì)胞 VAMP2 的表達(dá)情況；圖 C1-C5 為各組細(xì)胞 Syntaxin 1A 的表達(dá)情況；圖 D1-

：A-E 依次為 ADSC 組、誘導(dǎo) 1h 組、誘導(dǎo) 3h 組、誘導(dǎo) 5h 組、誘導(dǎo) 8h 組。1 為各組細(xì)胞 NSE 表達(dá)情況，陽者呈紅色；2 為各組細(xì)胞 Synapsin I 表達(dá)情況，陽性者呈綠色；3 為細(xì)胞核染色，呈藍(lán)色；4 為 NSE 和napsin I 共表達(dá)情況，呈黃色為共表達(dá)細(xì)胞（FM，×200）。圖 7 免疫熒光法檢測 ADSC 向神經(jīng)元誘導(dǎo)分化過程中 NSE/Synapsin I 的共表達(dá)特征

【參考文獻(xiàn)】：
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