膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（glioblastoma,GBM）是最常見的原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤,預(yù)后極差。研究表明,腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（tumor-associated macrophage,TAM）是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤微環(huán)境中浸潤數(shù)目最多的免疫細(xì)胞,可通過高分泌細(xì)胞因子如TGF-β1、PTN等促進(jìn)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤惡性進(jìn)展。除此之外,TAM還可能與腫瘤細(xì)胞發(fā)生雜交從而影響腫瘤的多種生物學(xué)行為。然而,TAM與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞雜交（TAM-GBM細(xì)胞雜交）是否存在,以及其在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中的生物學(xué)作用及機(jī)制尚不清楚。另一方面,膠質(zhì)母細(xì)胞瘤起源于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞或神經(jīng)膠質(zhì)前體細(xì)胞,其發(fā)生發(fā)展受多基因的調(diào)控。篩選調(diào)控膠質(zhì)母細(xì)胞瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵基因,并建立一個(gè)可用于膠質(zhì)母細(xì)胞瘤預(yù)后預(yù)測的多基因風(fēng)險(xiǎn)評分模型具有十分重要的臨床意義。因此,本研究包括以下兩部分內(nèi)容:第一部分腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞雜交促膠質(zhì)母細(xì)胞瘤侵襲及機(jī)制本部分從細(xì)胞雜交的角度出發(fā),研究TAM-GBM細(xì)胞雜交是否存在,TAM-GBM雜交細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組特征,以及TAM-GBM細(xì)胞雜交對膠質(zhì)母細(xì)胞瘤侵襲的影響及機(jī)制。其主要的研究方法、結(jié)果及結(jié)論如下:1.膠... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：130 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

流式分析結(jié)合免疫熒光檢測膠質(zhì)母細(xì)胞瘤臨床樣本中的TAM-GBM雜交細(xì)胞A，流式檢測膠質(zhì)母細(xì)胞瘤臨床樣本中GFAP+CD68+細(xì)胞比例

30圖 2-2 免疫熒光檢測膠質(zhì)母細(xì)胞瘤臨床組織切片中的 TAM-GBM 雜交細(xì)胞-C，免疫熒光檢測膠質(zhì)母細(xì)胞瘤臨床組織切片中 GFAP 與 CD68（A），IDH1R132H與PDGFRα 與 CD14（C）的表達(dá)情況。GFAP 和 PDGFRα 標(biāo)記膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞，ID有 IDH1 突變的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞，CD68 和 CD14 標(biāo)記巨噬細(xì)胞。右側(cè)高倍視野為中黃色選框區(qū)域的放大。白色箭頭指示 TAM-GBM 雜交細(xì)胞。低倍視野標(biāo)尺 = 20標(biāo)尺 = 5 μm。

陸軍軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文2.2.2 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤原位移植瘤中存在 TAM-GBM 細(xì)胞雜交為建立膠質(zhì)母細(xì)胞瘤原位移植瘤模型，我們首先構(gòu)建了熒光蛋白 RFP 標(biāo)記的小鼠膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 GL261（GL261-RFP）（圖 2-3）。利用 GL261-RFP 細(xì)胞建立原位移植瘤，并通過流式檢測膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞熒光標(biāo)記 RFP 和小鼠巨噬細(xì)胞標(biāo)記物CD11b，我們發(fā)現(xiàn) GL261-RFP 原位移植瘤中存在 RFP+CD11b+雜交細(xì)胞，其比例為1.91±0.01%（圖 2-4 A）。免疫熒光驗(yàn)證了經(jīng)流式分選而得的 RFP+CD11b+雜交細(xì)胞同時(shí)表達(dá) RFP 和 CD11b（圖 2-4 B）。


本文編號：3334309