目的:帕金森�。╬arkinson’s disease,PD）是一種常見的神經(jīng)退行性疾病,多發(fā)于中老年。中腦黑質(zhì)多巴胺（dopamine,DA）能神經(jīng)元的變性死亡以及殘存神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)嗜酸性包涵體,即路易小體（Lewy body）的出現(xiàn)是PD突出的病理改變�；颊叩呐R床表現(xiàn)主要為靜止性震顫、運(yùn)動(dòng)遲緩、肌強(qiáng)直等一系列運(yùn)動(dòng)障礙。隨著如今社會(huì)老齡化,PD的發(fā)病率逐年上升,給患者和社會(huì)造成極大的負(fù)擔(dān)。然而目前常用的治療藥物效果較為有限,因此研究和開發(fā)防治PD藥物具有非常重要的意義。本研究擬用MPP⁺（1-Methyl-4-Phenylpyridinium,1-甲基-4苯基吡啶離子）誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞損傷模型以及MPTP（1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶）誘導(dǎo)小鼠帕金森病模型,探討一種活性多肽對(duì)PD的神經(jīng)保護(hù)作用及具體的作用機(jī)制,為PD的治療提供理論依據(jù)。方法:本研究以MPP⁺誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞損傷建立PD細(xì)胞模型,以C57BL雄性小鼠腹腔注射MP... 

【文章來源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度的MPP+對(duì)細(xì)胞存活率的影響

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文17如圖3-1所示，細(xì)胞在加入MPP+培養(yǎng)24h后，隨著MPP+濃度的增加，細(xì)胞存活率明顯降低。當(dāng)MPP+濃度為4mM時(shí)，細(xì)胞存活率約為50%，故選用此濃度用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。圖3-1不同濃度的MPP+對(duì)細(xì)胞存活率的影響Fig.3-1EffectofMPP+withdifferentconcentrationoncellsurvivalrate注：與對(duì)照組相比，*P＜0.05,**P＜0.01,***P＜0.001（2）活性多肽對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用通過MTT法對(duì)三種不同的多肽的細(xì)胞毒性作用進(jìn)行檢測(cè)，如圖3-2所示，不同濃度的多肽對(duì)細(xì)胞的存活率沒有明顯的影響，其中PP-2在200μM時(shí)，有一定的抑制作用，PP-1和PP-3在濃度為400μM時(shí)，有一定的抑制作用。圖3-2不同濃度的多肽對(duì)細(xì)胞存活率的影響Fig.3-2Effectofpeptideswithdifferentconcentrationoncellsurvivalrate注：與對(duì)照組相比，*P＜0.05,**P＜0.01,***P＜0.001

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文18（3）活性多肽對(duì)MPP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用MTT檢測(cè)結(jié)果如圖3-3顯示，當(dāng)用PP-1多肽預(yù)處理細(xì)胞24小時(shí)后，與MPP+模型組相比，細(xì)胞存活率有所增加，當(dāng)濃度為50、100μM時(shí)候，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而PP-2多肽和PP-3多肽的保護(hù)作用沒有PP-1明顯，因此選擇PP-1多肽，濃度為50、100μM進(jìn)行后續(xù)的研究。圖3-3多肽對(duì)MPP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷的影響Fig.3-3EffectofpeptidesonMPP+-inducedSH-SY5Ycellinjury注：與MPP+模型組相比，*P＜0.05,***P＜0.0013.3.2活性多肽對(duì)MPP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞凋亡的影響（1）Hoechst33258染色為了檢測(cè)多肽對(duì)MPP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞凋亡的影響，采用Hoechst33258熒光染色來觀察細(xì)胞核形態(tài)變化。如圖3-4所示，對(duì)組照細(xì)胞核形態(tài)正常，模型組細(xì)胞核固縮、呈致密濃染，核碎片增多，而多肽預(yù)處理組與模型組相比，熒光強(qiáng)度有所降低，核碎片減少。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]D-Ala2-GIP-glu-PAL對(duì)MPTP誘導(dǎo)的急性和慢性帕金森病小鼠模型的神經(jīng)保護(hù)作用[D]. 李艷偉.山西醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]MPP+誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞慢性損傷帕金森病模型的建立及鹿茸多肽的保護(hù)作用[D]. 新吉樂.吉林大學(xué) 2013
[3]治療肽在抑制ASK1/JNK3信號(hào)通路及保護(hù)黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元中作用的研究[D]. 李卉.上海交通大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3282848