目的研究人參皂苷通過作用于神經干細胞巢（NSCs niche）內的神經干細胞（NSCs）、星形膠質細胞（AC）和腦微血管內皮細胞（EC）,對缺血/再灌注（OGD/R）后的NSCs增殖、分化的影響以及HIF-1α-VEGF信號通路的調節(jié)機制。方法1孕15-17d的SD大鼠,體外分離培養(yǎng)胎鼠海馬NSCs,采用免疫熒光染色法對NSCs特異性標志物Nestin進行鑒定,NSCs增殖標記物BrdU進行增殖鑒定,神經元祖細胞特異性標記物Tuj-1及星形膠質細胞的祖細胞特異性標記物Vimentin對NSCs進行分化鑒定。新生1-3d SD大鼠,體外分離培養(yǎng)星形膠質細胞,采用免疫熒光染色法對星形膠質細胞的特異性標志物GFAP進行鑒定。新生1-3d SD大鼠,體外分離培養(yǎng)腦微血管內皮細胞,采用免疫熒光染色法對腦微血管內皮細胞的特異性標志物Factor Ⅷ進行鑒定。2 MTS法測定人參皂苷促進NSCs、星形膠質細胞及腦微血管內皮細胞增殖的最佳劑量及最佳給藥時間點。3攜帶GFP基因的慢病毒轉染NSCs,觀察GPF的陽性表達率來確定NSCs的轉染率,篩選出慢病毒轉染NSCs的最佳轉染指數(shù)MOI值及最佳轉染時間... 

【文章來源】：北京中醫(yī)藥大學北京市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：247 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１人參皂昔在不同濃度時對培養(yǎng)３ｄ的ＮＳＣｓ吸光值的影響（苗ｓ，ｎ＝８?）??

基于千細胞巢調控的人參皂昔對缺血／再灌注神經干細胞增殖、分化的作用及其機制２人參皂巧在不同時間點、同一濃度（ｌ．ＯＯ＾ｔ＾ｉＬ）?對ＮＳＣｓ吸光值的影響（；±ｓ，ｎ＝８?）??組?￣?時間（ｈ）?對照組吸光值?人參皂脊組吸光￣?＇??１?０．２０４±０．００６?０．２０９±０．００５??３?０．２２０±０．００９?０．２３３±０．００９??６?０．２３化０．００７?０．２６紅?０，００６??１２?０．３８１±０．００９?０．４２１±０．００６＊＊??２４?〇．４２０±〇．〇〇６?０．４６８±０．００７＊＊??４８?０．４６８±０．００５?０．４８２±〇．〇〇９??７２?０．４６２±０．００５?０．４７６±０．００６??％?０．４７６＾０．００７?０．４８３±０，００８???與對照組相比：戶＜０．０１??－人參皂樣‘組??

３實驗結果??３．１人參皂昔對星形膠質細胞增殖的影響??３丄１由表１、圖１可看出人參皂巧在１２．５（Ｈｉｇ／ｍＬ的濃度時，所須�。钡玫奈庵底罡�，對??星形膠質細胞增殖作用最強，與對照組相比，差異具有統(tǒng)計學意義（戶＜０．０５，尸＜０．００，??濃度從ｌＯＯ．ＯＯｎｇ／ｍＬ開始，人參皂昔促進星形膠質細胞的増殖作用隨濃度的升高而減弱。??表１人參皂巧在不同濃度時對培養(yǎng)３ｄ星形膠質細胞吸光值的影響（苗Ｓ，?ｎ＝８?）??（ｎｇｆａＬ）?吸光值??０?（對照組）?０．６４虹０．０８８４??０．２５?０倘３±０．口７８??０．５０?０乂?８４±０．０７８０??１．００?０．７２４±０．１０３２??２．５０?０．７４７±０．０７６０＊??６．２５?０．７５５±０．１１９４＊??１２．５０?０．７９９±０．０８４５＊＊??２５．００?０．７３１±０．０％６??５０．００?０．７４０±０．０６２５??１００．００?０．７１６±０．０８０３??２００．００

【參考文獻】：
期刊論文
[1]人參皂苷Rb1、Rg1對胎鼠體外神經干細胞促增殖分化作用的研究[J]. 張薇,王大明,譚淵,黃志健.  中國康復醫(yī)學雜志. 2016(11)
[2]人參皂苷作用于星形膠質細胞對中風后神經干細胞增殖和分化的影響[J]. 萬鳳,司銀楚,牛欣.  中華中醫(yī)藥雜志. 2016(05)
[3]Nerve growth factor promotes in vitro proliferation of neural stem cells from tree shrews[J]. Liu-lin Xiong,Zhi-wei Chen,Ting-hua Wang.  Neural Regeneration Research. 2016(04)
[4]中藥對神經干細胞增殖分化相關信號通路調控的研究進展[J]. 陳娉婷,周小青,周德生,劉旺華,曹澤標,陳昱文.  中藥新藥與臨床藥理. 2015(06)
[5]Neuroprotective effects of ginsenoside Rg1-induced neural stem cell transplantation on hypoxic-ischemic encephalopathy[J]. Ying-bo Li,Yan Wang,Ji-ping Tang,Di Chen,Sha-li Wang.  Neural Regeneration Research. 2015(05)
[6]以肺脾腎為軸氣血周流為線論治運動神經元病[J]. 洪逸銘,杜寶新.  世界中西醫(yī)結合雜志. 2015(04)
[7]神經干細胞的增殖與分化對缺血性腦卒中的作用及中醫(yī)理論探討[J]. 宋祖榮.  赤峰學院學報(自然科學版). 2015(05)
[8]銀杏內酯B對體外培養(yǎng)神經干細胞內HIF-1α及PI3K/Akt信號通路的影響[J]. 劉娜,袁寶強,孫康欽,白蓮琴,李騰騰.  中風與神經疾病雜志. 2014(06)
[9]銀杏內酯B對損傷神經干細胞內HIF-1α及PI3K/Akt信號通路的影響[J]. 劉娜,孫康欽,白蓮琴,李騰騰,董紅燕,袁寶強.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2014(11)
[10]腦微血管內皮細胞通過分泌血管內皮生長因子促進神經干細胞增殖的研究[J]. 黃惠鴻,張素平,凌莉,劉博會,何銳,王慕真,鄧婉青.  實用醫(yī)學雜志. 2013(20)

博士論文
[1]低氧對神經干細胞中miR-210的表達調控及功能研究[D]. 王飛.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2013

碩士論文
[1]三種中藥有效成分調控中風后星形膠質細胞的作用及其機制[D]. 劉峻崎.北京中醫(yī)藥大學 2016
[2]人參皂苷對中風后神經干細胞增殖、分化的作用和機制[D]. 白華靜.北京中醫(yī)藥大學 2015
[3]黃芪甲苷對缺糖缺氧復糖復氧大鼠腦微血管內皮細胞及膠質細胞的保護機制研究[D]. 趙清輝.河南大學 2015
[4]TRAIL基因轉染神經干細胞的實驗研究[D]. 邢亮.瀘州醫(yī)學院 2013
[5]大鼠腦缺血VEGF與NG2細胞增殖關系的初步研究[D]. 焦巖.第三軍醫(yī)大學 2010



本文編號：3282472