目的應(yīng)用立體定位技術(shù)將谷氨酸脫羧酶（glutamic acid decarboxylase2, GAD65）高效特異的siRNA注射到PD大鼠蒼白球內(nèi)側(cè)部（internal segment of globuspallidus，GPi）沉默GAD65，觀察基因治療后PD大鼠運(yùn)動(dòng)行為變化、腦內(nèi)遞質(zhì)含量變化和基因治療前后電生理的變化、，為帕金森病的治療探索一個(gè)新的注射靶點(diǎn)。方法將PD大鼠隨機(jī)分成空白對(duì)照組，載體對(duì)照組和基因治療組，每組24只鼠，分別按照4W，8W，16W的時(shí)間點(diǎn)，每組隨機(jī)取出8只鼠，通過行為學(xué)檢測(cè)（旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)、步態(tài)實(shí)驗(yàn)）觀察大鼠的運(yùn)動(dòng)情況；通過免疫組織化學(xué)檢測(cè)腦內(nèi)Glutamicacid、GABA含量的變化及GAD65、TH陽性神經(jīng)元的表達(dá)；通過蛋白印跡（Western blot）、高效液相色譜（HPLC）；通過電生理檢測(cè)觀察大鼠神經(jīng)元自發(fā)放電的變化。結(jié)果6-OHDA損傷后8周，有60%的大鼠30分鐘平均轉(zhuǎn)速大于210轉(zhuǎn)。步態(tài)實(shí)驗(yàn)觀察PD大鼠的足跡，兩側(cè)前肢比較可看出患肢活動(dòng)受限，導(dǎo)致足跡明顯變小變淺。GPi基因注射后4W¹6W，基因治療組的PD大鼠的旋轉(zhuǎn)... 

【文章來源】：錦州醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

制作PD大鼠（三）模型大鼠的檢測(cè)

所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P﹤0.01 為結(jié) 果的檢測(cè)結(jié)果果立體定位儀造模手術(shù)的大鼠，約有 1量等均是人為操作不當(dāng)。大約 60%的、少動(dòng)、以及尾巴僵直等異常行為（圖

圖 7 正常大鼠足跡 圖 8 PD 大鼠足跡（二）旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果圖7 紅色箭頭是患側(cè)，黑色箭頭是健側(cè)，兩者無明顯區(qū)別；圖8 為PD大鼠的足跡，紅色箭頭是患側(cè)，黑色箭頭是健側(cè)，兩側(cè)相比較可看出患肢足跡明顯變小變淺。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]重組大鼠谷氨酸脫羧酶載體的構(gòu)建和功能分析(英文)[J]. 劉建生,王倩,張繼波,孔令菊,姚素艷,鄭德宇,徐群淵.  Neuroscience Bulletin. 2011(06)
[2]針刺治療帕金森病的現(xiàn)狀和研究進(jìn)展[J]. 季超,張曉芳,馬振旺,程為平.  中醫(yī)臨床研究. 2011(11)
[3]新型重組AAV5/5載體及包裝系統(tǒng)[J]. 董小巖,田文洪,袁振華,譚淑萍,吳小兵.  生物工程學(xué)報(bào). 2010(05)
[4]帕金森病蒼白球神經(jīng)元放電的非線性特征[J]. 王舉磊,高國棟,菅忠,王學(xué)廉,賀世明,李維新.  中國臨床康復(fù). 2005(17)



本文編號(hào)：3238570