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HDAC6-p97/VCP調(diào)控“泛素化—自噬通路”逆轉(zhuǎn)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激耐受的相關(guān)機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-05-28 16:00
  目的:1.明確組蛋白脫乙;敢种苿㏕ubastatin A協(xié)同替莫唑胺對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞耐藥株的殺傷作用;2.探討組蛋白脫乙;敢种苿㏕ubastatin A協(xié)同替莫唑胺殺傷膠質(zhì)瘤細(xì)胞耐藥株的機(jī)制。材料與方法:構(gòu)建四種不同膠質(zhì)瘤細(xì)胞系耐藥株,預(yù)先用Tubastatin A處理后,采用CCK-8法、Caspase-3凋亡檢測(cè)法、Hoechst 33342/PI雙染法及Tunel法檢測(cè)細(xì)胞活力及凋亡狀態(tài)。采用蛋白質(zhì)印記實(shí)驗(yàn)及免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各個(gè)細(xì)胞系中組蛋白脫乙;6相關(guān)細(xì)胞信號(hào)通路的基因表達(dá)情況及相應(yīng)分子之間作用。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS19統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理,所有定量實(shí)驗(yàn)至少獨(dú)立重復(fù)3次,圖中的數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±S.D.)。多組樣本方差假設(shè)相同市采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),多組樣本方差明顯不同時(shí),在用Bonferroni實(shí)驗(yàn)矯正后采用Anova檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1.Western blotting結(jié)果顯示:GRP78,磷酸化IRE1α,HDAC6在腫瘤組織樣本的表達(dá)水平高于正常腦組織中的表達(dá)水平;p97/VCP在腫瘤組織樣本的表達(dá)水平低于正... 

【文章來源】:廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.3 藥物作用
    2.4 CCK-8 法測(cè)定不用加藥方式對(duì)四系細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率
    2.5 Caspase-3 活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)測(cè)定各個(gè)細(xì)胞系凋亡狀況
    2.6 Hoechst 33342/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況
    2.7 Tunel法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況
    2.8 細(xì)胞蛋白提取及蛋白濃度測(cè)定
    2.9 Western blotting法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)各基因表達(dá)情況
    2.10 免疫共沉淀檢測(cè)方法
    2.11 免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色
    2.12 實(shí)時(shí)定量PCR分析
    2.13 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
第三章 結(jié)果
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
發(fā)表論文情況


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞和膠質(zhì)瘤干細(xì)胞體外侵襲抑制作用的比較[J]. 謝蕊繁,張所軍,高寶成,萬鋒,郭東生,雷霆.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2010 (10)



本文編號(hào):3208336

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