帕金森�。≒arkinson’s disease,PD）是一種常見的神經(jīng)退行性疾病�；颊叩牟±硖卣魇侵心X黑質區(qū)域的多巴胺能神經(jīng)元（Dopaminergic neuron,DN）出現(xiàn)特異性損傷和死亡,但其病理發(fā)生的原因至今不明;一般認為這種損傷和死亡可能與多巴胺（dopamine,DA）的代謝有緊密聯(lián)系。已知DA極易被氧化形成多巴胺醌（dopamine quinone,DAQ）,而DAQ可與蛋白質的巰基結合,形成醌蛋白,造成蛋白質活性下降甚至失活,從而導致細胞毒性。這是否是PD患者DN持續(xù)死亡的原因目前眾說不一。在前期研究中,我們課題組發(fā)現(xiàn)隨著年齡增加老齡鼠黑質DN逐漸減少的同時,在老齡大鼠黑質區(qū),乳酸脫氫酶B（Lactate dehydrogenase B,LDHB）、α-烯醇化酶（Enolase 1,ENO1）及蘋果酸脫氫酶-1（Malate dehydrogenase-1,MDH1）中DAQ的修飾顯著增多;由于這些蛋白質是能量代謝過程中的關鍵酶,研究它們的醌化是否為DN大量死亡的直接因素,有助于闡明PD的發(fā)病機制,為PD發(fā)病的有效干預和治療提供新的思路。首先,我們以人神經(jīng)母細胞瘤細... 

【文章來源】：華東師范大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞
前言
第一章 多巴胺對細胞的毒性作用
    第一節(jié) 材料與方法
        1.1.1 實驗材料
        1.1.2 實驗方法
    第二節(jié) 實驗結果
        1.2.1 DA對 SH-SY5Y細胞存活率的影響
        1.2.2 DA作用SH-SY5Y細胞后醌蛋白含量的變化
        1.2.3 DA對細胞內能量代謝關鍵酶LDHB、ENO1、MDH1 含量的影響
    第三節(jié) 討論與分析
第二章 多巴胺導致細胞死亡的途徑研究
    第一節(jié) 材料與方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗方法
    第二節(jié) 實驗結果
        2.2.1 質粒轉染效率檢測
        2.2.2 RNAi敲低細胞內能量代謝關鍵酶的效果檢測
        2.2.3 能量代謝關鍵酶表達量下調時細胞的存活率檢測
        2.2.4 能量代謝關鍵酶表達量下調時細胞內ATP含量檢測
        2.2.5 能量代謝關鍵酶表達量下調時細胞內線粒體膜電位檢測
        2.2.6 能量代謝關鍵酶表達量下調時細胞內NADPH/NADP+檢測
        2.2.7 DA及 L-DOPA對能量代謝關鍵酶表達量下調的細胞存活率的影響
    第三節(jié) 討論與分析
第三章 結論、不足與展望
    第一節(jié) 結論
    第二節(jié) 不足與展望
綜述
參考文獻
致謝



本文編號：3189809