目的:利用三氣培養(yǎng)箱構(gòu)建神經(jīng)干細(xì)胞低氧損傷模型,觀察白細(xì)胞介素-10（IL-10）是否對低氧狀態(tài)下神經(jīng)干細(xì)胞的損傷產(chǎn)生保護(hù)作用,探討IL-10是否通過激活JAK2/STAT3信號通路拮抗低氧誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞凋亡。方法:采用小鼠C17.2神經(jīng)干細(xì)胞系作為研究對象,利用三氣培養(yǎng)箱模擬低氧環(huán)境,建立NSCs低氧損傷模型。第一階段:實(shí)驗(yàn)分為正常對照組和低氧干預(yù)組,分別于低氧0h、24h、48h、72h時(shí)間點(diǎn)運(yùn)用噻唑藍(lán)（MTT）比色法觀察低氧對NSCs的損傷,同時(shí)摸索低氧對NSCs影響的適宜時(shí)間;于低氧0h、24h、48h時(shí)間點(diǎn)用吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）熒光雙染法觀察低氧狀態(tài)下細(xì)胞凋亡及形態(tài)學(xué)變;用Western Blot檢測HIF-1α蛋白的表達(dá);第二階段:實(shí)驗(yàn)分為低氧培養(yǎng)組、低氧+IL-10干預(yù)組,分別于低氧0h、24h、48h時(shí)間點(diǎn)用MTT比色法檢測NSCs的存活率。第三階段:將實(shí)驗(yàn)分為正常對照組、低氧對照組、低氧+IL-10干預(yù)組、低氧+IL-10+AG-490（JAK2/STAT3通路阻斷劑）組、低氧+AG-490組,利用Western Blot檢測各組細(xì)胞p-STAT3、Bcl-... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英文縮略語索引
第1章 緒論
第2章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)場地及細(xì)胞
    2.2 主要儀器及試劑
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 NSCs的培養(yǎng)、傳代及鑒定
    3.2 實(shí)驗(yàn)分組
    3.3 MTT比色法檢測NSCs存活率
    3.4 顯微鏡觀察各組細(xì)胞凋亡情況
    3.5 Western Blot檢測各組Bcl-2、Bcl-XL、p-STAT3等蛋白的表達(dá)
    3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第5章討論
第6章結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 IL-10 在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]白介素-10對腦出血大鼠腦組織核因子-кB、細(xì)胞間黏附分子-1表達(dá)及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響[J]. 蔣國紅,陳然,黃良國,施迎兵,祝紅.  臨床神經(jīng)病學(xué)雜志. 2012(03)
[2]IL-10、IL-12與吉蘭-巴雷綜合征相關(guān)性研究[J]. 劉洪波,連亞軍,許予明,方樹友.  中國實(shí)用內(nèi)科雜志. 2002(11)



本文編號：3150395