本文關(guān)鍵詞：小膠質(zhì)細胞在EAE小鼠模型中的保護作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:本研究利用EAE小鼠模型探討小膠質(zhì)細胞的神經(jīng)保護作用。方法:1.本研究用髓鞘少突膠質(zhì)細胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫C57BL/6小鼠誘導(dǎo)EAE模型,按照隨機分組的原則將72只小鼠分為正常對照組、EAE模型組、Tuftsin干預(yù)組三組;免疫后第1天用微量注射泵在EAE小鼠皮下緩慢注射500μM Tuftsin對小鼠進行干預(yù)治療,正常對照組與EAE模型組用微量注射泵皮下注射生理鹽水。從免疫后第1天開始采用國際公認(rèn)的神經(jīng)功能評分標(biāo)準(zhǔn)對各組小鼠進行神經(jīng)功能評分。2.分別在免疫后第7天、14天、21天及28天處死各組小鼠并取其腦和脊髓組織,行組織病理學(xué)LFB染色及MBP免疫組織化學(xué)染色,觀察并比較各組實驗小鼠組織病理學(xué)改變的差異;通過RT-PCR方法檢測TNF-α、TGF-β、IL-10的含量;Western blot方法測定iba-1蛋白的含量。結(jié)果:1.各組小鼠神經(jīng)功能的變化:正常對照組小鼠均未發(fā)現(xiàn)神經(jīng)功能障礙;EAE模型組和Tuftsin干預(yù)組在免疫后第9天相繼發(fā)病,免疫后21天達到發(fā)病高峰期,EAE組較Tuftsin干預(yù)組小鼠臨床癥狀明顯嚴(yán)重;EAE模型組的平均神經(jīng)功能評分明顯高于Tuftsin干預(yù)組。2.各組實驗小鼠脊髓組織病理改變:正常對照組在各時間點組織學(xué)染色結(jié)果顯示脊髓組織結(jié)構(gòu)均完整,髓鞘呈藍色,MBP陽性為棕褐色,無髓鞘的脫失。EAE組小鼠在初始發(fā)病期可見到白質(zhì)區(qū)結(jié)構(gòu)疏松,髓鞘染色較淡,髓鞘斷裂、不連續(xù);在發(fā)病高峰期髓鞘脫失嚴(yán)重;在恢復(fù)期,可見少量髓鞘再生;而Tuftsin干預(yù)組小鼠脊髓組織髓鞘脫失程度低于EAE模型組。3.同一時間不同實驗組各細胞因子的比較發(fā)現(xiàn):在免疫后第14天、21天、28天EAE模型組的IL-10和TGF-b的表達量低于Tuftsin干預(yù)組,而TNF-a的表達量卻高于Tuftsin干預(yù)組。比較同一實驗組在不同時間點各細胞因子的變化:EAE模型組和Tuftsin干預(yù)組TNF-a、IL-10和TGF-b均隨著病程的發(fā)展表達量持續(xù)升高,EAE模型組TNF-a的表達量明顯高于Tuftsin干預(yù)組,而IL-10和TGF-b 的表達卻明顯低于Tuftsin干預(yù)組。4.實驗小鼠在各時間點腦組織iba-1蛋白表達的變化:對照組有少量iba-1蛋白的表達,在各時期無明顯變化。發(fā)病前期,EAE模型組和Tuftsin干預(yù)組iba-1蛋白的表達與正常對照組無差異。初始發(fā)病期,EAE模型組和Tuftsin干預(yù)組iba-1蛋白的表達亦顯著升高,但Tuftsin干預(yù)組iba-1蛋白的表達量高于EAE模型組。直至免疫后第21天及28天,EAE模型組和Tuftsin干預(yù)組iba-1蛋白的表達量持續(xù)顯著升高,且兩組相比Tuftsin干預(yù)組明顯高于EAE模型組。結(jié)論:1.Tuftsin干預(yù)組小鼠發(fā)病率低,起病時間延長,神經(jīng)功能損害嚴(yán)重程度輕,且恢復(fù)較快。2.Tuftsin干預(yù)組小鼠脊髓組織的髓鞘脫失程度輕。3.Tuftsin干預(yù)組小鼠腦組織中的促炎因子水平低,抗炎因子水平高。4.Tufusin能夠促進小膠質(zhì)細胞的激活及吞噬活性。5.小膠質(zhì)細胞在Tuftsin的刺激基礎(chǔ)上激活,能夠從促炎性表型M1轉(zhuǎn)化為抗炎性表型M2,從而發(fā)揮抗炎性作用,在EAE中發(fā)揮保護作用。
【關(guān)鍵詞】：多發(fā)性硬化 實驗性自身免疫性腦脊髓炎 小膠質(zhì)細胞 促吞噬肽 保護作用
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R-332;R744.51
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-13
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-13
• 1 材料和方法13-21
• 1.1 主要材料和試劑13-14
• 1.1.1 實驗動物13
• 1.1.2 制備EAE模型所需抗原及試劑13
• 1.1.3 主要試劑及來源13
• 1.1.4 主要儀器及來源13-14
• 1.2 實驗方法14-20
• 1.2.1 動物模型制備14
• 1.2.2 實驗動物神經(jīng)功能評分14-15
• 1.2.3 組織病理學(xué)染色15-17
• 1.2.4 實時熒光定量PCR（RT-PCR）17-19
• 1.2.5 Western blot檢測19-20
• 1.3 統(tǒng)計學(xué)處理20-21
• 2 結(jié)果21-32
• 2.1 各組實驗小鼠發(fā)病情況21-24
• 2.1.1 發(fā)病率的比較22
• 2.1.2 平均潛伏期（起病時間）的比較22
• 2.1.3 平均神經(jīng)功能評分比較22-24
• 2.2 各組實驗小鼠脊髓組織病理學(xué)結(jié)果24-29
• 2.3 各組實驗小鼠在不同時期各細胞因子表達量的比較29-31
• 2.4 Tuftsin對EAE模型中小膠質(zhì)細胞的影響31-32
• 3 討論32-44
• 3.1 多發(fā)性硬化和EAE模型的建立32-33
• 3.2 小膠質(zhì)細胞的特點及在中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘疾病中的作用33-44
• 3.2.1 小膠質(zhì)細胞的來源及形態(tài)33-34
• 3.2.2 小膠質(zhì)細胞的激活34-35
• 3.2.3 小膠質(zhì)細胞的分化35-36
• 3.2.4 小膠質(zhì)細胞的功能36-44
• 4 結(jié)論44-45
• 參考文獻45-53
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明53-54
• 綜述 小膠質(zhì)細胞在多發(fā)性硬化中的保護作用54-65
• 綜述參考文獻59-65
• 致謝65-66
• 個人簡歷66

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 杜一星,王偉;小膠質(zhì)細胞的活化與調(diào)控[J];國外醫(yī)學(xué)(腦血管疾病分冊);2004年08期

2 李小媚;李愛萍;;小膠質(zhì)細胞的發(fā)育和功能[J];解剖學(xué)研究;2010年03期

3 楊逢春;顯示小膠質(zhì)細胞方法的改進[J];解剖學(xué)研究;2002年02期

4 袁瓊蘭,郭勇,王瓊,鄧?yán)?高小青,余鴻,古元;小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)、分離、純化和鑒定的初步研究[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2002年05期

5 劉鋒,朱長庚;小膠質(zhì)細胞激活的分子機制[J];解剖科學(xué)進展;2003年02期

6 蔣平,彭艷,倪健,向正華,焦炳華;小膠質(zhì)細胞蛋白質(zhì)組三維分離方法的建立[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2005年06期

7 熊懷林,范光碧,胡興宇;小膠質(zhì)細胞在腦缺血中的作用[J];四川解剖學(xué)雜志;2005年02期

8 魏桂榮,張敏,董繼華,梅元武,劉仁剛;構(gòu)建一種高產(chǎn)量小膠質(zhì)細胞體外純化培養(yǎng)的方法(英文)[J];中國臨床康復(fù);2005年21期

9 趙洋;孫素真;;小膠質(zhì)細胞和癲癇[J];中國神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志;2008年01期

10 王均輝;孫峰波;秦綠葉;岳鑫;于常海;;異�；罨男∧z質(zhì)細胞的特征與功能[J];生理科學(xué)進展;2008年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 韓書珍;李雪梅;牛文澤;陳翔;王果;李澤宜;;激光掃描共聚焦顯微鏡觀察大鼠局灶性腦缺血半暗區(qū)內(nèi)小膠質(zhì)細胞的變化及意義[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

2 李捷;劉勇;張蓬勃;肖新莉;呂海俠;李敏杰;康前雁;鄧美英;;大鼠局灶性腦缺血后小膠質(zhì)細胞的來源[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

3 賈思遠;雷露雯;王克萬;王勇;;煙堿型乙酰膽堿受體在離體海馬小膠質(zhì)細胞上的表達與定位[A];廣東省藥學(xué)會2009學(xué)術(shù)年會論文集[C];2010年

4 劉鋒;朱長庚;劉慶瑩;;小膠質(zhì)細胞的激活及其在致癇過程中的作用機制[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

5 趙天智;;血清白蛋白刺激小膠質(zhì)細胞前炎癥細胞因子表達的作用研究[A];中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

6 趙敏;袁云;趙培園;李t，

本文編號：305262