本文關鍵詞：脊髓星形膠質(zhì)細胞Pannexin1在神經(jīng)病理性疼痛大鼠中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景與目的神經(jīng)病理性疼痛(Neuropathic pain,NP)是常見但卻缺乏有效治療手段的臨床綜合征。國際疼痛協(xié)會在最新召開的年會上對其最新的定義是“創(chuàng)傷或疾病累及軀體感覺系統(tǒng)后直接導致的疼痛”[1]。臨床上以自發(fā)痛、誘發(fā)痛、痛覺過敏、疼痛異常以及痛覺超敏為其典型特點[2]。NP是多由外周神經(jīng)損傷引起,也可因中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病變導致,其發(fā)病機制復雜,分子機制尚不完全清楚,近年來一直是疼痛領域研究的熱點。由于疼痛的緩解機制還不清楚,雖然臨床上有大量的藥物正在治療NP,但是效果都不是特別理想。近年來,膠質(zhì)細胞被發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生和維持中起著重要的作用,星形膠質(zhì)細胞正在被重新認識,探索其激活的分子機制有可能為臨床疼痛治療提供新的思路。Pannexin通道蛋白是一類縫隙連接蛋白(gap junctions,GJs),目前發(fā)現(xiàn)存在三種亞型,廣泛存在于全身大部分組織中,尤其在神經(jīng)系統(tǒng)中大量表達[3]。它能連接兩個相鄰細胞,也能形成半通道與細胞外液相通,能夠?qū)崿F(xiàn)離子及代謝小分子物質(zhì)在細胞和組織液間的快速交換。有研究發(fā)現(xiàn),星形膠質(zhì)細胞上Pannexin1(PX1)半通道能夠通過控制ATP的釋放和調(diào)節(jié)鈣離子的內(nèi)流,影響星形膠質(zhì)細胞的激活狀態(tài)[4]。本研究旨在通過建立坐骨神經(jīng)分支選擇性結(jié)扎模型(spared nerve injury,SNI),觀察大鼠脊髓背角PX1的表達變化以及通過鞘內(nèi)注射縫隙連接阻斷劑甘珀酸,分析PX1半通道與星形膠質(zhì)細胞的關系。主要技術路線和方法1.雄性SD大鼠24只隨機分為假手術組(sham組,n=4)、對照組(WT組,n=4)和坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷組(SNI組,n=16)。在術前、術后3、5、7、14天各時間點測定大鼠右側(cè)后爪的50%機械痛縮足閾值(mechanical withdrawal threshold,MWT)。WT組和sham組大鼠均在術后7天處死,SNI組大鼠在各時間點各取4只老鼠處死,均取脊髓L3~L6段用Western blot法檢測PX1蛋白的表達水平。2.雄性SD大鼠32只隨機分為sham組16只和SNI組16只,所有大鼠均在術前、術后3、5、7、14天各時間點測定大鼠右側(cè)后肢的50%MWT。行為學測試后,sham組和SNI組大鼠在各時間點各取4只處死,取脊髓L3~L6段進行免疫組化染色,檢測脊髓背角內(nèi)膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)的表達水平。3.雄性SD大鼠20只隨機分為A組、B組、C組和D組,所有大鼠均于建模前先進行鞘內(nèi)置管。A組:空白大鼠+注射生理鹽水20u L;B組:sham大鼠+注射生理鹽水20u L;C組:SNI大鼠+注射生理鹽水20uL;D組:SNI大鼠+注射甘珀酸(CBX)20uL,所有大鼠均連續(xù)注射7天,每天一次。在注射前、注射后3、5、7天測定大鼠右側(cè)后爪的MWT值,并在注射7天后取脊髓L3~L6段進行免疫組化染色,檢測脊髓背角內(nèi)GFAP的表達水平。結(jié)果1.WT組及sham組大鼠各時間點MWT值比較無明顯變化。SNI組大鼠MWT值在術后3天開始降低,在第7天達到最低值,第14天有所恢復,但仍低于術前(P0.05);SNI組各時間點MWT值較WT組和sham組均有明顯差異(P0.05)。而SNI組大鼠脊髓背角內(nèi)PX1表達增多,并隨時間增強,明顯高于對照組和sham組(P0.05);SNI組脊髓背角內(nèi)GFAP表達較WT組、sham組明顯增強,各時間點均有差異(P0.05)。WT組及sham組脊髓背角的PX1和GFAP表達差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.A、B兩組各時間點MWT值比較無明顯變化。C組D組注射后各時間點MWT值均明顯低于A、B組(P0.05)。D組注射后3天的MWT值與C組比較無差異,但是5天、7天所測的值要高于C組。免疫組化顯示,C、D兩組GFAP陽性細胞表達水平較A、B組高,但是D組各時間點陽性細胞數(shù)表達較C組均有明顯下調(diào),且存在統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論GFAP作為星形膠質(zhì)細胞的標志,其在SNI組中表達上調(diào)以及大鼠右后肢MWT值的改變,說明手術建立疼痛模型的成功�？p隙連接蛋白PX1在SNI組中表達的上調(diào)提示其可能參與了神經(jīng)病理性疼痛的激活。而在鞘內(nèi)使用縫隙連接阻斷劑后能夠提高大鼠右后肢的MWT值,且下調(diào)脊髓背角GFAP陽性細胞數(shù),提示PX1半通道可能在調(diào)節(jié)神經(jīng)病理性疼痛中起著重要作用。
【關鍵詞】：神經(jīng)病理性疼痛 縫隙連接蛋白 Pannexin 星形膠質(zhì)細胞 甘珀酸 膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)
【學位授予單位】：第三軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R741
【目錄】：

• 英文縮寫一覽表4-5
• 英文摘要5-8
• 中文摘要8-11
• 第一章 前言11-12
• 第二章 總材料與方法12-20
• 2.1 實驗材料12-14
• 2.2 實驗方法14-20
• 第三章 神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓背角PX1 和GFAP的表達變化20-28
• 3.1 材料和方法20-21
• 3.2 結(jié)果21-25
• 3.3 討論25-28
• 第四章 鞘內(nèi)注射縫隙連接阻斷劑CBX對大鼠疼痛行為學的改變和脊髓背角GFAP的表達影響28-35
• 4.1 材料和方法28-29
• 4.2 結(jié)果29-32
• 4.3 討論32-35
• 全文小結(jié)35-37
• 附錄37-40
• 參考文獻40-43
• 文獻綜述Pannexin縫隙連接蛋白的研究作用進展43-52
• 參考文獻48-52
• 攻讀碩士期間發(fā)表的文章52-53
• 致謝53

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙欣,徐建國;神經(jīng)病理性疼痛病因及其機制研究進展[J];臨床麻醉學雜志;2004年05期

2 王景陽;;加深了解神經(jīng)病理性疼痛[J];疼痛;2004年Z1期

3 張殟,李興福;神經(jīng)病理性疼痛的病因及治療研究現(xiàn)狀[J];甘肅科技;2005年04期

4 毛鵬;薛富善;;神經(jīng)病理性疼痛的機制和治療進展[J];實用疼痛學雜志;2006年02期

5 閆洪彥;王波;王艷姝;田亞萍;虞雪融;黃宇光;;神經(jīng)病理性疼痛中代謝型谷氨酸受體5型的表達變化[J];中國醫(yī)學科學院學報;2007年01期

6 李琦;曾炳芳;王金武;;神經(jīng)病理性疼痛研究進展[J];中國疼痛醫(yī)學雜志;2007年04期

7 賀奇志;郝吉生;周黎明;鄒定全;蔡璐;;地震傷后神經(jīng)病理性疼痛的機制和治療[J];人民軍醫(yī);2009年04期

8 鄭衛(wèi)紅;楊紅衛(wèi);;化療誘導神經(jīng)病理性疼痛的研究進展[J];腫瘤防治研究;2010年09期

9 ;神經(jīng)病理性疼痛治療進展專欄[J];中國新藥雜志;2010年22期

10 ;神經(jīng)病理性疼痛治療進展專欄[J];中國新藥雜志;2010年23期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳彬;楊曉秋;劉小男;;神經(jīng)病理性疼痛患者抑郁焦慮與疼痛關系的研究[A];中華醫(yī)學會疼痛學分會第八屆年會暨CASP成立二十周年論文集[C];2009年

2 劉敬響;周成華;武玉清;;神經(jīng)病理性疼痛的研究進展[A];全國第一次麻醉藥理學術會議暨中國藥理學會麻醉藥理專業(yè)委員會籌備會論文匯編[C];2010年

3 陳眉;;神經(jīng)病理性疼痛的研究進展[A];2010中國醫(yī)師協(xié)會中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師大會摘要集[C];2010年

4 徐建國;;神經(jīng)病理性疼痛治療靶點和藥物[A];2006年中華醫(yī)學會全國麻醉學術年會知識更新講座[C];2006年

5 丁震宇;杜成;謝曉冬;;癌癥相關神經(jīng)病理性疼痛新進展[A];第七屆全國癌癥康復與姑息醫(yī)學大會大會論文集和專題講座[C];2011年

6 周鈺;;神經(jīng)病理性疼痛的診斷和治療進展[A];寧夏醫(yī)學會疼痛學分會首屆疼痛診療培訓班論文集[C];2011年

7 姚永興;;神經(jīng)病理性疼痛藥物治療新靶點研究進展[A];2009年浙江省麻醉學學術會議論文匯編[C];2009年

8 姚永興;;神經(jīng)病理性疼痛藥物治療新靶點研究進展[A];第三屆浙江省疼痛學術研討會資料匯編[C];2010年

9 宋學軍;;神經(jīng)病理性疼痛的新機制和治療新靶點[A];中華醫(yī)學會疼痛學分會第八屆年會暨CASP成立二十周年論文集[C];2009年

10 于生元;;神經(jīng)病理性疼痛診治專家共識[A];中華醫(yī)學會疼痛學分會第八屆年會暨CASP成立二十周年論文集[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 本報記者 吳衛(wèi)紅;神經(jīng)病理性疼痛：困擾醫(yī)患雙方的臨床難題[N];健康報;2010年

2 記者 朱國旺;神經(jīng)病理性疼痛尚缺有效治療手段[N];中國醫(yī)藥報;2010年

3 記者 王丹;新版神經(jīng)病理性疼痛診療共識發(fā)布[N];健康報;2013年

4 采訪整理 本報記者 齊芳;“幫病人緩解疼痛”[N];光明日報;2010年

5 記者 劉欣茹;200家神經(jīng)病理性疼痛診療中心將建[N];健康報;2012年

6 國際神經(jīng)修復學會 陳琳　黃紅云 左煥琮;神經(jīng)痛可采用修復治療[N];健康報;2011年

7 王迪;神經(jīng)痛藥物市場有利可圖[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2005年

8 吳志;頑固性疼痛治療新理念[N];大眾衛(wèi)生報;2007年

9 記者 林世才 張清ng 通訊員 陳鵬輝;癌性神經(jīng)病理性疼痛可手術治療[N];健康報;2014年

10 董國平;好定位助臨床推廣“三級跳”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2014年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于婷;鉀通道KCNQ2/3/5在糖尿病神經(jīng)病變疼痛中的作用及其機制[D];山東大學;2015年

2 林培容;神經(jīng)病理性疼痛形成過程中嘌呤受體作用的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年

3 思永玉;免疫抑制劑對大鼠神經(jīng)病理性疼痛防治作用的有效性探討[D];四川大學;2006年

4 孫濤;脊髓星形膠質(zhì)細胞參與神經(jīng)病理性疼痛調(diào)制的實驗研究[D];華中科技大學;2007年

5 徐紅萌;乳鐵蛋白和附子對神經(jīng)病理性疼痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用[D];河北醫(yī)科大學;2005年

6 王波;神經(jīng)病理性疼痛大鼠大麻素Ⅱ型受體介導的抗傷害作用及受體表達的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年

7 王英偉;神經(jīng)病理性疼痛中鈉通道β亞基的可塑性和功能研究[D];第二軍醫(yī)大學;2006年

8 金小高;神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓神經(jīng)型一氧化氮合酶多樣性的鑒定與分析[D];華中科技大學;2006年

9 鐘敏;已酮可可堿對神經(jīng)病理性疼痛及其相關細胞因子的影響[D];中國醫(yī)科大學;2007年

10 孫雅潔;水通道4在神經(jīng)病理性疼痛中的作用及可能機制[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 冷冬梅;慢性神經(jīng)病理性疼痛的臨床調(diào)查[D];四川大學;2007年

2 魏博;神經(jīng)病理性疼痛的臨床調(diào)查[D];浙江大學;2012年

3 王鵬磊;選擇性COX-2抑制劑替泊沙林在大鼠脊髓膠質(zhì)細胞激活和神經(jīng)病理性疼痛中的作用[D];鄭州大學;2015年

4 金建萍;川芎嗪對神經(jīng)病理性疼痛大鼠背根神經(jīng)節(jié)GAP-43mRNA表達的影響[D];蘭州大學;2015年

5 王志桐;2型囊泡谷氨酸轉(zhuǎn)運體與神經(jīng)病理性疼痛的相關性研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2015年

6 劉瑞杰;糖皮質(zhì)激素受體與脊髓小膠質(zhì)細胞參與神經(jīng)病理性疼痛的機制研究[D];鄭州大學;2015年

7 許雅瓊;基于NF-κB信號通路探討氧化苦參堿對神經(jīng)病理性疼痛的鎮(zhèn)痛作用[D];寧夏醫(yī)科大學;2015年

8 李潤芝;中文版DN4神經(jīng)病理性疼痛量表的制定與評估[D];山西醫(yī)科大學;2015年

9 馬艷;元胡止痛方治療神經(jīng)病理性疼痛的藥效評價及分子機理探索[D];中國中醫(yī)科學院;2015年

10 周功銳;脊髓星形膠質(zhì)細胞Pannexin1在神經(jīng)病理性疼痛大鼠中的作用[D];第三軍醫(yī)大學;2015年

  本文關鍵詞：脊髓星形膠質(zhì)細胞Pannexin1在神經(jīng)病理性疼痛大鼠中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：300507