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HMGB1對擬缺血rBMECs上P-gp的調節(jié)作用研究

發(fā)布時間:2020-12-20 15:11
  目的:探討擬缺血損傷星形膠質細胞中HMGB1的變化情況以及對共培養(yǎng)體系中大鼠腦微血管內皮細胞(Rat brain microvascular endothelial cells,rBMECs)上P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的影響及相關機制。方法:1、取出生一周內的SD大鼠原代培養(yǎng)星形膠質細胞、腦微血管內皮細胞,倒置顯微鏡下觀察細胞的形態(tài)、免疫熒光染色法鑒別星形膠質細胞。2、取不同濃度的Na2S2O4溶液作用于原代培養(yǎng)的星形膠質細胞,MTT法檢測擬缺血6 h后神經(jīng)膠質細胞的存活率。3、借助transwell技術建立星形膠質細胞與rBMECs共培養(yǎng)體系,筷式電極測定共培養(yǎng)體系10-11天內跨膜電阻(Transendothelial electrical resistance,TEER)的變化,待TEER穩(wěn)定后用于后續(xù)實驗。不同濃度的Na2S2O4溶液損傷星形膠質細胞后,采用全波長酶標儀檢測transwell外室熒光素鈉(Fluoresc... 

【文章來源】:河南大學河南省

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

HMGB1對擬缺血rBMECs上P-gp的調節(jié)作用研究


熒光顯微鏡下星形膠質細胞的形態(tài)(400×)

星形膠質細胞,細胞存活率


Fig 1-2 Identification of astrocytes(400×)4.3 Na2S2O4對于星形膠質細胞的激活與損傷作用不同濃度的 Na2S2O4作用于星形膠質細胞 6 h,細胞的存活率不同。各組細胞的 MTT吸光度值和細胞存活率見于表1-1、圖1-3。其中終濃度為1 mM、1.5 mM、2 mM的Na2S2O4損傷后細胞存活率分別為 94.35%、86.74%、88.85%,與 control 相比無顯著性差異;而終濃度為 2.5 mM、3 mM、3.5 mM、3.75 mM、4 mM 的 Na2S2O4損傷細胞后,細胞存活率分別為 76.04%、70.37%、68.93%、46.47%、41.00%與 control 相比有顯著性差異。因為神經(jīng)膠質細胞達到一定的損傷程度的時候才會引起 P-gp 的變化,所以本實驗選擇 3mM、3.5 mM、3.75 mM、4 mM 的 Na2S2O4進行下一步的實驗。圖 1-2 星形膠質細胞的鑒別(400×)

膠質細胞


表 1-1 Na2S2O4對神經(jīng)膠質細胞損傷( x±s, n=4)Tab 1-1 The neurogliocyte cells injury induced by Na2S2O4( x±s, n=4)Group(mM) A570Cell survive rate(%)control 0.62±0.04 1001 0.58±0.02 94.351.5 0.52±0.03 86.742 0.52±0.01 88.852.5 0.47±0.02 76.04*3 0.43±0.01 70.37*3.5 0.43±0.03 68.93*3.75 0.29±0.04 46.47*4.0 0.25±0.05 41.00*Note: *: p<0.05 vs.control group

【參考文獻】:
期刊論文
[1]Overexpression of HMGB1 A-box reduced lipopolysaccharide-induced intestinal inflammation via HMGB1/TLR4 signaling in vitro[J]. Fu-Cai Wang,Jing-Xuan Pei,Jun Zhu,Nan-Jin Zhou,Dong-Sheng Liu,Hui-Fang Xiong,Xiao-Qun Liu,Dong-Jia Lin,Yong Xie.  World Journal of Gastroenterology. 2015(25)
[2]雪白睡蓮花中黃酮類成分抗氧化及擬缺血對神經(jīng)細胞作用的研究[J]. 劉瑞凝,王偉,謝偉東,丁怡,杜力軍.  世界科學技術. 2006(05)
[3]細胞模型發(fā)展現(xiàn)狀及應用于中藥研究的探討[J]. 王春梅,喬延江.  世界科學技術. 2004(03)

碩士論文
[1]HMGB1、RAGE及TLR4在腦梗死大鼠腦組織的動態(tài)表達及丹參酮ⅡA的神經(jīng)保護作用[D]. 王力娜.河北醫(yī)科大學 2010



本文編號:2928082

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