線粒體分裂/融合失衡參與高糖缺氧對星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷的實驗研究
發(fā)布時間:2020-12-09 01:03
目的使用高糖聯(lián)合氧糖剝奪(OGD)模型模擬體內(nèi)糖尿病和腦缺血再灌注損傷模型,探討線粒體分裂/融合失衡是否參與高糖加重缺氧對星形膠質(zhì)細(xì)胞的損傷。方法本研究體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞,為了探討高糖和(或)低氧干預(yù)對星形膠質(zhì)細(xì)胞的影響及其機制,分組為:(1)正常糖濃度未缺氧組(NG-Con):DMEM高糖完全培養(yǎng)基,常氧培養(yǎng)箱(37℃,5%CO2);(2)高糖培養(yǎng)未缺氧組(HG-Con):加入50mmol/L葡萄糖的DMEM高糖完全培養(yǎng)基,常氧培養(yǎng)箱(37℃,5%CO2);(3)正常糖濃度缺氧缺糖組(NG-OGD):DMEM高糖完全培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后,放至低氧培養(yǎng)箱(37℃,1%O2,5%CO2)6h,然后再放回常氧培養(yǎng)箱0、6、12、24h;(4)高糖培養(yǎng)缺氧缺糖組(HG-OGD):含50mmol/L葡萄糖的DMEM高糖完全培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后,放至低氧培養(yǎng)箱(37℃,1%O2,5%CO2)6h,然后再放回常氧培養(yǎng)箱0、6、12、24h。通過CCK-8法檢測不同葡萄糖...
【文章來源】:寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
符號說明
前言
材料與方法
1.材料
1.1 主要試劑
1.2 主要儀器設(shè)備
1.3 主要試劑配置
2.方法
2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧(OGD/R)模型的建立
2.3 實驗分組
2.4 CCK-8法檢測細(xì)胞增殖活力
2.5 流式細(xì)胞儀AnnexinV/PI雙染試劑盒檢測細(xì)胞凋亡
2.6 DCFH-DA法檢測ROS含量
2.7 免疫細(xì)胞熒光
2.8 免疫細(xì)胞化學(xué)
2.9 WesternBlot檢測Opa1、Mfn2、Fis1及Drp1的表達
2.10 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
1.不同濃度葡萄糖可影響星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖活力
2.倒置顯微鏡觀察星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)變化
3.高糖加重缺氧引起星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡
4.高糖加重缺氧導(dǎo)致的星形膠質(zhì)細(xì)胞ROS的過量產(chǎn)生
5.線粒體分裂/融合失衡參與高糖缺氧對星形膠質(zhì)細(xì)胞的損傷
5.1 分裂因子Fis1的檢測結(jié)果
5.2 分裂因子Drp1的檢測結(jié)果
5.3 融合因子Mfn2的檢測結(jié)果
5.4 融合因子Opa1的檢測結(jié)果
討論
結(jié)論
附圖
參考文獻
文獻綜述
綜述參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
個人簡介
開題、中期及學(xué)位論文答辯委員組成
本文編號:2905984
【文章來源】:寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
符號說明
前言
材料與方法
1.材料
1.1 主要試劑
1.2 主要儀器設(shè)備
1.3 主要試劑配置
2.方法
2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧(OGD/R)模型的建立
2.3 實驗分組
2.4 CCK-8法檢測細(xì)胞增殖活力
2.5 流式細(xì)胞儀AnnexinV/PI雙染試劑盒檢測細(xì)胞凋亡
2.6 DCFH-DA法檢測ROS含量
2.7 免疫細(xì)胞熒光
2.8 免疫細(xì)胞化學(xué)
2.9 WesternBlot檢測Opa1、Mfn2、Fis1及Drp1的表達
2.10 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
1.不同濃度葡萄糖可影響星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖活力
2.倒置顯微鏡觀察星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)變化
3.高糖加重缺氧引起星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡
4.高糖加重缺氧導(dǎo)致的星形膠質(zhì)細(xì)胞ROS的過量產(chǎn)生
5.線粒體分裂/融合失衡參與高糖缺氧對星形膠質(zhì)細(xì)胞的損傷
5.1 分裂因子Fis1的檢測結(jié)果
5.2 分裂因子Drp1的檢測結(jié)果
5.3 融合因子Mfn2的檢測結(jié)果
5.4 融合因子Opa1的檢測結(jié)果
討論
結(jié)論
附圖
參考文獻
文獻綜述
綜述參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
個人簡介
開題、中期及學(xué)位論文答辯委員組成
本文編號:2905984
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