目的使用高糖聯(lián)合氧糖剝奪（OGD）模型模擬體內(nèi)糖尿病和腦缺血再灌注損傷模型,探討線粒體分裂/融合失衡是否參與高糖加重缺氧對星形膠質細胞的損傷。方法本研究體外培養(yǎng)星形膠質細胞,為了探討高糖和（或）低氧干預對星形膠質細胞的影響及其機制,分組為:（1）正常糖濃度未缺氧組（NG-Con）:DMEM高糖完全培養(yǎng)基,常氧培養(yǎng)箱（37℃,5%CO₂）;（2）高糖培養(yǎng)未缺氧組（HG-Con）:加入50mmol/L葡萄糖的DMEM高糖完全培養(yǎng)基,常氧培養(yǎng)箱（37℃,5%CO₂）;（3）正常糖濃度缺氧缺糖組（NG-OGD）:DMEM高糖完全培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后,放至低氧培養(yǎng)箱（37℃,1%O₂,5%CO₂）6h,然后再放回常氧培養(yǎng)箱0、6、12、24h;（4）高糖培養(yǎng)缺氧缺糖組（HG-OGD）:含50mmol/L葡萄糖的DMEM高糖完全培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后,放至低氧培養(yǎng)箱（37℃,1%O₂,5%CO₂）6h,然后再放回常氧培養(yǎng)箱0、6、12、24h。通過CCK-8法檢測不同葡萄糖... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
符號說明
前言
材料與方法
    1.材料
        1.1 主要試劑
        1.2 主要儀器設備
        1.3 主要試劑配置
    2.方法
        2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2 氧糖剝奪/復糖復氧（OGD/R）模型的建立
        2.3 實驗分組
        2.4 CCK-8法檢測細胞增殖活力
        2.5 流式細胞儀AnnexinV/PI雙染試劑盒檢測細胞凋亡
        2.6 DCFH-DA法檢測ROS含量
        2.7 免疫細胞熒光
        2.8 免疫細胞化學
        2.9 WesternBlot檢測Opa1、Mfn2、Fis1及Drp1的表達
        2.10 統(tǒng)計學處理
結果
    1.不同濃度葡萄糖可影響星形膠質細胞增殖活力
    2.倒置顯微鏡觀察星形膠質細胞形態(tài)變化
    3.高糖加重缺氧引起星形膠質細胞凋亡
    4.高糖加重缺氧導致的星形膠質細胞ROS的過量產(chǎn)生
    5.線粒體分裂/融合失衡參與高糖缺氧對星形膠質細胞的損傷
        5.1 分裂因子Fis1的檢測結果
        5.2 分裂因子Drp1的檢測結果
        5.3 融合因子Mfn2的檢測結果
        5.4 融合因子Opa1的檢測結果
討論
結論
附圖
參考文獻
文獻綜述
    綜述參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄
個人簡介
開題、中期及學位論文答辯委員組成



本文編號：2905984