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顱內(nèi)動脈瘤患者血漿外泌體microRNA表達水平的研究

發(fā)布時間:2020-11-22 05:29
   目的:探討顱內(nèi)動脈瘤(Intracranial Aneurysm,IA)患者血漿外泌體微小RNA(microRNA,miRNA)的表達水平,以期尋找預測與IA發(fā)生、發(fā)展、破裂密切相關(guān)的潛在生物標志物。方法:本研究共納入69名IA和30名健康成人作對照,其中IA患者包括30名未破裂動脈瘤和39名破裂的動脈瘤患者。1.使用外泌體提取試劑盒提取血漿外泌體,通過透射電子顯微鏡與蛋白質(zhì)印記分析鑒定外泌體的形態(tài)與特異性蛋白標志物。2.通過高通量測序技術(shù)在12例IA患者(4例未破裂和8例破裂)和4例健康對照的篩選隊列中分析血漿外泌體miRNA表達譜。此外,通過實時熒光定量反應(Quantitative Real-Time PCR,qRT-PCR)在99名受試者的驗證隊列中隨機選擇上述顯著差異表達的miRNA進行定量分析。3.使用受試者工作特征(Receiver Operating Characteristic,ROC)曲線來評估m(xù)iRNA的診斷效能。結(jié)果:1.本研究提取分離的囊泡物質(zhì),經(jīng)過透射電鏡下觀察外形呈類球形顆粒,直徑范圍為100-150nm;且囊泡狀物表達外泌體特異性蛋白CD9,HSC70和TSG101。2.在高通量測序分析中,共鑒定了181個具有顯著差異(p0.05)表達水平的外泌體miRNA。與對照組相比,未破裂IA患者中顯著上調(diào)的外泌體miRNA有9個,下調(diào)的20個。破裂的IA患者中上調(diào)的外泌體miRNA有21個,下調(diào)的10個。與未破裂IA患者相比,破裂組中顯著上調(diào)的外泌體miRNA個數(shù)是92個,下調(diào)的29個。3.qRT-PCR分析證實外泌體miR-145-5p和miR-29a-3p在IA患者中顯著上調(diào)。在區(qū)分是否患IA時,miR-29a-3p的ROC曲線下面積(AUC)為0.791,多因素分析顯示外泌體miR-29a-3p可能是IA的獨立診斷指標。在區(qū)分動脈瘤是否破裂時,miR-145-5p的AUC為0.773,同樣的,多因素分析顯示外泌體miR-145-5p可能是IA破裂的獨立診斷指標。結(jié)論:本研究初步證實了IA患者存在特異的血漿外泌體miRNA表達譜。篩選出的外泌體miR-29a-3p與miR-145-5p與IA的發(fā)生發(fā)展相關(guān),對診斷IA與預測IA破裂具有一定的指導意義。
【學位單位】:廣西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2019
【中圖分類】:R743
【部分圖文】:

序列,血漿,表達水平,序列


NGS血漿外泌體miR-16-5p表達水平

顱內(nèi)動脈瘤患者血漿外泌體microRNA表達水平的研究


外泌體的特征

單位


27圖 3-2. 平均表達量前十的 miRNA(單位:RPKM)。Figure 3-2. The average expression of the top 10 miRNAs (unit: RPKM).
【相似文獻】

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