星形膠質(zhì)細(xì)胞CD59低表達(dá)參與視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病中樞神經(jīng)系統(tǒng)特異性病灶的形成
【學(xué)位單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:R744.52
【部分圖文】:
23圖 1 CD59 在周圍器官 AQP4 陽性細(xì)胞上高表達(dá),而在星形膠質(zhì)細(xì)胞不表達(dá)。(A)CD59(紅色)在人骨骼肌、腎臟、小腸和支氣管 AQP4 陽性細(xì)胞區(qū)域(綠色)高表達(dá),在人腦內(nèi) GFAP(綠色)和 AQP4(綠色)陽性區(qū)域不表達(dá)。箭頭示陽性區(qū)域,標(biāo)尺=100μm.(B)WesternBlot 檢測小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周各器官的 CD59 表達(dá)量。β-actin 為內(nèi)參。(C)CD59(紅色)在小鼠骨骼肌、腎、胃和小腸內(nèi) AQP4(綠色)陽性區(qū)域高表達(dá),在大腦和脊髓內(nèi) GFAP(綠色)與 AQP4(綠色)的陽性區(qū)域不表達(dá)。箭頭示陽性區(qū)域,標(biāo)尺=50μm人和小鼠體內(nèi) AQP4 與 CD59 的表達(dá)關(guān)系,我們用表格的形式加以總結(jié)(表1),從表格中我們可以看出在外周各器官中,表達(dá) AQP4 的組織同時表達(dá) CD59,而在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi),星形膠質(zhì)細(xì)胞的終足僅表達(dá) AQP4 但不表達(dá) CD59。
天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文 實驗結(jié)果27圖3 小鼠腦內(nèi)CD59過表達(dá)能夠減小NMOSD病灶。小鼠腦內(nèi)注射10 μl對照慢病毒或CD59過表達(dá)慢病毒 3 天后,分別注射 6 μl IgGcon或 IgGNMO加 4 μl 人補體的混合物,7 天后處死小鼠取腦做病理染色。其分組具體為:○1 對照病毒組小鼠注射 IgGNMO和人補體( Conlenti+IgGNMO+hC ); ○2 CD59 過 表 達(dá) 組 小 鼠 注 射 IgGNMO和 人 補 體(CD59lenti+IgGNMO+hC);○3 對照病毒組小鼠注射 IgGcon和人補體(Conlenti+IgGcon+hC)(A)三組小鼠鼠腦注射點附近的 AQP4 染色、GFAP 染色、MBP 染色,標(biāo)尺=1mm。(B)A 圖中3 組小鼠統(tǒng)計出的 GFAP 染色、AQP4 染色和 MBP 染色的丟失面積(mean ±S.E. n = 5)。(C)A 圖中 Conlenti+IgGNMO+hC 組的病灶側(cè)和對側(cè)的放大圖。標(biāo)尺=100μm。IgGcon+hC 注射組相比,IgGNMO+hC 注射組小鼠鼠腦注射點附近區(qū)域的 AQP4、GFAP、MBP 丟失非常明顯(P<0.001),星形膠質(zhì)細(xì)胞破壞和髓鞘脫失嚴(yán)重,證實了我們的 IgGNMO+hC 鼠腦注射造模方法的可靠性,其病灶側(cè)和對側(cè)細(xì)節(jié)進(jìn)一步展示在放大圖中(圖 3C):GFAP 染色可見對側(cè)的星形膠質(zhì)細(xì)胞未活化,病灶側(cè)核心區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞完全脫失
36圖 9 人體外周表達(dá) AQP4 的器官的組織細(xì)胞上的 CD59 能夠增加 AQP4-IgG 和補體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性。人原代氣道上皮細(xì)胞(HTEpiC)(A-D)CD59 沉默慢病毒(CD59-RNAi)或?qū)φ詹《靖腥?3 天后(A 和 B)或者 CD59 中和性抗體 Bric229 或?qū)φ湛贵w孵育半小時后(C 和
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