目的為了評估Hcy代謝相關(guān)基因S-腺苷高半胱氨酸水解酶(S-adenosylhomocysteine hydrolase,AHCY)基因、胱硫醚β合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)基因、二氫葉酸還原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)基因、亞甲基四氫葉酸脫氫酶1(methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 1,MTHFD1)基因、絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶1(serine hydroxymethyltransferase 1,SHMT1)基因啟動子區(qū)DNA甲基化是否與缺血性腦卒中相關(guān),進(jìn)一步研究AHCY、CBS、DHFR、MTHFD1、SHMT1基因啟動子區(qū)甲基化是否可以作為診斷缺血性腦卒中的潛在的生物標(biāo)志物。方法選擇152例腦梗死患者為病例組和152例性別、年齡相匹配的健康對照者為對照組,應(yīng)用熒光定量甲基化特異性PCR(qMSP)檢測AHCY、CBS、DHFR、MTHFD1、SHMT1基因啟動子區(qū)甲基化水平,進(jìn)一步分析其與缺血性腦卒中的相關(guān)關(guān)系。結(jié)果1、病例組AHCY啟動子區(qū)DNA甲基化水平是0.16%(0.07%,0.32%),對照組是0.25%(0.02%,0.67%),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.115,Z=-1.577)。2、病例組CBS啟動子區(qū)DNA甲基化水平是70.20%(49.19%,94.87%),對照組是104.10%(74.65%,132.30%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=3.71E-10,Z=-6.266)。按性別進(jìn)行亞組分析,病例組男性CBS啟動子區(qū)DNA甲基化水平是64.33%(47.72%,85.66%),對照組是105.00%(73.23%,128.85%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=2.667E-08,Z=-5.562)。病例組女性CBS啟動子區(qū)DNA甲基化水平是78.05%(51.81%,107.90%),對照組是102.80%(86.11%,149.90%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.003,Z=-2.990)。按年齡進(jìn)行亞組分析,青年組(≤44歲)中病例組CBS啟動子區(qū)DNA甲基化水平是(69.97±13.61)%,對照組是(114.71±59.62)%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.015,t=-2.636)。中年組(45~59歲)中病例組CBS啟動子區(qū)DNA甲基化水平是56.04%(48.07%,76.23%),對照組是91.71%(68.28%,118.58%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=6.744E-06,Z=-4.502)。老年組(≥60歲)中病例組CBS啟動子區(qū)DNA甲基化水平是81.60%(49.37%,127.45%),對照組是119.35%(87.71%,167.90%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=2.644E-04,Z=-3.648)�；诓±M和對照組之間CBS啟動子區(qū)甲基化水平的研究結(jié)果,我們建立了ROC曲線,ROC曲線下面積(AUC)是0.713(95%CI:0.652-0.773),以87.1%為甲基化截取值可獲得最佳的靈敏度和特異度,分別是67.4%和74.0%。3、病例組DHFR啟動子區(qū)DNA甲基化水平是28.37%(13.40%,50.82%),對照組是44.22%(19.55%,77.78%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=1.648E-04,Z=-3.768)。按性別進(jìn)行亞組分析,病例組男性DHFR啟動子區(qū)DNA甲基化水平是27.06%(9.55%,50.83%),對照組是44.81%(23.47%,77.74%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=9.455E-05,Z=-3.904)。病例組女性DHFR啟動子區(qū)DNA甲基化水平是31.35%(17.64%,50.70%),對照組是40.30%(8.98%,78.07%),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.375,Z=-0.887)。按年齡進(jìn)行亞組分析,青年組(≤44歲)中病例組DHFR啟動子區(qū)DNA甲基化水平是14.36%(0.44%,25.11%),對照組是59.11%(42.47%,104.92%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=9.068E-04,Z=-3.318)。中年組(45~59歲)中病例組DHFR啟動子區(qū)DNA甲基化水平是24.77%(5.90%,45.91%),對照組是44.99%(14.81%,76.63%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.007,Z=-2.700)。老年組(≥60歲)中病例組DHFR啟動子區(qū)DNA甲基化水平是42.87%(19.75%,55.19%),對照組是39.38%(23.12%,74.29%),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.268,Z=-1.107)。4、病例組MTHFD1啟動子區(qū)DNA甲基化水平是3.48%(2.47%,8.68%),對照組是4.66%(1.88%,7.00%),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.827,Z=-0.219)。5、病例組SHMT1啟動子區(qū)DNA甲基化水平是39.53%(29.05%,58.61%),對照組是41.46%(25.87%,56.17%),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.683,Z=-0.409)。結(jié)論1、AHCY和MTHFD1甲基化水平可能與腦梗死發(fā)病不相關(guān)。2、CBS和DHFR低甲基化與腦梗死的發(fā)病相關(guān),并且CBS低甲基化可能作為診斷腦梗死的潛在的生物標(biāo)志物。3、SHMT1甲基化水平與腦梗死發(fā)病不相關(guān)。
【學(xué)位單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R743.3
【部分圖文】：

用 Q50（Q25,Q75）表示；在 Log 轉(zhuǎn)化后 c 符合正態(tài)分布，用（ x ±s）示存在缺失樣本。加粗表示 P＜0.05。候選基因甲基化水平檢測結(jié)果1 AHCY 甲基化結(jié)果在本研究中，我們采用 qMSP 方法對腦梗死組和對照組中 Hcy 代謝相HCY、CBS、DHFR、MTHFD1、SHMT1 甲基化水平進(jìn)行定量分析，并數(shù)（四分位間距）表示甲基化水平。如圖 1.1 所示，測試片段位于 AH區(qū)（chr20：34303211-34303334）的 CpG 島（CGIs）。病例組 AHCY甲基化水平是 0.16%（0.07%，0.32%），對照組是 0.25%（0.02%，0.6 1.2 所示，我們的研究結(jié)果表明病例組中 AHCY 啟動子區(qū)甲基化水平與間無明顯差異且無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

圖 1.2：病例組和對照組 AHCY 甲基化水平的比較BS 甲基化水平結(jié)果 1.3 所示，測試片段位于 CBS 啟動子區(qū)（chr21：43076986-43 島（CGIs）。病例組 CBS 啟動子區(qū)甲基化水平是 70.20%（49.19%， 104.10%（74.65%，132.30%）。如圖 1.4 所示，我們的研究結(jié)CBS 啟動子區(qū)甲基化水平明顯低于健康對照組，并且差異有統(tǒng)計(jì).01）。

圖 1.2：病例組和對照組 AHCY 甲基化水平的比較CBS 甲基化水平結(jié)果圖 1.3 所示，測試片段位于 CBS 啟動子區(qū)（chr21：43076986-430G 島（CGIs）。病例組 CBS 啟動子區(qū)甲基化水平是 70.20%（49.19%，9是 104.10%（74.65%，132.30%）。如圖 1.4 所示，我們的研究結(jié) CBS 啟動子區(qū)甲基化水平明顯低于健康對照組，并且差異有統(tǒng)計(jì)0.01）。
【參考文獻(xiàn)】

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1 陳曉穎;葉華丹;洪青曉;周安楠;湯琳琳;段世偉;;DNA甲基化修飾對血管疾病穩(wěn)態(tài)失衡的影響[J];遺傳;2015年03期

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本文編號：2867966