目的探討在缺氧復(fù)氧情況下腺苷預(yù)處理誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白(GLT-1)和趨化因子(CX3CL1)的表達(dá)變化。方法原代培養(yǎng)的大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞分為正常組、模型組和腺苷預(yù)處理組。模型組:細(xì)胞接受5 h氧糖剝奪/復(fù)氧糖24 h處理;腺苷預(yù)處理組:細(xì)胞在氧糖剝奪前24 h加入100μmol/L腺苷后接受5 h氧糖剝奪/復(fù)氧糖24 h。在5 h氧糖剝奪/復(fù)氧糖24 h后觀察各組的細(xì)胞形態(tài)、MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞活力,ELISA檢測(cè)各組CX3CL1的相對(duì)表達(dá)情況,免疫熒光法及Western印跡法檢測(cè)各組GLT-1的相對(duì)表達(dá)情況。結(jié)果①正常組、模型組和腺苷預(yù)處理組在氧糖剝奪5 h復(fù)氧糖24 h后細(xì)胞活力(OD值)分別是(0.763±0.065),(0.217±0.052)和(0.404±0.013),腺苷可以減少缺氧復(fù)氧引起的損傷(P0.05)。②與正常組相比,星形膠質(zhì)細(xì)胞在缺氧復(fù)氧后,其釋放的趨化因子CX3CL1明顯升高(P0.05),GLT-1的表達(dá)明顯降低(P0.05)。與模型組相比,腺苷預(yù)處理組可明顯降低缺氧復(fù)氧組CX3CL1的釋放(P0.05),以及增加缺氧復(fù)氧GLT-1的表達(dá)水平(P0.05)。結(jié)論腺苷預(yù)處理可使氧糖剝奪/復(fù)氧糖后CX3CL1的釋放減少,GLT-1表達(dá)量升高,從而增強(qiáng)腦對(duì)缺血再灌注損傷的耐受。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)分組和OGD模型的建立[3]
    1.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
    1.4 細(xì)胞活性檢測(cè)
    1.5 ELISA檢測(cè)CX3CL1表達(dá)
    1.6 免疫熒光測(cè)GLT-1的表達(dá)[4]
    1.7 Western印跡測(cè)GLT-1表達(dá)量
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng)及鑒定結(jié)果
    2.2 各組星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)觀察及活力檢測(cè)結(jié)果
    2.3 MTT
    2.4糖氧剝奪復(fù)糖氧24 h后細(xì)胞培養(yǎng)液中CX3CL1濃度
    2.5 GLT-1免疫熒光結(jié)果
    2.6 Western印跡檢測(cè)氧糖剝奪/復(fù)糖后GLT-1的表達(dá)
3討論

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