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Pannexin-1參與三叉神經(jīng)痛的調(diào)控

發(fā)布時(shí)間:2020-10-26 04:14
   目的通過(guò)對(duì)大鼠行眶下神經(jīng)結(jié)扎術(shù)構(gòu)建三叉神經(jīng)痛動(dòng)物模型,注射縫隙連接蛋白1(Pannexin-1,Panx 1)特異性si RNA阻斷三叉神經(jīng)節(jié)中Panx 1的表達(dá),采用Von Frey hairs測(cè)痛法,Western blot和q RT-PCR檢測(cè)Panx 1在三叉神經(jīng)節(jié)中的表達(dá)及其在三叉神經(jīng)痛中的作用。方法對(duì)雄性SD大鼠行左側(cè)眶下神經(jīng)慢性縮窄術(shù)(ION-CCI)建立三叉神經(jīng)痛大鼠模型(ION-CCI組),并建立假手術(shù)組,即僅暴露眶下神經(jīng)但不行結(jié)扎術(shù)。用Von Frey hairs纖維絲對(duì)兩組大鼠左側(cè)觸須墊的機(jī)械刺激閾值進(jìn)行檢測(cè),驗(yàn)證三叉神經(jīng)痛大鼠模型是否建立成功。然后將ION-CCI大鼠隨機(jī)分為兩組,CCI+Panx1-si RNA組:對(duì)ION-CCI大鼠術(shù)側(cè)經(jīng)眶下孔達(dá)三叉神經(jīng)節(jié)區(qū)域局部注射Panx 1特異性si RNA;CCI+Ctl-si RNA組:對(duì)ION-CCI大鼠術(shù)側(cè)經(jīng)眶下孔達(dá)三叉神經(jīng)節(jié)區(qū)域局部注射陰性對(duì)照si RNA。采用q RT-PCR比較兩組大鼠術(shù)側(cè)三叉神經(jīng)節(jié)中Panx 1m RNA的表達(dá)量,采用Western blot比較兩組大鼠術(shù)側(cè)三叉神經(jīng)節(jié)中Panx 1蛋白質(zhì)的表達(dá)量。通過(guò)Von Frey hairs行為學(xué)檢測(cè)比較兩組大鼠機(jī)械刺激疼痛閾值。結(jié)果1.Von Frey hairs行為學(xué)檢測(cè)顯示ION-CCI大鼠術(shù)側(cè)觸須墊區(qū)域的機(jī)械刺激疼痛閾值明顯低于假手術(shù)組,表明三叉神經(jīng)痛大鼠模型構(gòu)建成功。2.q RT-PCR和Western blot的結(jié)果均表明CCI+Panx 1-si RNA組大鼠術(shù)側(cè)三叉神經(jīng)節(jié)中Panx 1表達(dá)量明顯低于CCI+Ctl-si RNA組。表明Panx特異性si RNA有效抑制了三叉神經(jīng)節(jié)中Panx 1的表達(dá)。3.Von Frey hairs行為學(xué)檢測(cè)顯示CCI+Panx 1-si RNA組大鼠機(jī)械刺激閾值顯著高于CCI+Ctl-si RNA組大鼠。結(jié)論通過(guò)眶下神經(jīng)慢性壓迫損失建立三叉神經(jīng)痛大鼠模型,抑制三叉神經(jīng)節(jié)中Panx 1表達(dá)可以緩解三叉神經(jīng)痛的痛敏反應(yīng)。
【學(xué)位單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類(lèi)】:R745.11
【部分圖文】:

機(jī)械刺激,大鼠,觸須,超敏反應(yīng)


值達(dá)到最低(sham組:1.38 g± 0.18 g,ION-CCI組:0.22 g ± 0.14 g,n =8,P < 0.001)。ION-CCI組大鼠術(shù)側(cè)機(jī)械刺激疼痛超敏反應(yīng)一直持續(xù)到術(shù)后第7周。Sham組大鼠從術(shù)后第1天至第7周內(nèi)的術(shù)側(cè)機(jī)械刺激疼痛閾值無(wú)明顯變化(P > 0.05)。見(jiàn)圖1。

大鼠,安徽醫(yī)科大學(xué),三叉神經(jīng)節(jié),碩士學(xué)位論文


安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文23圖2:CCI + Ctl-siRNA組和CCI + Panx 1-siRNA組大鼠三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)Panx 1 mRNA的相對(duì)表達(dá)(n = 4,與CCI + Ctl-siRNA組大鼠相比,**P < 0.01)Fig 2: Relative expression of Panx 1 mRNA in the trigeminal ganglion in CCI + Ctl-siRNA and CCI +Panx 1-siRNA rats(n = 4,**P < 0.01 vs the CCI + Ctl-siRNA group)3.3 大鼠三叉神經(jīng)節(jié)中Panx 1蛋白表達(dá)量持續(xù)注射 siRNA 后第 4 天將各組大鼠麻醉并處死,取出左側(cè)三叉神經(jīng)節(jié)通過(guò)Western blot 檢測(cè) Panx 1 的蛋白表達(dá)水平。Western blot 結(jié)果顯示,CCI + Panx1-siRNA 組大鼠三叉神經(jīng)節(jié)中 Panx 1 蛋白表達(dá)量低于 CCI + Ctl-siRNA 組(n = 4, P <0.05)。通過(guò) qRT-PCR 和 Western blot 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 Panx 1 特異性 siRNA 降低了ION-CCI 大鼠三叉神經(jīng)節(jié)中的 Panx 1 的表達(dá)。見(jiàn)圖 3。

大鼠,機(jī)械刺激,超敏反應(yīng),安徽醫(yī)科大學(xué)


安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文24圖3:CCI + Ctl-siRNA組和CCI + Panx 1-siRNA組大鼠三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)Panx 1蛋白的相對(duì)表達(dá)量(n =4,與CCI + Ctl-siRNA組大鼠相比,* P < 0.05)Fig 3: Relative expression of Panx 1 protein in the trigeminal ganglion in CCI + Ctl-siRNA and CCI +Panx 1-siRNA rats.(n = 4,*P < 0.05 vs the CCI + Ctl-siRNA group)3.4 三叉神經(jīng)節(jié)中Panx 1對(duì)大鼠機(jī)械疼痛超敏反應(yīng)的影響通過(guò) Von Frey hairs 纖維絲檢測(cè) ION-CCI 大鼠注射 siRNA 后的機(jī)械刺激疼痛閾值。結(jié)果顯示,與 CCI + Ctl-siRNA 組相比,CCI + Panx 1-siRNA 組大鼠的機(jī)械刺激疼痛閾值顯著增加,第四日差異最明顯,CCI + Ctl-siRNA 組為 0.25 g± 0.18 g,CCI + Panx1-siRNA 為 1.05 g ± 0.26 g(n =8
【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2856474

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