目的:β淀粉樣前體蛋白(βAPP)已經(jīng)確認(rèn)是老年癡呆起病的關(guān)鍵因素之一,雖有研究表明βAPP及其降解產(chǎn)物在顳葉癲癇患者的腦組織中也存在異常表達(dá),然而該蛋白在難治性癲癇的病理生理過程中的作用尚不明確。本研究檢測了βAPP在難治性癲癇手術(shù)患者的血清和切除的腦組織中的表達(dá)情況,對該蛋白的表達(dá)水平與患者臨床特征、病理表現(xiàn)和手術(shù)預(yù)后之間的關(guān)系,血清和腦組織中βAPP表達(dá)水平的關(guān)聯(lián)和手術(shù)對其表達(dá)的影響進(jìn)行了分析,對βAPP在難治性癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用及其臨床意義進(jìn)行了初步探討。方法:根據(jù)國際抗癲癇聯(lián)盟(ILAE)提出的藥物難治性癲癇的標(biāo)準(zhǔn)篩選出43例2015年1月至2018年10月于我院神經(jīng)外科進(jìn)行評(píng)估后,行癲癇病灶切除術(shù)的難治性癲癇患者作為實(shí)驗(yàn)組,以及無癲癇病史的20例血清對照組和5例腦組織對照組。通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)對血清標(biāo)本中的βAPP進(jìn)行定量檢測確定其在血清中的表達(dá)水平;通過免疫組織化學(xué)染色(IHC)對腦組織標(biāo)本中的βAPP進(jìn)行檢測確定其在腦組織中的表達(dá)部位和水平;并分析以上結(jié)果與患者性別、年齡、病程長短、發(fā)作頻率和類型、病變側(cè)別和部位、病理表現(xiàn)、手術(shù)預(yù)后之間的關(guān)聯(lián)。結(jié)果:血清學(xué)ELISA結(jié)果顯示難治性癲癇患者術(shù)前血清中的βAPP水平高于非癲癇患者(P0.05)。血清中的βAPP水平與患者的臨床和病理特征無顯著相關(guān)(P0.05)。手術(shù)前后,血清中βAPP的水平無明顯差異(P0.05)。腦組織IHC結(jié)果顯示,βAPP在難治性癲癇患者腦組織神經(jīng)元的胞質(zhì)和軸突處陽性表達(dá),且表達(dá)水平顯著高于非癲癇患者(P0.05)。統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)腦組織βAPP的表達(dá)水平與難治性癲癇患者的病理表現(xiàn)和手術(shù)預(yù)后有關(guān),而與其他臨床因素?zé)o關(guān)(P0.05)。其中海馬硬化的患者腦組織βAPP表達(dá)水平高于無海馬硬化的患者(P0.05),膠質(zhì)增生的患者腦組織βAPP表達(dá)水平低于無膠質(zhì)增生者(P0.05),手術(shù)預(yù)后不良者(即術(shù)后再發(fā)作者)腦組織βAPP水平高于手術(shù)預(yù)后良好者。分析ELISA和IHC結(jié)果的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)難治性癲癇患者的βAPP的異常高表達(dá)在血清和腦組織中具有一致性(P0.05),但二者具體水平高低無顯著相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:難治性癲癇患者的血清和腦組織中βAPP的表達(dá)水平均高于非癲癇患者,且患者血清和腦組織中βAPP的高表達(dá)具有一致性。腦組織中βAPP的表達(dá)水平與患者的病理表現(xiàn)有關(guān),對患者的手術(shù)預(yù)后有一定的預(yù)測價(jià)值。手術(shù)切除致癇灶腦組織對難治性癲癇患者血清βAPP水平無影響,推測βAPP除了在致癇灶組織中水平升高,在病灶以外的腦組織中也存在廣泛高表達(dá)。
【學(xué)位單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R742.1
【部分圖文】：

3.2.2 實(shí)驗(yàn)組術(shù)前、術(shù)后血清βAPP 表達(dá)水平的比較ELISA 定量檢測 21 例實(shí)驗(yàn)組手術(shù)前、后的血清βAPP 含量(部分患者術(shù)后尚未留取血清標(biāo)本)，檢測結(jié)果以: 全距(極大值，極小值)表示，比較二者之間的差異采用 Wilcoxon 符號(hào)秩檢驗(yàn)，結(jié)果如表 6。實(shí)驗(yàn)組同一患者手術(shù)前后，血清βAPP 含量之間無顯著差異(P=0.267>0.05)，Spearman 相關(guān)性分析顯示二者呈正相關(guān)(r=0.882，P=0.000<0.05)，如圖 1，即術(shù)前、術(shù)后患者血清βAPP 水平無顯著變化。表 6. 實(shí)驗(yàn)組術(shù)前、術(shù)后血清βAPP 含量 全距(極大值，極小值)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)組術(shù)前血清n=21實(shí)驗(yàn)組術(shù)后血清n=21Z 值 P 值βAPP(ng/ml) 19.898(19.898-0.000 ) 12.288(12.288-0.000) -1.111 0.267

圖 2. 實(shí)驗(yàn)組與對照組腦組織中的βAPP 表達(dá)水平(400×)A.實(shí)驗(yàn)組腦組織皮質(zhì)βAPP 免疫組化染色，箭頭所指為陽性染色神經(jīng)元；B.對照組腦組織皮質(zhì)βAPP 免疫組化染色；C.實(shí)驗(yàn)組海馬組織βAPP 免疫組化染色，箭頭所指為陽性染色神經(jīng)元；D.對照組海馬組織βAPP 免疫組化染色。

圖 3. 實(shí)驗(yàn)組腦組織中βAPP 的陽性表達(dá)定位以及神經(jīng)元的病理改變(400×)A.實(shí)驗(yàn)組腦組織皮質(zhì)，箭頭處可見βAPP 在神經(jīng)元胞質(zhì)中陽性表達(dá)；B.實(shí)驗(yàn)組腦組織皮質(zhì)，箭頭處可見βAPP 在神經(jīng)元軸突陽性表達(dá)；C.實(shí)驗(yàn)組腦組織皮質(zhì)，寬箭頭處可見神經(jīng)元變性改變：細(xì)胞輪廓模糊、呈三角狀或梨形、細(xì)胞核輪廓模糊、核固縮、細(xì)胞周圍間隙增寬。細(xì)箭頭所指的神經(jīng)元形態(tài)相對正常；D.實(shí)驗(yàn)組海馬組織，箭頭處可見βAPP 在錐體細(xì)胞胞質(zhì)中陽性表達(dá)，錐體細(xì)胞形態(tài)相對正常；E.實(shí)驗(yàn)組海馬組織，箭頭處可見錐體細(xì)胞空泡變性，部分神經(jīng)元消失，僅殘留細(xì)胞空隙；F.實(shí)驗(yàn)組海馬組織，箭頭處可見錐體細(xì)胞固縮，神經(jīng)元丟失明顯。
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本文編號(hào)：2844492