目的研究大鼠腦缺血再灌注早期腦組織中microRNA-124的動態(tài)變化與細(xì)胞凋亡的關(guān)系。方法8周齡SPF級雄性SD大鼠54只,隨機分為對照組、假手術(shù)組及再灌注3、6、12及24小時實驗組。Zea-Longa線栓法建立大鼠大腦中動脈閉塞模型。逆轉(zhuǎn)錄熒光實時定量PCR分析大鼠腦組織中microRNA-124表達的變化。蘇木精-伊紅染色觀察腦組織形態(tài)變化。免疫組化及Western blot分析腦組織中Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表達變化。Western blot分析STAT3及其活性形式p-STAT3的表達變化。結(jié)果1大鼠腦缺血再灌注早期,microRNA-124的表達水平明顯增加,于再灌注12小時后達到最高峰。2腦缺血再灌注早期大鼠腦組織中存在細(xì)胞凋亡,下游的凋亡執(zhí)行蛋白Caspase-3和上游的促凋亡蛋白Bax的表達持續(xù)增加,而上游抗凋亡蛋白Bcl-2的表達及Bcl-2/Bax的比例發(fā)生動態(tài)變化,在增加的同時,于再灌注后12小時達到高峰。3 STAT3的磷酸化形式p-STAT3在大鼠腦缺血再灌注早期腦組織中的表達上調(diào)并呈現(xiàn)動態(tài)變化,在再灌注12小時達到高峰;而STAT3的表達下調(diào),在再灌注12小時達到最低點。結(jié)論大鼠腦缺血再灌注早期,腦組織中microRNA-124的表達動態(tài)增加并與上調(diào)的抗凋亡蛋白Bcl-2及p-STAT3的表達水平正向相關(guān),表現(xiàn)出相同的變化趨勢。microRNA-124表達的動態(tài)變化作為對腦缺血再灌注損傷的應(yīng)激,可通過活化STAT3調(diào)節(jié)Bcl-2抑制凋亡。
【學(xué)位單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R743.3
【部分圖文】：

圖 1 模型組大鼠大腦組織 TTC 染色.2 TTC staining of rat brain tissue in model腦組織區(qū) microRNA-124 的動態(tài)表量 PCR 的檢測結(jié)果表明，同對照組4 的相對表達量并無明顯變化。而模達水平即明顯增加。隨再灌注時間達量不斷增加，于再灌注 12 小時的相對表達量大約為對照組的 6 倍在再灌注 24 小時組相對表達量較小時組。結(jié)果見圖 2、表 1。

圖 1 模型組大鼠大腦組織 TTC 染色Fig.2 TTC staining of rat brain tissue in model group再灌注大鼠腦組織區(qū) microRNA-124 的動態(tài)表達時熒光定量 PCR 的檢測結(jié)果表明，同對照組相比較，croRNA-124 的相對表達量并無明顯變化。而模型組中，-124 的表達水平即明顯增加。隨再灌注時間的延長，24 的相對表達量不斷增加，于再灌注 12 小時組表達量oRNA-124 的相對表達量大約為對照組的 6 倍。隨后，現(xiàn)下降，在再灌注 24 小時組相對表達量較再灌注 12 再灌注 6 小時組。結(jié)果見圖 2、表 1。

對照組 1.00±0.10假手術(shù)組 1.27±0.323 h 2.74±0.32a6 h 4.70±0.62a12 h 6.77±0.67a24 h 5.30±0.76a注：a：與對照組比，P<0.001。1.2.3 蘇木精-伊紅染色觀察腦組織形態(tài)學(xué)變化采用蘇木精-伊紅染色觀察大鼠腦組織的形態(tài)變化。同對照組比較，假手術(shù)組經(jīng)蘇木精-伊紅染色未見明顯神經(jīng)元病理性損傷。模型組可見神經(jīng)元細(xì)胞的胞體縮小，細(xì)胞核固縮，且染色質(zhì)顏色加深，其結(jié)構(gòu)不夠清析，核仁消失，病變部位與周圍組織界線清楚，中心區(qū)域神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量也明顯減少。具體結(jié)果見圖 3。
【參考文獻】

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本文編號：2835121