目的研究大鼠腦缺血再灌注早期腦組織中microRNA-124的動(dòng)態(tài)變化與細(xì)胞凋亡的關(guān)系。方法8周齡SPF級(jí)雄性SD大鼠54只,隨機(jī)分為對(duì)照組、假手術(shù)組及再灌注3、6、12及24小時(shí)實(shí)驗(yàn)組。Zea-Longa線栓法建立大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞模型。逆轉(zhuǎn)錄熒光實(shí)時(shí)定量PCR分析大鼠腦組織中microRNA-124表達(dá)的變化。蘇木精-伊紅染色觀察腦組織形態(tài)變化。免疫組化及Western blot分析腦組織中Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)變化。Western blot分析STAT3及其活性形式p-STAT3的表達(dá)變化。結(jié)果1大鼠腦缺血再灌注早期,microRNA-124的表達(dá)水平明顯增加,于再灌注12小時(shí)后達(dá)到最高峰。2腦缺血再灌注早期大鼠腦組織中存在細(xì)胞凋亡,下游的凋亡執(zhí)行蛋白Caspase-3和上游的促凋亡蛋白Bax的表達(dá)持續(xù)增加,而上游抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)及Bcl-2/Bax的比例發(fā)生動(dòng)態(tài)變化,在增加的同時(shí),于再灌注后12小時(shí)達(dá)到高峰。3 STAT3的磷酸化形式p-STAT3在大鼠腦缺血再灌注早期腦組織中的表達(dá)上調(diào)并呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化,在再灌注12小時(shí)達(dá)到高峰;而STAT3的表達(dá)下調(diào),在再灌注12小時(shí)達(dá)到最低點(diǎn)。結(jié)論大鼠腦缺血再灌注早期,腦組織中microRNA-124的表達(dá)動(dòng)態(tài)增加并與上調(diào)的抗凋亡蛋白Bcl-2及p-STAT3的表達(dá)水平正向相關(guān),表現(xiàn)出相同的變化趨勢(shì)。microRNA-124表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化作為對(duì)腦缺血再灌注損傷的應(yīng)激,可通過(guò)活化STAT3調(diào)節(jié)Bcl-2抑制凋亡。
【學(xué)位單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R743.3
【部分圖文】：

圖 1 模型組大鼠大腦組織 TTC 染色.2 TTC staining of rat brain tissue in model腦組織區(qū) microRNA-124 的動(dòng)態(tài)表量 PCR 的檢測(cè)結(jié)果表明，同對(duì)照組4 的相對(duì)表達(dá)量并無(wú)明顯變化。而模達(dá)水平即明顯增加。隨再灌注時(shí)間達(dá)量不斷增加，于再灌注 12 小時(shí)的相對(duì)表達(dá)量大約為對(duì)照組的 6 倍在再灌注 24 小時(shí)組相對(duì)表達(dá)量較小時(shí)組。結(jié)果見(jiàn)圖 2、表 1。

圖 1 模型組大鼠大腦組織 TTC 染色Fig.2 TTC staining of rat brain tissue in model group再灌注大鼠腦組織區(qū) microRNA-124 的動(dòng)態(tài)表達(dá)時(shí)熒光定量 PCR 的檢測(cè)結(jié)果表明，同對(duì)照組相比較，croRNA-124 的相對(duì)表達(dá)量并無(wú)明顯變化。而模型組中，-124 的表達(dá)水平即明顯增加。隨再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)，24 的相對(duì)表達(dá)量不斷增加，于再灌注 12 小時(shí)組表達(dá)量oRNA-124 的相對(duì)表達(dá)量大約為對(duì)照組的 6 倍。隨后，現(xiàn)下降，在再灌注 24 小時(shí)組相對(duì)表達(dá)量較再灌注 12 再灌注 6 小時(shí)組。結(jié)果見(jiàn)圖 2、表 1。

對(duì)照組 1.00±0.10假手術(shù)組 1.27±0.323 h 2.74±0.32a6 h 4.70±0.62a12 h 6.77±0.67a24 h 5.30±0.76a注：a：與對(duì)照組比，P<0.001。1.2.3 蘇木精-伊紅染色觀察腦組織形態(tài)學(xué)變化采用蘇木精-伊紅染色觀察大鼠腦組織的形態(tài)變化。同對(duì)照組比較，假手術(shù)組經(jīng)蘇木精-伊紅染色未見(jiàn)明顯神經(jīng)元病理性損傷。模型組可見(jiàn)神經(jīng)元細(xì)胞的胞體縮小，細(xì)胞核固縮，且染色質(zhì)顏色加深，其結(jié)構(gòu)不夠清析，核仁消失，病變部位與周圍組織界線清楚，中心區(qū)域神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量也明顯減少。具體結(jié)果見(jiàn)圖 3。
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2835121