【摘要】：目的:研究大腸桿菌胞外囊泡(E.coli-OMVs)對(duì)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SK-N-SH細(xì)胞增殖、凋亡和遷移的影響,為神經(jīng)母細(xì)胞瘤尋找新的治療藥物。方法:采用差速離心法提取大腸桿菌胞外囊泡,觀(guān)察囊泡形態(tài)并測(cè)定囊泡粒徑范圍。隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組、胞外囊泡低劑量組(100μg/mL E.coli-OMVs)、胞外囊泡中劑量組(500μg/mL E.coli-OMVs)和胞外囊泡高劑量組(1000μg/mL E.coli-OMVs)。MTT檢測(cè)各組細(xì)胞增殖能力;TUNEL和Western Blot分別檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡情況及凋亡相關(guān)蛋白cleaved-caspase3的表達(dá);Transwell檢測(cè)各組細(xì)胞遷移能力。結(jié)果:透射電鏡下E.coli-OMVs呈雙層膜、中空、圓形或橢圓形,其內(nèi)含低密度或高密度物質(zhì),具有明顯的異質(zhì)性,粒徑分析結(jié)果表明其直徑分布在30-450nm。與對(duì)照組相比,經(jīng)E.coli-OMVs干預(yù)后,SK-N-SH細(xì)胞增殖能力顯著降低;細(xì)胞凋亡增加,cleaved-caspase3蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào);而遷移能力顯著降低(P0.05)。結(jié)論:E.coli-OMVs對(duì)SK-N-SH細(xì)胞具有直接殺傷作用,有望成為神經(jīng)母細(xì)胞瘤的治療藥物。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R739.4
【圖文】：

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文凋亡[6, 20]，亦有研究表明，G-菌釋放的 OMVs 在小鼠結(jié)腸癌模型體內(nèi)可以顯制腫瘤的生長(zhǎng)[21]，但其是否直接對(duì)腫瘤組織進(jìn)行殺傷，目前尚未可知。因此，驗(yàn)擬研究 E.coli-OMVs 對(duì)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤 SK-N-SH 細(xì)胞增殖、凋亡以及遷移的影響，明確 G-菌 OMVs 是否對(duì) SK-N-SH 細(xì)胞具有殺傷作用，以期為難治經(jīng)母細(xì)胞瘤及其它腫瘤的治療提供新的思路及研究基礎(chǔ)。

coli-OMVs提取及鑒定Figure1ExtractionandidentificationofwildtypeE.coli-OMVs.A:Transmissionelectron

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文表 1 各組不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞的增殖活性Table 1 proliferation of human SK-N-SH cell at different time point0.05,**P＜0.01 vs control, # P＜0.05, ## P＜0.01 vs 100μg/mLE.coli-OMVsvs 500μg/mL E.coli-OMVsControl 100μg/mlE.coli-OMVs500μg/mlE.coli-OMVs1000μg/mlE.coli-OMVs 0.756±0.032 0.585±0.044*0.535±0.035**0.453±0.01 0.932±0.094 0.640±0.024**0.594±0.036**0.505±0.0 1.322±0.053 0.824±0.053**0.683±0.028**0.515±0.02

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2 白潔;高強(qiáng)度聚焦超聲消融對(duì)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤轉(zhuǎn)移影響的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

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本文編號(hào)：2778803