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髓系細胞觸發(fā)受體-1在實驗性蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷中的表達研究

發(fā)布時間:2020-07-27 19:22
【摘要】:目的:蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)是嚴重的腦血管疾病之一,具有高死亡率及致殘率,近年來認為早期腦損傷(EBI)是導(dǎo)致SAH患者預(yù)后不佳的主要原因,在EBI中炎癥反應(yīng)起關(guān)鍵的作用。而髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)被認為是炎癥發(fā)生和放大的關(guān)鍵介質(zhì),可能參與EBI過程中的炎癥反應(yīng),之前研究初步發(fā)現(xiàn)在SAH患者的腦脊液(CFS)中可溶性TREM-1(sTREM-1)濃度增加,但是TREM-1表達規(guī)律尚不清楚,因此,本研究將進一步檢測在實驗性SAH后EBI中TREM-1的表達,觀察TREM-1在SAH后EBI時間窗內(nèi)不同時相大鼠腦組織中的表達及研究TREM-1與炎癥因子和神經(jīng)功能學(xué)評分的相關(guān)性,探索TREM-1在EBI形成過程中的作用,為防治EBI提供新靶點。方法:采用頸內(nèi)血管穿刺法制備SAH模型,所有模型術(shù)后均評估出血嚴重程度及神經(jīng)功能學(xué)評分。首先將12只大鼠隨機分成假手術(shù)組及SAH組,造模后24h用免疫組織化學(xué)方法測定腦組織中TREM-1的表達。后將48只大鼠隨機分成假手術(shù)組及6h,12h,24h,48h和72h 5個不同時相組,造模后分別取腦脊液備用及腦組織通過蛋白質(zhì)印跡進一步分析TREM-1水平動態(tài)變化。然后在TREM-1表達水平峰值的時間點,通過酶聯(lián)免疫吸附試驗法測定該時間點大鼠CSF中TNF-α和IL-1β水平,最后分析TREM-1表達與TNF-α和IL-1β水平及神經(jīng)功能學(xué)評分之間的相關(guān)性。結(jié)果:1.采用免疫組織化學(xué)法分析顯示在大鼠SAH后24h時TREM-1陽性細胞數(shù)與假手術(shù)組比較表達明顯增加(2.67±0.82 vs 0.83±0.41),具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.采用蛋白印跡法分析結(jié)果顯示在大鼠SAH后EBI時間窗內(nèi)5個不同時相TREM-1的表達水平存在動態(tài)變化,在SAH后6h開始增加并且在48h達到峰值,但在12h至72h之間TREM-1蛋白表達顯著高于假手術(shù)組,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.相關(guān)性分析顯示TREM-1的產(chǎn)生與TNF-α(r=0.726,P=0.0410.05)和IL-1β(r=0.711,P=0.0480.05)表達呈正相關(guān),與神經(jīng)功能學(xué)評分呈負相關(guān)(r=-0.743,P=0.0350.05)。結(jié)論:在實驗性SAH后EBI腦組織中TREM-1表達呈動態(tài)變化,且于48小時達高峰,與炎癥嚴重性和神經(jīng)功能學(xué)評分相關(guān),表明TREM-1可能與SAH后EBI炎癥級聯(lián)反應(yīng)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R743.35
【圖文】:

大鼠,腦組織,覆蓋區(qū),網(wǎng)狀


鼠死亡率在 TREM-1 的免疫組織分析研究中共用 14 只大鼠,假手術(shù)組無大AH 組中 8 只大鼠中有 2 只在處死前死亡(25.0%)。在 TREM-1 的蛋白印跡的動態(tài)表達中,共用 64 只大鼠,假手術(shù)組,而 SAH 組中 56 只大鼠中有 16 只在處死之前死亡(28.5%),不數(shù)如下:在 SAH 后 6h 時 12 只大鼠中 4 只在處死前死亡(33.3%) 時使用 11 只大鼠,其中有 3 只在處死前死亡(27.3%),同樣在 SA只大鼠中有 3 只死亡(27.3%),SAH 后 48h 時 12 只大鼠中有 4 只死亡 時 10 只大鼠中有 2 只死亡(20%)。術(shù)后 5 個時相死亡率之間比(P = 0.969 > 0.05,χ2= 0.828)。

神經(jīng)功能,免疫組織化學(xué)法,顳葉,統(tǒng)計學(xué)意義


圖 2 SAH 后不同時間點出血嚴重程度評分及神經(jīng)功能學(xué)評分2.3 TREM-1 表達采用免疫組織化學(xué)法分析 TREM-1 的表達,選取在 SAH 后 24 小時時大鼠右側(cè)基底顳葉中進行研究,結(jié)果顯示在 SAH 后 24h 時 TREM-1 陽性細胞數(shù)與假手術(shù)組比較表達明顯增加(2.67±0.82 vs 0.83±0.41),且具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05,如圖 3)。

蛋白印跡法,碩士學(xué)位論文,顳葉,統(tǒng)計學(xué)意義


山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文圖 3 SAH 后 24 小時采用免疫組織化學(xué)分析 TREM-1 表達采用蛋白印跡法分析 TREM-1 的表達,選取在 SAH 建模后的 5 個不同時相鼠右側(cè)基底顳葉進行研究,結(jié)果顯示在 SAH 的 5 個不同時相 TREM-1 的表達水存在動態(tài)變化,具體為在 SAH 后 6h 開始增加并且在 48h 達到峰值(如圖 4),在12h至72h之間TREM-1蛋白表達顯著高于假手術(shù)組,且具有統(tǒng)計學(xué)意義(* P<0** P<0.01)。

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本文編號:2772268

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