【摘要】：第一部分VEGFA基因多態(tài)性與血脂異常及缺血性心腦血管疾病的關(guān)聯(lián)研究背景:近年來我國以動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)為病理基礎(chǔ)的缺血性心、腦血管病的發(fā)病率和死亡率都居高不下。血脂代謝異常是AS的獨立危險因素,積極控制、干預(yù)血脂水平對于AS疾病的防治有著重大意義。體內(nèi)脂質(zhì)代謝受遺傳、環(huán)境以及遺傳-環(huán)境因素相互作用的影響,而且這種遺傳變異通常具有種族/民族特異性和多效性。此前有體外實驗和動物模型研究證實了血管內(nèi)皮生長因子A(Vascular endothelial growth factor A,VEGFA)基因與血脂水平以及動脈粥樣硬化的發(fā)展過程關(guān)系密切,而大規(guī)模的全基因組關(guān)聯(lián)研究(Genome-wide association study,GWAS)研究也證明了在人體中VEGFA基因多態(tài)性位點與血脂水平、冠狀動脈粥樣硬化性心血管疾病(Coronary atherosclerosis heart disease,CHD)和缺血性腦卒中(Ischemic stroke,IS)的發(fā)病風(fēng)險有關(guān)聯(lián)。但是,這些關(guān)聯(lián)研究大多在歐美人群中進行且結(jié)果不甚一致,據(jù)我們所知在廣西地區(qū)尚未見有相關(guān)的報道。目的:本研究探討VEGFA rs3025039、rs10434和rs3025053單核苷酸多態(tài)性(Single nucleotide polymorphism,SNP)對廣西漢族和毛南族人群血脂水平的影響;以及VEGFA基因SNPs與CHD和IS發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系。方法:應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)-限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)方法對VEGFA rs3025039、rs10434和rs3025053 SNPs進行基因分型并應(yīng)用瓊脂糖凝膠電泳法成像檢測,對基因分型結(jié)果的驗證使用PCR產(chǎn)物直接測序方法。所有的實驗對象均進行血脂水平檢測,并對其進行關(guān)于心血管疾病危險因素的流行病學(xué)調(diào)查。研究按照不同的實驗對象分為兩個階段進行。第一階段:照國際流行病學(xué)調(diào)查方法,分層隨機抽取居住在廣西環(huán)江縣且祖宗三代均為毛南族的居民1210人和當(dāng)?shù)貪h族居民1240人作為研究對象。分析比較VEGFA SNPs各基因型及等位基因在兩個民族中的分布情況以及與血脂水平的關(guān)系。第二階段:在廣西漢族人群中進行病例-對照研究,其中包括正常對照組644例,經(jīng)冠狀動脈造影檢查后確診為冠心病患者586例和經(jīng)臨床確診為缺血性腦卒中患者549例。分析VEGFA SNPs在病例組和對照組中基因型和等位基因頻率分布差異以及各基因型與冠心病和缺血性腦卒中發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系。結(jié)果:1.廣西毛南族和漢族人群的血脂水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義,其中毛南族人群血清甘油三酯(TG)、載脂蛋白B(Apo B)水平高于當(dāng)?shù)氐臐h族人群,而高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和Apo A1水平低于漢族人群。2.VEGFA rs3025039、rs10434和rs3025053基因型以及等位基因頻率的分布在兩民族間存在差異(P0.05)。3.在漢族人群中,多個SNPs不同基因型的總膽固醇(TC,rs3025039和rs10434),HDL-C(rs10434)、LDL-C(rs3025039)水平和Apo A1/Apo B(rs3025039)比值比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05/3,經(jīng)Bonferroni校正)。在毛南族人群中,多個SNPs不同基因型的TC(rs10434)、HDL-C(rs3025039)、Apo A1(rs10434)、Apo B(rs3025053)水平以及Apo A1/B比值(rs3025039和rs10434)比較差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05/3,經(jīng)Bonferroni校正)。4.在性別亞組分析中可見,漢族女性rs3025039不同基因型的血清LDL-C水平和Apo A1/Apo B比值比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05/3,經(jīng)Bonferroni校正)。5.在rs10434和rs3025053 SNPs之間存在連鎖不平衡,單倍體分析顯示,G-C單體型最常見,兩個民族人群G-C和A-T單體型頻率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。在漢族人群中G-C單體型攜帶者HDL-C水平更高;A-T單體型攜帶者的TC水平更高(P0.05/2,經(jīng)Bonferroni校正)。在毛南族人群中G-C單體型攜帶者的Apo B水平更低而Apo A1/Apo B比值更高;A-T單體型攜帶者的TC和Apo B水平更高(P0.05/2,經(jīng)Bonferroni校正)。6.多因素回歸分析顯示,兩個民族的血脂參數(shù)與諸如年齡、性別、腰圍、血壓、血糖、抽煙及飲酒等環(huán)境因素密切相關(guān)(P0.05)。7.CHD組與對照組rs3025039和rs10434 SNPs的基因型和等位基因頻率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義;CHD組與對照組rs30250353 SNP的等位基因頻率比較差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。rs3025039 SNP的基因型分布和等位基因頻率在IS組與對照組比較有顯著差異;rs10434 SNP的等位基因頻率在IS組與對照組比較差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。8.建立遺傳模型并校正相關(guān)環(huán)境因素后發(fā)現(xiàn),rs3025039和rs10434SNPs在不同模型中表現(xiàn)出與CHD和IS發(fā)病風(fēng)險相關(guān)。rs3025039 SNP在共顯性模型中TT基因型患CHD風(fēng)險更高(OR=2.02,95%CI=1.07-3.84,P=9E-04);在顯性模型中CT/TT基因型患CHD(OR=1.64,95%CI=1.26-2.14,P=2E-04)和IS(OR=1.40,95%CI=1.08-1.80,P=0.009)的風(fēng)險更高;在超顯性模型中,CT基因型患CHD風(fēng)險更高(OR=1.53,95%CI=1.16-2.01,P=0.0023);在加性模型中攜帶至少一個T等位基因的個體患CHD(OR=1.51,95%CI=1.22-1.90,P=0.0019)和IS(OR=1.38,95%CI=1.11-1.70,P=0.0003)的風(fēng)險高于未攜帶者。rs10434 SNP在共顯性模型中AA基因型患CHD(OR=1.65,95%CI=1.14-2.05,P=0.0025)的風(fēng)險更高;在顯性模型中AA/AG基因型患CHD(OR=1.36,95%CI=1.06-1.74,P=0.015)和IS(OR=1.29,95%CI=1.09-1.77,P=0.007)風(fēng)險更高;加性模型顯示攜帶至少一個A等位基因的個體患CHD的風(fēng)險更高(OR=1.39,95%CI=1.13-1.72,P=0.0017)。9.對基因位點與環(huán)境交互作用的研究顯示,rs3025039CT/TT-年齡60歲交互作用患CHD和IS的風(fēng)險升高;rs3025039CT/TT-BMI≥24kg/m2患CHD風(fēng)險升高。rs10434AG/AA-高血壓交互作用患CHD的風(fēng)險升高;rs10434AG/AA-吸煙交互作用患IS的風(fēng)險升高。10.病例組和對照組的rs10434和rs3025039 SNPs均存在連鎖不平衡,與最常見的G-C單體型比較,攜帶A-T單體型的個體患CHD(OR=1.55,95%CI=1.14-1.98,P=0.015)和IS的風(fēng)險更高(OR=1.28,95%CI=1.03-1.58,P=0.025)。11.單體型與環(huán)境交互作用對CHD和IS的發(fā)病風(fēng)險也存在影響,其中攜帶A-T單體型的個體與年齡60歲以及BMI≥24kg/m2交互作用患CHD風(fēng)險升高;攜帶A-T單體型的個體與高血壓和BMI≥24 kg/m2交互作用導(dǎo)致患IS風(fēng)險升高。12.對VEGFA SNPs與環(huán)境交互作用對血脂水平的影響研究顯示,攜帶rs3025039T等位基因的個體血清LDL-C水平更高,而Apo A1/Apo B比值更低;攜帶rs10434A基因的個體血清TC水平更高(P0.05/3,經(jīng)Bonferroni校正)。rs3025039TT基因型的個體與BMI≥24 kg/m2交互作用可以使血清LDL-C水平升高,rs10434AA基因型的個體與吸煙交互作用可以使血清TC水平升高。結(jié)論:1.廣西毛南族與當(dāng)?shù)氐臐h族人群的血脂水平以及VEGFA SNPs的基因型和基因頻率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2.rs3025039、rs10434和rs3025053 SNPs與兩個民族人群的血脂水平有關(guān)聯(lián),這種關(guān)聯(lián)可能具有民族/種族/性別特異性。3.rs10434和rs3025053 SNPs存在連鎖不平衡,攜帶G-C單體型的個體血脂異常的發(fā)病風(fēng)險降低,而攜帶A-T單體型的個體發(fā)病風(fēng)險更高。4.在廣西漢族人群中進行的病例-對照研究顯示,rs3025039CT/TT基因型較CC基因型患CHD和IS的風(fēng)險更高,rs10434AA/AG基因型較GG基因型患CHD風(fēng)險更高。5.單體型分析顯示A-T單體型與CHD和IS發(fā)病風(fēng)險存在關(guān)聯(lián)。rs3025039和rs10434 SNPs以及它們的A-T單體型分別與年齡、BMI、高血壓、吸煙等環(huán)境因素存在交互作用并且對CHD和IS的發(fā)病風(fēng)險產(chǎn)生影響。6.在對照組中,rs3025039和rs10434 SNP與血脂水平存在關(guān)聯(lián),而且SNPs與BMI和吸煙有交互作用影響血脂水平。7.這些研究結(jié)果提示我們VEGFA rs3025039和rs10434 SNPs以及VEGFA rs10434A-rs3025053T單體型與環(huán)境因素的交互作用對血脂水平、CHD和IS的發(fā)病風(fēng)險存在影響。第二部分SLC22A3-LPAL2-LPA基因多態(tài)性與血脂異常及缺血性心腦血管疾病的關(guān)聯(lián)研究背景:大量的研究表明,冠心病(CHD)和缺血性腦卒中(IS)是基因和環(huán)境因素共同影響的復(fù)雜性疾病,其中遺傳因素在其發(fā)病過程中起著重要的作用。SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇位于人類6號染色體q26-27區(qū)域,在不同的GWAS研究中,SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇中SNPs被證實與歐美人群的血脂水平有關(guān)聯(lián),該基因簇也被證實與CHD的發(fā)病風(fēng)險密切相關(guān)。IS與CHD的共同病理生理基礎(chǔ)是動脈粥樣硬化,且血脂代謝紊亂與IS的發(fā)病關(guān)系密切,但是目前關(guān)于SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇SNPs與IS的關(guān)聯(lián)性研究較少,在廣西地區(qū)人群中未見SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇與血脂水平以及CHD和IS易感性的相關(guān)報道。目的:在SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇中,探討rs394352、rs10455782、rs3106164、rs3088442、rs3127599、rs7767084、rs7764781和rs783149 SNPs以及某些環(huán)境因素對廣西漢族和毛南族人群血脂水平的影響;以及SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇SNPs與CHD和IS發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系方法:應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)-限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)方法對SLC22A3 rs394352、SLC22A3 rs10455782、SLC22A3 rs3106164、SLC22A3 rs3088442、LPAL2 rs3127599、LPA rs7767084、LPA rs7765781和LPA rs783149 SNPs進行基因分型并應(yīng)用瓊脂糖凝膠電泳法成像檢測,對基因分型結(jié)果的驗證使用PCR產(chǎn)物直接測序方法。所有的實驗對象均進行血脂水平檢測,并對其進行關(guān)于心血管疾病危險因素的流行病學(xué)調(diào)查。研究按照不同的實驗對象分為兩個階段進。第一階段:照國際流行病學(xué)調(diào)查方法,分層隨機抽取居住在廣西環(huán)江縣且祖宗三代均為毛南族的居民1234人和當(dāng)?shù)貪h族居民1255人作為研究對象。分析比較SLC22A3-LPAL2-LPA基因SNPs的基因型及等位基因頻率在兩個民族人群中的分布差異以及與血脂水平的關(guān)系。第二階段:在廣西漢族人群中進行病例-對照研究,其中包括正常對照組635例,經(jīng)冠狀動脈造影檢查后確診為冠心病患者579例和經(jīng)臨床確診為缺血性腦卒中患者553例。分析SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇中SNPs在病例組和對照組中基因型和等位基因頻率分布差異以及各基因型與CHD和IS發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系。結(jié)果:1.廣西毛南族和漢族人群的血脂水平有差異,毛南族人群血清TG、Apo B水平高于當(dāng)?shù)氐臐h族人群,HDL-C水平低于漢族人群。2.SLC22A3 rs10455782、rs3106164和rs7767084 SNPs的基因型與等位基因頻率在漢族和毛南族人群間存在差異;其中rs394352、rs3088442和rs783149的等位基因頻率在兩民族人群間存在差異。3.在漢族人群幾個SNPs與TC(SLC22A3 rs10455782和LPA rs783149)、HDL-C(LPA rs7767084)、LDL-C(SLC22A3 rs3088442)、Apo B(SLC22A3 rs3106164,SLC22A3 rs10455782和LPA rs7767084)水平和Apo A1/B(SLC22A3 rs3106164)比值比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05/8,經(jīng)Bonferroni校正)。在廣西毛南族人群中SNPs與TC(SLC22A3rs10455782)、HDL-C(SLC22A3 rs3088442和LPA rs7767084)、LDL-C(SLC22A3 rs10455782,SLC22A3 rs3088442和LPA rs7767084)、Apo A1(SLC22A3 rs3106164,LPA rs7767084和LPA rs783149)、Apo B(rs3106164)水平和Apo A1/B比值(LPA rs783149)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05/8,經(jīng)Bonferroni校正)。4.在漢族和毛南族男性中,SLC22A3 rs3088442 SNP不同基因型之間血清LDL-C水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義;在漢族女性中,SLC22A3rs3106164 SNP不同基因型之間血清Apo B水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義;在毛南族女性中,SLC22A3 rs3088442 SNP不同基因型之間血清HDL-C水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05/8,經(jīng)Bonferroni校正)。5.在SLC22A3基因4個SNPs之間存在連鎖不平衡,最常見的單倍體是T-C-C-G,兩民族人群C-T-T-A、C-C-C-A以及C-C-T-A單倍體的頻率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。LPA rs7767984、rs7765781和rs783149 SNPs之間也存在較強連鎖不平衡,最常見的是T-G-A單體型,兩民族人群中T-G-A和C-C-C單體型頻率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6.在漢族人群幾個單體型與TC(C-T-T-A,T-G-A和C-C-C)、HDL-C(C-C-C)、LDL-C(C-C-C-A和C-C-T-A)、Apo B(C-C-C-A)水平和Apo A1/Apo B(C-C-C-A)比值有顯著關(guān)聯(lián)(P0.05/7,經(jīng)Bonferroni校正)。在廣西毛南族人群中幾個單體型與TC(C-T-T-A和C-C-C)、HDL-C(C-C-T-A和T-G-A)、LDL-C(C-T-T-A,C-C-C-A和T-G-A)和Apo A1(C-CT-A和C-C-C)水平有顯著關(guān)聯(lián)(P0.05/7,經(jīng)Bonferroni校正)。7.基因-基因交互作用顯示,在廣西漢族和毛南族中,最常見的單體型是T-C-C-G-T-G-A,兩民族人群中T-C-C-G-C-C-C、C-C-C-G-T-G-A、CT-T-A-C-C-C、C-C-C-A-T-G-A和C-C-C-A-C-C-C頻率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05-0.001)。8.多因素回歸分析示,血脂水平與年齡、民族、性別、腰圍、血壓、血糖、抽煙及飲酒等環(huán)境因素密切相關(guān)(P0.05)。9.在病例對照研究中發(fā)現(xiàn),CHD組和IS組的BMI、收縮壓、脈壓、血清TC和TG水平高于對照組,而血清HDL-C水平和Apo A1/Apo B比值和飲酒比例低于對照組(P0.05-0.01)。10.在CHD組中,rs10455782、rs3088442、rs7767084和rs783149SNPs的基因型和等位基因頻率與對照組比較有顯著差異;在IS組中,rs10455782、rs7767084和rs783149 SNPs的基因型和等位基因頻率與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。11.通過建立遺傳模型并校正相關(guān)危險因素后發(fā)現(xiàn),在顯性模型中SLC22A3 rs10455782 CT/TT基因型患CHD(OR=1.62,95%CI=1.18-2.23,P=0.0022)和IS(OR=1.75,95%CI=1.26-2.41,P=0.0007)的風(fēng)險升高;在超顯性模型中CT基因型患IS(OR=1.82,95%CI=1.29-2.55,P=0.0005)的風(fēng)險升高。SLC22A3 3088442 SNP在顯性模型中AG/AA基因型患CHD(OR=0.77,95%CI=0.62-0.96,P=0.0023)和IS(OR=0.73,95%CI=0.57-1.03,P=0.001)的風(fēng)險更低;在超顯性模型中提示rs3088442 SNP AG基因型患CHD風(fēng)險較低(OR=0.79,95%CI=0.63-0.99,P=0.0044)。LPA 7767084 SNP在顯性模型中CT/CC基因型患CHD的風(fēng)險更低(OR=0.83,95%CI=0.52-1.06,P=0.0041)。LPA rs783149 SNP在顯性模型中CA/AA基因型患CHD風(fēng)險更高(OR=2.27,95%CI=1.05-5.15,P=0.0035);加性模型中提示攜帶A等位基因者患CHD的風(fēng)險較高(OR=1.87,95%CI=1.14-3.87,P=0.0015)。12.基因位點與環(huán)境的分層分析顯示,rs10455782 SNP CT/TT基因型與吸煙和高血壓交互作用患CHD的風(fēng)險升高。rs3088442 SNP AG/AA基因型與飲酒交互作用使CHD患病風(fēng)險降低。rs783149 SNP AC/AA基因型與BMI≥24 kg/m2交互作用使CHD患病風(fēng)險更高。rs10455782 SNP CT/CC基因型和年齡60歲以及吸煙交互作用使IS患病風(fēng)險升高。rs3088442SNP AG/AA基因型與飲酒交互作用使IS患病風(fēng)險降低。13.對SLC22A3和LPA基因位點進行連鎖不平衡分析時發(fā)現(xiàn),攜帶CT-T-A單體型的個體患CHD和IS的風(fēng)險更高;攜帶C-C-C-G單體型的個體患CHD的風(fēng)險更低;攜帶T-G-C單體型者患CHD和IS的風(fēng)險更高,而CC-C單體型攜帶者患CHD的風(fēng)險更低。14.對SLC22A3-LPAL2-LPA基因位點與環(huán)境交互作用對血脂水平影響的研究發(fā)現(xiàn),在對照組中,rs10455782T等位基因攜帶者TC和Apo B水平更高;rs3106164T等位基因攜帶者Apo A1/Apo B比值更低;rs3088442A等位基因攜帶者血清LDL-C水平更低;rs7767084C等位基因攜帶者血清HDL-C水平更高;rs783149A等位基因攜帶者血清TC水平更高(P0.05/8,經(jīng)Bonferroni校正)。15.對基因位點與環(huán)境交互作用對血脂水平以及CHD和IS的發(fā)病風(fēng)險的關(guān)系進行分析發(fā)現(xiàn),rs10455782TT基因型與吸煙交互作用可以使血Apo B水平升高;rs3088442AA基因型與飲酒交互作用可以使血LDL-C水平降低;rs7767084CT基因型與男性交互可以使血HDL-C的水平更高,CC基因型與BMI24 kg/m2交互作用可以使血Apo B水平降低。其中,rs3088442AA基因型與飲酒的交互作用可降低CHD的發(fā)病風(fēng)險。結(jié)論:1.廣西毛南族與當(dāng)?shù)氐臐h族人群血脂水平以及SLC22A3-LPAL2-LPA基因型和等位基因頻率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2.在兩個民族人群中基因位點的多態(tài)性與血脂水平存在關(guān)聯(lián)性,這種關(guān)聯(lián)可能具有民族/種族/性別特異性。3.單體型分析顯示其單體型在兩個民族人群中與血脂水平亦存在相關(guān)性。4.在廣西漢族人群的病例-對照研究中,rs10455782、rs3088442、rs7767084和rs783149 SNPs和單體型與環(huán)境因素交互作用對CHD和IS發(fā)病風(fēng)險存在影響。5.SLC22A3-LPAL2-LPA基因位點rs10455782、rs3088442以及rs7767084 SNPs與環(huán)境的交互作用和血脂水平存在關(guān)聯(lián)性,其中rs3088442 SNP的AA基因型與飲酒交互可以降低血LDL-C的水平以及CHD的發(fā)病風(fēng)險。6.這些結(jié)果提示我們,SLC22A3-LPAL2-LPA基因簇的一些多態(tài)性位點以及單體型在廣西漢族和毛南族人群中與血脂水平相關(guān),基因位點或單體型與環(huán)境因素的交互作用對血脂水平存在影響,這種影響可能導(dǎo)致CHD和IS發(fā)病風(fēng)險的改變。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R743.3;R541.4
【圖文】：

幾種基因多態(tài)性與血脂異常及缺血性心腦血管病的關(guān)聯(lián)研究 博士學(xué)位論文對所選樣本基因組的 DNA 經(jīng)過 PCR 擴增后進行 2%瓊脂糖凝膠電泳及紫外光成像。結(jié)果如圖 1-1 示：VEGFA rs3025039 SNP 為 394-bp；VEGFAr10434 為 485-bp；VEGFA rs3025053 為 529- bp 的單核苷酸序列。

圖 1-2 VEGFA 基因位點分型結(jié)果。（A）VEGFA rs3025039：M 為 100- bp 參照標準，1 和 2，為 TT基因型（394- bp）；3 和 4 為 CC 基因型（261-和 133-bp）；5 和 6 為 CT 基因型（394-，261-和133-bp）。（B）VEGFA rs10434：M 為 100-bp 參照標 1 和 3 為 AA 基因型（485-bp）；2 和 4 為GG 基因型（ 418- 和 67-bp ）； 5 和 6 為 AG 基因型（ 485 ， 418- 和 67-bp ）。（ C ） VEGFArs3025053：M 為 100-bp 參照標準，1 和 3 為 CC 基因型（465-和 64-bp）；2 和 4 為 TT 基因型（529-bp）；5 和 6 為 CT 基因型（529-，465-和 64-bp）。Figure 1-2 Genotyping of the VEGFA SNPs. （A）VEGFA rs3025039：Lane M is the 100bp markerladder，lanes 1 6 are samples. lanes 1 and 2, TT genotype（394- bp）,3 and 4 CC genotype（261- and133-bp）, 5 and 6 CT genotype（394-，261- and 133-bp）（B）VEGFA rs10434：Lane M is the 100bpmarker ladder，lanes 1 6 are samples.1 and 3 AA genotype（485-bp）,2 and 4 GG genotype（418- and67-bp）, 5 and 6 AG genotype（485，418- and 67-bp）（C）VEGFA rs3025053：Lane M is the 100bpmarker ladder，lanes 1 6 are samples.1 and 3 CC genotype（465- and 64-bp）；2 and 4 TT genotype（529-bp）；5 and 6 CT genotype（529-，465- and 64-bp）5.3 PCR 產(chǎn)物測序結(jié)果對 VEGFA 基因位點 rs3025039、rs10434 和 rs3025053 SNPs 進行 PCR-RELF 檢測，將獲得的基因型直接測序，如下圖 1-3-A、1-3-B 和 1-3-C 所示, VEGFA 基因位點分型結(jié)果準確。

基因型（394- bp）；3 和 4 為 CC 基因型（261-和 133-bp）；5 和 6 為 CT 基因型（394-，261-和133-bp）。（B）VEGFA rs10434：M 為 100-bp 參照標 1 和 3 為 AA 基因型（485-bp）；2 和 4 為GG 基因型（ 418- 和 67-bp ）； 5 和 6 為 AG 基因型（ 485 ， 418- 和 67-bp ）。（ C ） VEGFArs3025053：M 為 100-bp 參照標準，1 和 3 為 CC 基因型（465-和 64-bp）；2 和 4 為 TT 基因型（529-bp）；5 和 6 為 CT 基因型（529-，465-和 64-bp）。Figure 1-2 Genotyping of the VEGFA SNPs. （A）VEGFA rs3025039：Lane M is the 100bp markerladder，lanes 1 6 are samples. lanes 1 and 2, TT genotype（394- bp）,3 and 4 CC genotype（261- and133-bp）, 5 and 6 CT genotype（394-，261- and 133-bp）（B）VEGFA rs10434：Lane M is the 100bpmarker ladder，lanes 1 6 are samples.1 and 3 AA genotype（485-bp）,2 and 4 GG genotype（418- and67-bp）, 5 and 6 AG genotype（485，418- and 67-bp）（C）VEGFA rs3025053：Lane M is the 100bpmarker ladder，lanes 1 6 are samples.1 and 3 CC genotype（465- and 64-bp）；2 and 4 TT genotype（529-bp）；5 and 6 CT genotype（529-，465- and 64-bp）5.3 PCR 產(chǎn)物測序結(jié)果對 VEGFA 基因位點 rs3025039、rs10434 和 rs3025053 SNPs 進行 PCR-RELF 檢測，將獲得的基因型直接測序，如下圖 1-3-A、1-3-B 和 1-3-C 所示, VEGFA 基因位點分型結(jié)果準確。

本文編號：2766207