【摘要】：研究背景癲癇(epilepsy,EP)是多種病因造成的慢性腦功能障礙,據(jù)中國抗癲癇協(xié)會統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,每年會有約40萬新發(fā)癲癇患者,而兒童癲癇的患病率為3.45%。雖然大部分癲癇患兒經(jīng)過規(guī)范抗癲癇治療后可以完全緩解甚至治愈,但20%—30%病人經(jīng)過正規(guī)藥物治療后仍反復發(fā)作成為難治性癲癇,對患兒的軀體、認知、精神心理和社會功能造成嚴重影響。因此研究癲癇的發(fā)病機制、發(fā)現(xiàn)癇性放電的證據(jù)、研制針對性藥物,成為目前控制癲癇發(fā)作所尋求的目標。隨著對神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌網(wǎng)絡的研究,認為癲癇的發(fā)生、發(fā)展與神經(jīng)免疫炎癥調(diào)節(jié)功能失常密切相關,實驗模型和臨床研究均表明腦中的炎癥過程與癲癇發(fā)病機制有密切關系,特別是細胞因子在癲癇發(fā)作神經(jīng)病理學中作用的研究一直在進行。但炎癥細胞因子的檢測在癲癇實際臨床應用中未引起足夠重視�；|(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)屬于蛋白水解酶家族,關于其促進血腦屏障破壞、激活其他細胞因子在腦腫瘤、腦水腫和腦自身免疫性疾病中研究較多,但關于MMP-9免疫反應陽性表達與癲癇免疫學發(fā)病機制關系及與其他炎癥細胞因子間作用的研究,國內(nèi)文獻報道的甚少。中樞神經(jīng)系統(tǒng)中腫瘤壞死因子(TNF-α)主要是由膠質(zhì)細胞產(chǎn)生,能刺激星形膠質(zhì)細胞釋放谷氨酸,其表達也在癲癇發(fā)作后上調(diào)。慢性癲癇患兒腦內(nèi)的膠質(zhì)細胞通常呈現(xiàn)出反復增生和激活狀態(tài),且腦脊液中TNF-α含量顯著增高,提示可能其是內(nèi)源性致癇物。IL-6是由單核巨噬細胞、腦內(nèi)膠質(zhì)細胞及神經(jīng)元產(chǎn)生的具有廣泛生物學效應的細胞因子,可能通過經(jīng)典信號轉(zhuǎn)導機制作用于致癇灶細胞、使神經(jīng)元興奮性物質(zhì)釋放增加,增加小鼠的驚厥易感性。因此,TNF-α和IL-6可能參與癲癇的發(fā)生、發(fā)展過程。腦電圖是通過安置在頭皮或顱內(nèi)的電極記錄大腦皮質(zhì)神經(jīng)元的自發(fā)性、節(jié)律性電活動,是癲癇診斷和鑒別中最重要的一項檢查。腦電圖異常反映腦部神經(jīng)乏氧、腦損傷狀態(tài),具有一定的敏感性,除了與腦內(nèi)其他結(jié)構(gòu)、室溫、藥物等因素有關,最近有學者提出患兒的免疫狀態(tài)對腦電圖異常有一定的影響,有待進一步研究。目的腦電圖是診斷癲癇的重要參考工具,但有一定的敏感性和特異性,MMP-9、TNF-α、IL-6是重要的免疫炎癥因子,在一定程度上提示患兒癲癇發(fā)作時的免疫狀態(tài)。本文通過檢測新診斷癲癇患兒血清炎癥因子水平,結(jié)合腦電圖結(jié)果探究在癲癇中的相關性及意義。方法搜集2016年6月至2017年3月于鄭州大學第一附屬醫(yī)院兒內(nèi)科住院的新診斷原發(fā)性癲癇患兒60例為實驗組,選取同期我院體檢患兒30例為對照組。癲癇發(fā)作24小時內(nèi)采集外周血,靜置、離心,血清放置EP管保存至-80℃冰箱,采用ELISA法測定血清中MMP-9、IL-6、TNF-α水平。癲癇發(fā)作后采集動態(tài)腦電圖。采用SPSS24.0統(tǒng)計學軟件對所得實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果1癲癇亞組和對照組血清中MMP-9、TNF-α、IL-6水平比較癲癇亞組血清中MMP-9、TNF-α、IL-6水平顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);癲癇持續(xù)狀態(tài)組和癲癇頻發(fā)組血清中MMP-9、TNF-α、IL-6水平高于非癲癇頻發(fā)非持續(xù)狀態(tài)組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);癲癇持續(xù)狀態(tài)組血清中TNF-α水平明顯高于癲癇頻發(fā)組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),而癲癇持續(xù)狀態(tài)組與癲癇頻發(fā)組血清中MMP-9、IL-6水平比較,差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。2腦電圖結(jié)果與血清中MMP-9、TNF-α、IL-6表達水平比較腦電圖正常組、非特異性異常波組、癲癇樣波組血清中炎癥因子水平逐漸升高;腦電圖非特異性異常波組和癲癇樣波組血清中MMP-9、TNF-α、IL-6水平明顯高于腦電圖正常組,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05);腦電圖癲癇波組血清中MMP-9、TNF-α、IL-6水平明顯高于非特異性異常波組,差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。3血清中TNF-α或IL-6與MMP-9水平相關性分析血清中TNF-α與MMP-9水平有顯著相關性,以TNF-α濃度為縱坐標,MMP-9濃度為橫坐標描繪散點圖可見,兩者呈正相關線性關系,進一步行Pearson相關分析,相關系數(shù)r~2=0.752,p0.05。血清中IL-6與MMP-9水平間有顯著相關性,以IL-6濃度為縱坐標,MMP-9濃度為橫坐標描繪散點圖可見,兩者呈正相關線性關系,進一步行Pearson相關分析,相關系數(shù)r~2=0.680,p0.05。結(jié)論1免疫炎癥可能參與癲癇的發(fā)生、發(fā)展過程,為癲癇治療提供新靶點。2腦電圖異常與細胞因子水平可能呈正相關,可將細胞因子作為癲癇腦電圖檢查的輔助指標。
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R742.1
【圖文】：

材料與方法.6 顯色并終止向每孔中加入底物溶液 100ul，37℃避光顯色 15 分鐘，此時酶表孔由無藍色。再向每孔加入終止液 50ul 混勻，顏色由藍色變?yōu)辄S色，顏色深濃度呈正相關。.7 測吸光度（OD 值）空白對照調(diào)零，于酶標儀 450nm 處測定各孔的吸光度（加入終止液 15測量）。.8 計算標準曲線（圖 1、2、3）

圖 2 IL6 標準曲線圖 3 TNF-α標準曲線統(tǒng)計學處理采用 SPSS24.0 統(tǒng)計學軟件對所得實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，計量資料±S)形式表示，多組均數(shù)總體水平比較采用單因素方差分析或Kruskal-W

10圖 3 TNF-α標準曲線統(tǒng)計學處理采用 SPSS24.0 統(tǒng)計學軟件對所得實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，計量資料±S)形式表示，多組均數(shù)總體水平比較采用單因素方差分析或Kruskal-W驗，多組均數(shù)兩兩比較采用 LSD-t 檢驗，相關性分析采用 Pearson 檢驗，0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

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本文編號：2759889