【摘要】：目的:了解外源性RBM3對急性腦損傷大鼠是否具有保護作用,及其保護作用與亞低溫對急性腦損傷的保護作用是否有相似效應方法:40只清潔級雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分成4組,每組10只,即正常對照組(NC組),腦損傷組(CI組),腦損傷+RBM3組(CR組),腦損傷+亞低溫組(CM組)。其中(CI組,CR組,CM組)均為缺氧方法構建的急性腦損傷模型,其中CM組通過亞低溫處理,使大鼠肛溫維持在32℃。觀察比較各組大鼠24小時后神經行為學表現。各組大鼠分別于實驗處理后24小時通過采血進行肝腎功能(CK、AST、Cr)、血氣分析水平的檢測。用HE染色法觀察各組大鼠腦、肺、肝、腎組織的病理損傷情況。所得數據均經統計學軟件分析。結果:1.通過缺氧方式成功構建大鼠急性腦損傷模型,大鼠在缺氧過程中出現青紫、躁動甚至昏迷、死亡等腦組織缺氧、神經功能障礙、機體嚴重損傷的表現。缺氧刺激24小時后,與正常對照組比較,腦損傷模型組大鼠出現行為學改變,在學習、記憶以及空間定向能力方面減退。2.采血進行血氣分析(PH、PO_2、PCO_2、SaO_2),(1)各組大鼠的PH值比較差異均無統計學意義。(2)腦損傷組PO_2、PCO_2、SaO_2結果與正常對照組差異均有統計學意義。經過RBM3或者亞低溫處理后:(3)PO_2和SaO_2結果均有所升高且與腦損傷組比較,以及兩組之間比較,P0.05,差異有意義。(4)PCO_2值結果RBM3組與腦損傷組比較,P0.05,差異無意義。亞低溫組結果明顯降低,與腦損傷組比較P0.05,差異有意義。3.采血進行生化指標(CK、AST、Cr)分析,腦損傷組CK、AST、Cr明顯高于正常對照組,且經過RBM3或者亞低溫處理后:(1)CK值與腦損傷組比較均有所降低,P0.05。兩組之間比較差異無意義,P0.05。(2)AST結果與腦損傷組比較同樣均降低,P0.05,且兩組之間比較P0.05,差異有意義。(3)Cr值結果與腦損傷組比較,RBM3組差異無意義P0.05,亞低溫組結果明顯降低P0.05。4.重要器官保護作用比較:HE染色結果顯示:經缺氧處理的腦損傷組的大鼠在腦、肝、肺、腎的病理圖片顯示均有明顯損傷,而經過RBM3或亞低溫處理后,腦、肝、肺病理損傷程度均明顯減輕。結論:1.外源性RBM3對急性腦損傷大鼠具有一定的保護作用。2.外源性RBM3對急性腦損傷大鼠的保護作用與亞低溫對急性腦損傷大鼠的保護作用具有相似效應。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R743
【圖文】：

圖 1 RBM3 溶液的序列稀釋Fig 1 Serial dilution of RBM3 solution注：選擇 8 個離心管，第一個對照組中加入 1.8 ml 維持液，在實驗組的一系列的離心管中同樣加入 1.8 ml 的維持液，在第一個實驗組離心管中加入 0.2 ml 的RBM3 溶液，充分吹打、混勻此時該管中的 RBM3 濃度為 10-1mg/ml，然后在第一個離心管中取混合后的 RBM3 溶液 0.2 ml 加入到第二只離心管中，再次進行吹打、混勻則該管 RBM3 的濃度為 10-2mg/ml，再次取混合后的 RBM3 溶液 0.2 ml加入第三只離心管中該管 RBM3 的濃度為 10-3mg/ml，依此類推，作系列稀釋，則得到的列續(xù)為 RBM3 進行 10 倍稀釋。3）棄去培養(yǎng)板上各孔細胞的培養(yǎng)液，用 PBS 輕輕洗滌三次后，每孔加入相應稀釋度 RBM3 溶液，每個稀釋度重復 3 個孔，置于 37℃、50%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)期間每隔 2 個小時搖動培養(yǎng)板數下，以保證所有細胞都能充分接觸。

10ug/ml 作用于神經小膠質細胞。不同濃度的 RBM3（0、0.01、0.1、1.0、10ug/ml 作用下的小膠質細胞 24h 后，細胞活性和細胞狀態(tài)如下。表 1 小膠質細胞活性及狀態(tài)Tab 1 Microglia cell activity and statusRBM3 濃度（ug/ml） 細胞活性 細胞狀態(tài)空白對照 0.847±0.063 靜息狀態(tài)0.01 0.847±0.078 靜息狀態(tài)0.1 0.862±0.064 部分活化1 0.861±0.069 部分活化10 0.883±0.075 大部分活化100 0.868±0.071 活化狀態(tài)1000 0.697±0.083 部分細胞死亡

圖 3 腦組織 HE 病理染色（×200）Fig 3 Hematoxylin and eosin(HE)staining of the brain tissues(×200)

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本文編號：2751793