【摘要】：目的:本研究擬使用藥理學及電生理手段研究尼古丁參與感覺刺激誘發(fā)小鼠小腦分子層場電位反應(yīng)的作用,探討尼古丁對小鼠小腦皮層分子層感覺信息傳遞過程中的影響機制,揭示nACh受體參與小腦皮層分子層感覺信息傳遞與整合機理。方法:選用出生后40天到60天內(nèi)的昆明小鼠,稱重并給與1.3g/kg劑量的烏拉坦注入小鼠腹腔實施麻醉。將小鼠放置在固定的處置儀上,經(jīng)過完善的預先處理后,實施小腦Crus Ⅱ區(qū)鉆孔術(shù),孔徑大約1-1.5mm,并去除表面顱骨。在顯微鏡下摘除硬腦膜,并用蠕動泵連續(xù)灌流含氧的人工腦脊液(ACSF)。尼古丁,六甲基氯化銨(Hexa),甲基牛扁堿(MLA),二氫-β-紅霉素氫溴酸鹽(DβEH)等藥物,通過腦表面灌流方式,施用于小腦表面。利用吹風裝置向同側(cè)胡須墊吹風(50-60 ms,50-60 psi),即三叉神經(jīng)感覺刺激,用計算機記錄電生理結(jié)果,經(jīng)數(shù)據(jù)軟件收集數(shù)據(jù)。通過其將感覺刺激誘發(fā)分子層場電位變化予以整合;應(yīng)用Clampfit 10.6軟件進行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果:(1)在麻醉狀態(tài)下,給予吹風刺激,可發(fā)現(xiàn)小腦區(qū)分子層出現(xiàn)場電位反應(yīng),現(xiàn)象為迅速的負極性波之后隨之出現(xiàn)的是較大的正極性波;在腦表面持續(xù)灌流Nicotine(1mM)后,小腦皮質(zhì)分子層P1即抑制性成分的曲線下面積(AUC)明顯減少,伴P1振幅大幅度下降。(2)尼古丁對感覺刺激誘發(fā)的分子層場電位的潛伏期沒有明顯影響,但P1的產(chǎn)生時間較給藥前提前,波形上升的時間延長、延遲時間明顯縮短。此外,尼古丁可導致N1波振幅及N1下曲面的面積顯著降低,但給予尼古丁前后N1負極性波的開始時間沒有差別,P1開始時間大幅提前。(3)在非選擇性nACh受體阻斷劑Hexa存在條件下,給予尼古丁沒有觀察到P1振幅的降低以及AUC的減少,也沒有觀察到N1振幅及AUC的改變,提示非選擇性nACh受體阻斷劑Hexa完全阻斷了尼古丁對分子層場電位的影響。(4)在選擇性α4β2亞型nACh受體阻斷劑DβEH存在下,給予尼古丁依然可以導致小腦皮質(zhì)分子層場電位反應(yīng)P1振幅較大幅度下降,并伴有AUC的顯著減少,表明選擇性α4β2亞型nACh受體阻滯劑DβEH并未阻斷尼古丁對于小腦皮質(zhì)分子層場電位反應(yīng)的影響。(5)在選擇性α7亞型nACh受體阻斷劑MLA存在下,在腦表面灌流尼古丁后,P1的振幅及AUC均沒有出現(xiàn)顯著變化,較給藥前無明顯差異,表明選擇性α7亞型nACh受體阻斷劑MLA完全阻斷了尼古丁對感覺刺激誘發(fā)小鼠小腦皮質(zhì)分子層場電位反應(yīng)的抑制作用。結(jié)論:(1)尼古丁抑制感覺刺激誘發(fā)的小鼠小腦皮層分子層場電位中的GABA能成分,并影響波形動力學,導致抑制時間提前,但振幅與波形下面積減少。(2)尼古丁對感覺刺激誘發(fā)小鼠小腦皮層分子層場電位反應(yīng)的抑制的作用是通過活化α7亞型nACh受體,而不是α4β2亞型nACh受體來實現(xiàn)的。(3)研究結(jié)果提示煙堿樣受體在小腦皮層信息傳遞中起重要的調(diào)控作用并可能參與小腦的運動學習功能。
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R741

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本文編號：2742069