【摘要】：本實(shí)驗(yàn)以S100A9蛋白和星形膠質(zhì)細(xì)胞為原材料,采用CCK-8法檢測(cè)不同濃度S100A9對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的增殖抑制效應(yīng)以及檢測(cè)FPS-ZM1、TAK-242對(duì)S100A9作用于星形膠質(zhì)細(xì)胞后的保護(hù)作用;應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡變化;采用ELISA法檢測(cè)S100A9作用于細(xì)胞后上清液中IL-1、IL-6和TNF-α的水平;使用Western blotting檢測(cè)細(xì)胞表達(dá)JNK、P38-MAPK、Bcl-2蛋白濃度水平的變化。研究發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,0.5mg/m LS100A9作用24h后,星形膠質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)顯著的增殖抑制效應(yīng),且凋亡率顯著增高(p0.01)。S100A9+TAK-242組、S100A9+FPS-ZM1+TAK-242組作用24 h后細(xì)胞增殖抑制顯著降低且凋亡率顯著降低(p0.01),S100A9+FPS-ZM1組作用后凋亡率與S100A9組無(wú)顯著差異(p0.05)。與對(duì)照組相比,S100A9單獨(dú)作用24h后星形膠質(zhì)細(xì)胞分泌IL-1、IL-6和TNF-α顯著增加(p0.01),S100A9+FPS-ZM1組、S100A9+TAK-242組、S100A9+FPS-ZM1+TAK-242組,上述因子無(wú)明顯變化。與對(duì)照組相比,S100A9組JNK、P38-MAPK蛋白濃度升高,而B(niǎo)cl-2蛋白濃度降低;S100A9+TAK-242組、S100A9+FPS-ZM1+TAK-242組JNK、P38-MAPK蛋白濃度均降低,Bcl-2蛋白濃度升高(p0.05);S100A9+FPS-ZM1組3種蛋白濃度變化與S100A9組無(wú)明顯差異。綜上表明,S100A9可能通過(guò)上調(diào)JNK、P38-MAPK及下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡從而抑制其增殖。TLR-4受體的特異性抑制劑TAK-242減輕了S100A9促凋亡作用,表明S100A9可能通過(guò)結(jié)合星形膠質(zhì)細(xì)胞膜上TLR-4受體促進(jìn)凋亡作用。S100A9通過(guò)結(jié)合細(xì)胞膜上TLR-4受體和RAGE受體刺激細(xì)胞炎性因子產(chǎn)生增多。
【圖文】：

<0.01)(圖4)。圖2GFAP免疫熒光鑒定星形膠質(zhì)細(xì)胞注:A,B,C:GFAP免疫熒光實(shí)驗(yàn)組;A:DAPI染核;B:GFAP抗體染胞質(zhì);C:AB的組合;D,E,F:PBS對(duì)照組;D:DAPI染核;E:PBS染胞質(zhì);F:D,E的組合(100滋m)Figure2IdentificationofastrocytesbyGFAPimmunofluorescenceNote:A,B,C:GFAPimmunofluorescenceassaygroup;A:DAPIstaining;B:GFAPantibodiesstainedcytoplasm;C:CombinatorialgraphsofAandB;D,E,F:PBScontrolgroup;D:DAPIstaining;E:PBSstainedcytoplasm;F:CombinatorialgraphsofDandE(100滋m)圖3S100A9對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞抑制率的測(cè)定注:0,0.1mg/mL,0.5mg/mLS100A9分別作用星形膠質(zhì)細(xì)胞12h,24h,48h;*:p<0.05,**:p<0.01Figure3DeterminationofastrocyteinhibitionratebyS100A9Note:0,0.1mg/mLand0.5mg/mLS100A9actedonastrocytesfor12hours,24hoursand48hoursrespectively;*:p<0.05,**:p<0.01圖4FPS-ZM1,TAK-242與S100A9共同作用對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞抑制率測(cè)定注:*:對(duì)照組與S100A9組相比,#:S100A9垣FPS-ZM1組,S100A9垣TAK-242組,S100A9垣FPS-ZM1垣TAK-242組與S100A9組對(duì)比;**:p<0.01,##:p<0.01Figure4DeterminationofastrocyteinhibitionbyFPS-ZM1,TAK-242andS100A9Note:*:OnbehalfofthecontrolgroupcomparedwiththeS100A9group,#:OnbehalfoftheS100A9垣FPS-ZM1group,S100A9垣TAK-242group,S100A9垣FPS-ZM1垣TAK-242group-comparedwiththeS100A9group;**:p<0.01,##:p<0.01圖1重組pET28a-S100A9測(cè)序峰Figure1RecombinantpET28a-S100A9sequencingpeakmap3654

staining;B:GFAPantibodiesstainedcytoplasm;C:CombinatorialgraphsofAandB;D,E,F:PBScontrolgroup;D:DAPIstaining;E:PBSstainedcytoplasm;F:CombinatorialgraphsofDandE(100滋m)圖3S100A9對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞抑制率的測(cè)定注:0,0.1mg/mL,0.5mg/mLS100A9分別作用星形膠質(zhì)細(xì)胞12h,24h,48h;*:p<0.05,**:p<0.01Figure3DeterminationofastrocyteinhibitionratebyS100A9Note:0,0.1mg/mLand0.5mg/mLS100A9actedonastrocytesfor12hours,24hoursand48hoursrespectively;*:p<0.05,**:p<0.01圖4FPS-ZM1,TAK-242與S100A9共同作用對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞抑制率測(cè)定注:*:對(duì)照組與S100A9組相比,#:S100A9垣FPS-ZM1組,S100A9垣TAK-242組,S100A9垣FPS-ZM1垣TAK-242組與S100A9組對(duì)比;**:p<0.01,##:p<0.01Figure4DeterminationofastrocyteinhibitionbyFPS-ZM1,TAK-242andS100A9Note:*:OnbehalfofthecontrolgroupcomparedwiththeS100A9group,#:OnbehalfoftheS100A9垣FPS-ZM1group,S100A9垣TAK-242group,S100A9垣FPS-ZM1垣TAK-242group-comparedwiththeS100A9group;**:p<0.01,##:p<0.01圖1重組pET28a-S100A9測(cè)序峰Figure1RecombinantpET28a-S100A9sequencingpeakmap3654

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 廖鍵梅;葉柳;黃琴;田銀;胡凱;李曉朋;唐勇;劉永剛;;S100A9促進(jìn)體外SD大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2018年08期

2 Alberini CM;Cruz E;Descalzi G;Bessières B;Gao V;唐穎馨;;星形膠質(zhì)細(xì)胞糖原和乳酸:學(xué)習(xí)和記憶機(jī)制探索新發(fā)現(xiàn)[J];神經(jīng)損傷與功能重建;2017年06期

3 趙海軍;李燕;盧巖;王媛;韓冰冰;王世軍;;星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)神經(jīng)元能量代謝的影響[J];卒中與神經(jīng)疾病;2015年06期

4 楊茜;周華軍;;反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞與軸突再生[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2015年03期

5 鄧江山;趙玉武;;星形膠質(zhì)細(xì)胞與腦水腫的形成[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2013年02期

6 劉芳;曹學(xué)照;何志義;;血管緊張素Ⅱ?qū)θ诵切文z質(zhì)細(xì)胞老化的影響[J];山西醫(yī)藥雜志;2013年02期

7 王建彪;竺可青;;星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)神經(jīng)元作用的研究進(jìn)展[J];浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年05期

8 李茂全;王艷艷;楊書(shū);陳朝瓊;楊曉虹;余爭(zhēng)平;;糖皮質(zhì)激素致星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)鈣濃度的快速升高[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年23期

9 劉慧,王小軍,胡榮,楊忠,蔡文琴;星形膠質(zhì)細(xì)胞[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2004年01期

10 殷育松,盧佳友,王如善,卞修武;人胎腦星形膠質(zhì)細(xì)胞原代分離培養(yǎng)及鑒定[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年17期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 周曉燕;鄔力祥;劉發(fā)益;曹莉;;大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)方法[A];湖南省生理科學(xué)會(huì)新世紀(jì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2002年

2 邱潔;高海青;;鋅在細(xì)胞凋亡中的作用研究進(jìn)展[A];山東省微量元素科學(xué)研究會(huì)第三屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2006年

3 武棟棟;劉國(guó)卿;;細(xì)胞凋亡的調(diào)控和干預(yù)[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)制藥工業(yè)專業(yè)委員會(huì)第十一屆學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2004年

4 袁華;段麗;饒志仁;;大鼠視上核星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)滲透壓的主動(dòng)調(diào)控作用[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

5 嚴(yán)美娟;牛淑瓊;孫茂民;劉夏春林;;胰甘油三酯脂酶在大鼠兩型星形膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)研究[A];節(jié)能環(huán)保 和諧發(fā)展——2007中國(guó)科協(xié)年會(huì)論文集（二）[C];2007年

6 趙康濤;陳丹;梁欣;;星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)自由基腦損傷的保護(hù)機(jī)制[A];第五屆全國(guó)自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2000年

7 劉媛;曾琳;龍?jiān)谠?李民;廖維宏;伍亞民;王正國(guó);;原漿型星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞分化行為的影響[A];第八屆全國(guó)脊柱脊髓損傷學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

8 趙衛(wèi)紅;陳麗君;壽好長(zhǎng);;鐵對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用研究[A];第五屆全國(guó)優(yōu)生科學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2000年

9 路楊;師忠芳;韓明;袁芳;;谷氨酸引起星形膠質(zhì)細(xì)胞體積增加及水通道蛋白4表達(dá)動(dòng)態(tài)變化[A];中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)第九屆全國(guó)代表大會(huì)及學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2010年

10 段麗;袁華;饒志仁;;大鼠三叉神經(jīng)脊束核星形膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元對(duì)痛刺激的生化可塑性反應(yīng)及其相互關(guān)系的研究[A];解剖學(xué)雜志——中國(guó)解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 ;“細(xì)胞凋亡療法”正逐步成為治療癌癥的新途徑[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2002年

2 ;3’取代吲哚類衍生物誘導(dǎo)HL－60細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

3 ;As_(2)S_(2)與STI571協(xié)同誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

4 記者張建松;治療癌癥新途徑：細(xì)胞凋亡療法[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

5 商?hào)|;“細(xì)胞凋亡”與臨床醫(yī)學(xué)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

6 李明輝;“細(xì)胞凋亡”治癌癥[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2002年

7 記者 白毅;IKK抑制細(xì)胞凋亡新機(jī)制被發(fā)現(xiàn)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2013年

8 錢錚;影響細(xì)胞凋亡進(jìn)程的機(jī)制被探明[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

9 張?zhí)锟?細(xì)胞凋亡的意義[N];文匯報(bào);2002年

10 張?zhí)锟?細(xì)胞凋亡的意義[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 周帥;載脂蛋白E及其基因多態(tài)性對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧性損傷的影響及相關(guān)機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

2 張雄;海馬齒狀回星形膠質(zhì)細(xì)胞的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)[D];浙江大學(xué);2005年

3 陳瑋;骨髓基質(zhì)細(xì)胞來(lái)源的新型凋亡誘導(dǎo)分子LAPF的功能研究：LAPF募集磷酸化p53（ser-15）至溶酶體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡通路[D];浙江大學(xué);2004年

4 陳金中;人類RBBP10和bima3的克隆和功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

5 郭鴻涌;工頻勻強(qiáng)磁場(chǎng)對(duì)正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞凋亡與增殖影響的研究[D];河北工業(yè)大學(xué);2004年

6 李愛(ài)玲;eIF-5A調(diào)控p53和p53依賴的細(xì)胞凋亡[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2004年

7 肖衛(wèi)民;熱休克蛋白對(duì)過(guò)氧化氫所致心肌細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2003年

8 王太宇;Hsp90在熱誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞凋亡中功能的初探[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

9 鄧洪斌;衰老小鼠T淋巴細(xì)胞凋亡抗性機(jī)理與枸杞多糖對(duì)其調(diào)控的研究以及T淋巴細(xì)胞死亡方式的探討[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

10 劉愛(ài)華;p53和p38對(duì)UV誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的抑制效應(yīng)及其機(jī)制研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 曹陽(yáng);三方突觸STDP可塑性動(dòng)力學(xué)模型研究[D];北京郵電大學(xué);2018年

2 劉國(guó)偉;葉酸在星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用及其機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2018年

3 張程斐;甲炎康泰對(duì)AIT模型大鼠Th1/Th2細(xì)胞平衡偏移及細(xì)胞凋亡影響的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2018年

4 郭志慧;星形膠質(zhì)細(xì)胞活化與表皮生長(zhǎng)因子受體表達(dá)的相關(guān)性研究[D];南華大學(xué);2011年

5 趙潔明;鎘誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡與Bcl-2抗凋亡機(jī)理研究[D];南京師范大學(xué);2006年

6 李丹;腎缺血再灌注損傷與細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2012年

7 朱猛;1、2型星形膠質(zhì)細(xì)胞的分離純化培養(yǎng)及其生物學(xué)特性研究[D];蘇州大學(xué);2001年

8 張建軍;細(xì)胞凋亡在腸炎沙門氏菌致腸道屏障功能損傷中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2001年

9 李妍妍;人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒（HERV）序列在人星形膠質(zhì)細(xì)胞系及運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病患者血清中的檢測(cè)與分析[D];吉林大學(xué);2010年

10 張建祥;氧糖剝奪誘導(dǎo)的膠質(zhì)疤痕離體模型的構(gòu)建[D];浙江大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2722556