【摘要】：目的:探索基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)基因過表達(dá)在腦卒中后NPCs突觸形成中的作用。方法:采用改良Longa’s線栓法,選用成年雄性SD大鼠制作大腦中動脈缺血再灌注模型(MCAO模型),選取符合標(biāo)準(zhǔn)的大鼠模型,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組;1天后,通過立體定向微量注射的方法分別向兩組大鼠患側(cè)腦室內(nèi)注射一定滴度的rAAV1-SDF-1和rAAV1-LacZ。于術(shù)后3、7、14、21、28天對兩組大鼠進(jìn)行動態(tài)的神經(jīng)行為學(xué)評分;6周后取實(shí)驗(yàn)組及對照組大鼠腦組織,采用weston blot及ELISA方法測SDF-1及其受體CXCR4蛋白表達(dá)量,并利用qPCR方法對SDF-1及CXCR4進(jìn)行mRNA水平的定量檢測;通過免疫熒光多重標(biāo)記技術(shù)檢測SDF-1基因在內(nèi)皮細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元及神經(jīng)前體細(xì)胞等不同類型細(xì)胞中的表達(dá)情況,通過雙標(biāo)SYP/DCX檢測實(shí)驗(yàn)組及對照組缺血半暗帶區(qū)域NPCs突觸形成情況,通過雙標(biāo)SYP/CD31觀察突觸形成與微循環(huán)之間的關(guān)系。結(jié)果:(1)大鼠MCAO模型后第1周內(nèi)實(shí)驗(yàn)組及對照組大鼠神經(jīng)功能損傷評分無明顯差異,1周后實(shí)驗(yàn)組評分開始低于對照組,且隨著時(shí)間進(jìn)展,實(shí)驗(yàn)組大鼠的mNSS與對照組差異更加明顯;(2)實(shí)驗(yàn)組大鼠腦內(nèi)SDF-1及CXCR4基因及蛋白表達(dá)量將對照組明顯增多(P0.05);(3)免疫熒光多重標(biāo)記發(fā)現(xiàn)與對照組相比實(shí)驗(yàn)組大鼠的紋狀體區(qū)域SDF-1在內(nèi)皮細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)前體細(xì)胞及神經(jīng)元中的表達(dá)均明顯增多;(4)在實(shí)驗(yàn)組大鼠患側(cè)的紋狀體、腦室下區(qū)及缺血半暗帶區(qū)域突觸數(shù)量較對照組明顯增多(P0.05);(5)與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組大鼠的缺血半暗帶區(qū)域血管形態(tài)完整、連續(xù)性好,突觸密集,且主要集中于血管周圍。結(jié)論:(1)SDF-1基因治療可以促進(jìn)腦卒中后大鼠神經(jīng)功能的恢復(fù)。(2)SDF-1可以促進(jìn)腦卒中后NPCs突觸形成。(3)腦卒中后NPCs突觸形成與微循環(huán)關(guān)系密切
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R743.3
【圖文】：

神經(jīng)功能損傷評分標(biāo)準(zhǔn)

TTC染色經(jīng)典層面

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本文編號：2717357