【摘要】：目的:腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)惡性腫瘤。雖然經(jīng)過(guò)積極的手術(shù)和放療、化療治療,患者的中位生存時(shí)間僅為12到15個(gè)月,其五年生存率仍小于5%。本研究旨在研究RNA結(jié)合蛋白FXR1和長(zhǎng)鏈非編碼RNA MIR17HG能否調(diào)控膠質(zhì)瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為,進(jìn)一步深入分析其潛在的分子機(jī)制,即FXR1通過(guò)增加MIR17HG的穩(wěn)定性下調(diào)miR-346/miR-425-5p促進(jìn)TAL1的表達(dá),促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。研究方法:首先培養(yǎng)人正常星型膠質(zhì)細(xì)胞、人膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87、U251和人胚腎細(xì)胞HEK293T。應(yīng)用Real-time PCR方法檢測(cè)MIR17HG、miR-346、miR-425-5p和TAL1,應(yīng)用Western blot方法檢測(cè)FXR1、TAL1和DEC1在正常腦組織、膠質(zhì)瘤組織、人正常星型膠質(zhì)細(xì)胞、膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達(dá)水平。應(yīng)用CCK-8、Transwell、流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)細(xì)胞的增殖、遷移侵襲、凋亡能力的改變,通過(guò)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法構(gòu)建FXR1、MIR17HG、DEC1沉默的細(xì)胞系,構(gòu)建TAL1、miR-346、miR-425-5p過(guò)表達(dá)和表達(dá)沉默的細(xì)胞系,研究其在膠質(zhì)瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為中的作用。Real-time PCR方法檢測(cè)MIR17HG、TAL1的mRNA和miR-346、miR-425-5p的表達(dá)變化。Western Blot方法檢測(cè)FXR1、TAL1、DEC1蛋白的表達(dá)變化。RIP和RNA pull down實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證FXR1和MIR17HG靶向結(jié)合作用。雙熒光素酶基因報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)MIR17HG和miR-346/miR-425-5p、miR-346/miR-425-5p和TAL1的靶向結(jié)合作用。ChIP實(shí)驗(yàn)分析TAL1分別與DEC1、MIR17HG啟動(dòng)子區(qū)的直接作用。裸鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FXR1和MIR17HG對(duì)裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)和荷瘤裸鼠生存時(shí)間的影響。結(jié)果:本研究發(fā)現(xiàn)FXR1在膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞中高表達(dá),沉默F(xiàn)XR1能夠抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲并且促進(jìn)細(xì)胞凋亡。MIR17HG在膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞中高表達(dá),沉默MIR17HG能夠抑制U87和U251細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。FXR1通過(guò)增加MIR17HG的穩(wěn)定性,上調(diào)其表達(dá)發(fā)揮促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的作用。沉默F(xiàn)XR1聯(lián)合沉默MIR17HG抑制裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)并延長(zhǎng)荷瘤裸鼠的生存期。MiR-346和miR-425-5p在膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞中低表達(dá),過(guò)表達(dá)miR-346和miR-425-5p能顯著抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖,遷移和侵襲能力,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。MIR17HG與miR-346、miR-425-5p存在靶向結(jié)合作用。沉默MIR17HG或過(guò)表達(dá)miR-346、miR-425-5p降低TAL1的表達(dá)。TAL1在膠質(zhì)瘤組織及細(xì)胞中高表達(dá),沉默TAL1能夠顯著抑制U87和U251細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。miR-346、miR-425-5p分別與TAL1 mRNA的3,UTR區(qū)結(jié)合。沉默MIR17HG通過(guò)負(fù)性調(diào)控miR-346、miR-425-5p,降低TAL1的表達(dá),抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。TAL1與DEC1的啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合,增加其啟動(dòng)子活性。DEC1在膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞中高表達(dá),沉默DEC1顯著抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、遷移、侵襲能力并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。過(guò)表達(dá)miR-346/miR425-5p通過(guò)負(fù)性調(diào)控TAL1降低DEC1的表達(dá),調(diào)控質(zhì)瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。TAL1能夠與MIR17HG的啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合,過(guò)表達(dá)TAL1能顯著上調(diào)MIR17HG的表達(dá),調(diào)控膠質(zhì)瘤細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為。結(jié)論:1.FXR1和MIR17HG在膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞中高表達(dá),MiR-346和miR-425-5p低表達(dá)。沉默F(xiàn)XR1、MIR17HG的表達(dá)以及過(guò)表達(dá)miR-346、miR-425-5p能夠抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲力,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。2.FXR1能夠增加MIR17HG的穩(wěn)定性。MIR17HG分別特異性結(jié)合miR-346、miR-425-5p。沉默F(xiàn)XR1的表達(dá),通過(guò)降低MIR17HG的穩(wěn)定性,減弱其與miR-346、miR-425-5p的結(jié)合作用,抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲力,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。3.TAL1是miR-346、miR-425-5p的靶基因。TAL1與DEC1的啟動(dòng)子直接結(jié)合,并增強(qiáng)其活性。過(guò)表達(dá)miR-346、miR-425-5p通過(guò)增強(qiáng)miR-346、miR-425-5p對(duì)TAL1的負(fù)性調(diào)控作用,降低TAL1的表達(dá),抑制DEC1的轉(zhuǎn)錄,抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲力,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。4.TAL1與MIR17HG的啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合,增強(qiáng)其活性。5.FXR1-MIR17HG-miR-346/miR-425-5p-TAL1反饋環(huán)路在調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)行為中發(fā)揮重要作用。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R739.41
【圖文】：

10圖 1 FXR1 表達(dá)水平及對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響（a）在非腫瘤性腦組織（NBTs）、低級(jí)別膠質(zhì)瘤組織（WHOI-II）和高級(jí)別膠質(zhì)瘤組織（WHOIII-IV）中的 FXR1 蛋白的表達(dá)水平。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示（n=3）。與 NBTs 組比較，*P<0.05，**P<0.01；與低級(jí)別膠質(zhì)瘤組織組比較，##P<0.01。（b）在正常人星形膠質(zhì)細(xì)胞（NHA）、U87和 U251 細(xì)胞中的 FXR1 蛋白的表達(dá)水平。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示（n=3）。與 NHA 組比較，

12圖 2 MIR17HG 的表達(dá)水平及對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響（a）在NBT和不同級(jí)別膠質(zhì)瘤組織中MIR17HG的表達(dá)水平。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示（n=7）。與 NBTs 組比較，*P<0.05， **P<0.01；與 I 級(jí)膠質(zhì)瘤組比較，#P<0.05，##P<0.01；與 II 級(jí)膠質(zhì)瘤組比較，△△P<0.01；與 III 級(jí)膠質(zhì)瘤組比較，ΨΨP<0.01。（b）NHA 和膠質(zhì)瘤細(xì)胞系（U87 和U251）中 MIR17HG 的表達(dá)水平。數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示（n=3）；與 NHA 組比較，

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 胡建宏;王茂林;潘亞文;;高遷移率族蛋白B1在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制研究[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2019年02期

2 楊海霞;李曉鳴;;外泌體與膠質(zhì)瘤關(guān)系的研究進(jìn)展[J];臨床與病理雜志;2017年11期

3 秦麗娟;賈永森;趙喜慶;張?zhí)?張偉;孫娜;;鴉膽子油乳注射液對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲性的影響及其可能機(jī)制[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2016年03期

4 齊玲;徐俊杰;紀(jì)朋艷;呂士杰;韓磊;王瑋瑤;;西蘭花多肽抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的機(jī)制研究[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;2014年12期

5 萬(wàn)政強(qiáng);陳晨;伏林山;孫關(guān);;吡格列酮對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制研究[J];東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年01期

6 李嗍,王楓,繆珊,駱文靜;過(guò)量鋅對(duì)鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞體外生長(zhǎng)的影響[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

7 楊偉廉,王堯,韋永新,阮長(zhǎng)耿,杜子威;抗膠質(zhì)瘤細(xì)胞單克隆抗體SZ-38及其識(shí)別抗原的生化特征[J];生物化學(xué)雜志;1988年06期

8 斯可哉;;在體外和體內(nèi)用利血平調(diào)節(jié)C_6膠質(zhì)瘤細(xì)胞亞系對(duì)ACNU的抗藥性[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊(cè));1988年02期

9 楊偉廉;抗膠質(zhì)瘤細(xì)胞單克隆抗體SZ—38及其識(shí)別抗原的生化特征[J];蘇州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1989年01期

10 李方園;高翼之;王世浚;;四種人癌基因在腦瘤中的擴(kuò)增和重排(摘要)[J];鐵道醫(yī)學(xué);1989年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 楊鵬宇;李強(qiáng);張建生;;雷帕霉素聯(lián)合尼莫司汀抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的研究[A];2011中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

2 俞文華;車志豪;張祖勇;許培源;陸鏞民;傅林;朱強(qiáng);陳鋒;杜權(quán);;骨橋蛋白在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達(dá)及其信號(hào)傳導(dǎo)途徑[A];2005年浙江省神經(jīng)外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

3 潘冬生;;多基因修飾膠質(zhì)瘤細(xì)胞疫苗的抗腫瘤免疫反應(yīng)[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第六屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2011年

4 張玉寶;孫金龍;孟祥靖;魏麟;劉廣存;崔友強(qiáng);;膠質(zhì)瘤細(xì)胞中VEGF、MMP-2、MMP-9的表達(dá)及臨床觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

5 趙世光;;膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期動(dòng)力學(xué)研究[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)成立大會(huì)資料匯編[C];2004年

6 張瑞;胡佩珊;臧清策;岳小飛;周幟;徐曉宇;韓為;張瑞萍;再帕爾·阿不力孜;;基于液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的膠質(zhì)瘤細(xì)胞代謝組學(xué)分析[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)生物醫(yī)藥色譜及相關(guān)技術(shù)學(xué)術(shù)交流會(huì)（大會(huì)特邀報(bào)告及墻報(bào)）論文摘要集[C];2016年

7 宋楊英;劉英姿;單保恩;;IL-18基因轉(zhuǎn)染對(duì)大鼠9L膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)特性的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)醫(yī)院協(xié)會(huì)臨床檢驗(yàn)管理專業(yè)委員會(huì)第六屆全國(guó)臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

8 楊孔賓;趙世光;劉炳學(xué);陳曉豐;戴欽舜;;K~+通道阻斷劑四乙胺對(duì)大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和凋亡影響[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第四屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2009年

9 李格;黃益玲;;MiR-19a靶向LRIG1對(duì)腦膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的影響[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨2018年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議摘要集[C];2018年

10 李子超;姜東伯;楊舒雅;王靜;孫元杰;趙國(guó)慶;楊琨;;B細(xì)胞受體相關(guān)蛋白31對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞行為的影響[A];第十一屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)摘要匯編[C];2016年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 特約記者 李岳冰;中國(guó)膠質(zhì)瘤放療專家共識(shí)發(fā)布[N];健康報(bào);2018年

2 張獻(xiàn)懷　張文;瘤區(qū)埋雷 持續(xù)殺傷[N];健康報(bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 孫偉力;LncRNA OIP5-AS1通過(guò)調(diào)節(jié)miR-410表達(dá)靶向調(diào)控Wnt-7b在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的作用及機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2019年

2 朱丹化;MicroRNA-497通過(guò)靶向調(diào)控mTOR及Bcl-2增強(qiáng)膠質(zhì)瘤對(duì)替莫唑胺的耐藥性[D];蘇州大學(xué);2018年

3 葉敏華;RNF213基因在膠質(zhì)瘤發(fā)病中的作用及機(jī)制研究[D];南昌大學(xué);2019年

4 余楊;ATP1A1對(duì)人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞增殖和凋亡的影響及機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2019年

5 郭清;膠質(zhì)瘤內(nèi)的Galectin-9/TIM-3/IL-6信號(hào)促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)并調(diào)節(jié)腫瘤免疫微環(huán)境[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2019年

6 梁超;UCA1通過(guò)抑制miR-204-5p上調(diào)ZEB1的表達(dá)促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移、侵襲和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2019年

7 曹碩;FXR1通過(guò)增加MIR17HG的穩(wěn)定性調(diào)控膠質(zhì)瘤細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的機(jī)制研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2019年

8 李振航;miR-196a/GATA6介導(dǎo)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞增殖及間質(zhì)表型轉(zhuǎn)化機(jī)制研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2019年

9 高夢(mèng)琦;ISG20促進(jìn)膠質(zhì)瘤局部微環(huán)境免疫應(yīng)答導(dǎo)致不良預(yù)后[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2019年

10 何振巍;FUS/circ_002136/miR-138-5p/SOX13反饋環(huán)調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤血管新生的機(jī)制[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2019年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 周洲;敲減長(zhǎng)鏈非編碼RNA CRNDE促進(jìn)miR-136表達(dá)并抑制膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞的遷移與侵襲[D];江蘇大學(xué);2019年

2 張德龍;LncRNA ASB16-AS1對(duì)膠質(zhì)瘤生物學(xué)行為的影響[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2019年

3 劉俊;lncRNA BLACAT1及miR204-5p在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及預(yù)后的相關(guān)研究[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2019年

4 周黃貴;長(zhǎng)鏈非編碼RNA BLACAT1對(duì)膠質(zhì)瘤增殖、侵襲、遷移的影響[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2019年

5 鄢騰峰;MiR-512-5p靶向JAG1抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯[D];南昌大學(xué);2019年

6 李南;microRNA-148a-3p通過(guò)靶向調(diào)控ST18促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移和侵襲[D];湖南師范大學(xué);2019年

7 羅文君;miR-135a-5p異常減少在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2018年

8 舒秋婷;內(nèi)源性小分子ITE影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移及增殖的機(jī)制研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2019年

9 張宏全;特異性殺傷膠質(zhì)瘤干細(xì)胞化合物SN38的發(fā)現(xiàn)及評(píng)價(jià)[D];南華大學(xué);2019年

10 蔡雨晴;東亞鉗蝎氯毒素抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的機(jī)制研究[D];山西大學(xué);2019年

本文編號(hào)：2715049