本文關鍵詞：硫化氫通過上調瘦素信號通路拮抗甲醛誘導的HT22細胞衰老，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【研究背景與目的】大量研究證實甲醛(Formaldehyde,FA)對中樞神經系統(tǒng)具有毒性作用。硫化氫(Hydrogen sulfide,H2S),作為一種神經保護劑,我們發(fā)現其可以抑制FA誘導的神經細胞凋亡、細胞毒性及內質網應激,表明H2S具有抗FA神經毒性的作用,但其具體機制有待進一步研究。神經細胞衰老在神經退行性疾病的病理生理機制中具有重要地位,我們推測細胞衰老在FA神經毒性中具有重要價值。瘦素(leptin)具有中樞神經系統(tǒng)保護作用,我們既往發(fā)現H2S可以通過上調leptin信號通路拮抗檳榔堿引起的PC12細胞凋亡、內質網應激從而發(fā)揮神經保護作用。因此,在本研究中,我們擬探討細胞衰老是否參與了FA導致的神經毒性?H2S可否拮抗FA誘導的HT22細胞衰老?以及l(fā)eptin信號通路可否介導H2S的這一作用?【方法】細胞計數試劑盒(Cell counting Kit-8,CCK8)法檢測細胞活力;β-半乳糖苷酶染色(Senescence Associated acidic-β-Galactosidas,SA-β-Gal)法檢測衰老細胞;臺盼藍計數法檢測細胞生長情況并繪制細胞生長曲線;蛋白免疫印跡(Western Blot)法檢測leptin、lepRb以及細胞衰老相關蛋白p16INK4a和p21CIPl的表達;ELISA法檢測HT22細胞培養(yǎng)上清液中l(wèi)eptin的含量。【結果】1.FA(100,200μM)處理HT22細胞48 h可顯著降低HT22細胞的細胞活力,在HT22細胞上驗證了FA的神經細胞毒性。2.FA(50,100,200μM,48 h)能明顯增加HT22細胞SA-β-Gal染色陽性率、上調細胞衰老相關蛋白(p16INK4a和p21CIPL)的表達、抑制HT22細胞生長,表明FA可誘導HT22細胞衰老。3.預處理NaHS(H2S的供體,400μM,30 min)可明顯抑制FA誘導的HT22細胞活力下降,在HT22細胞上驗證了H2S的抗FA神經細胞毒性作用。4.NaHS(400μM,30 min)預處理能明顯逆轉FA(100μM,48 h)誘導的HT22細胞SA-β-Gal染色陽性率增加、p16INK4a及p21CIP1蛋白表達增加、細胞生長抑制,表明H2S可拮抗FA誘導的HT22細胞衰老。5.FA(50,100,200μM,48 h)可濃度依賴性地下調HT22細胞中l(wèi)eptin及l(fā)epRb蛋白表達、降低細胞培養(yǎng)上清液中l(wèi)eptin的含量,提示FA的神經毒性與其抑制leptin信號通路有關。6.NaHS(100,200,400μM,48 h)可濃度依賴性的增加HT22細胞leptin、lepRb表達及培養(yǎng)上清液中l(wèi)eptin的含量,且預處理NaHS(400μM,30 min)可明顯逆轉FA對leptin信號通路的下調,提示H2S抗神經細胞衰老可能與其上調leptin信號通路有關。7.預處理leptin tA(leptin信號通路抑制劑,50 nM)能取消NaHS對FA誘導HT22細胞活力下降以及細胞衰老的拮抗作用,表明leptin信號通路介導了H2S抗FA誘導的HT22細胞衰老�！窘Y論】1.FA可以誘導HT22細胞衰老;2.H2S可拮抗FA誘導的HT22細胞衰老;3.leptin信號通路介導H2S抗FA誘導的HT22細胞衰老。
【關鍵詞】：硫化氫 甲醛 細胞衰老 leptin信號通路
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R741
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-12
• 第一章 緒論12-16
• 第二章 材料與方法16-22
• 1. 主要儀器和試劑16-18
• 2. 藥品與試劑的配制18-19
• 3. 實驗方法19-22
• 第三章 結果22-34
• 1. 甲醛 (Formaldehyde, FA) 可降低HT22細胞活力22
• 2. FA可誘導HT22細胞衰老22-24
• 3. H_2S可抑制FA降低的HT22細胞活力下降24
• 4. H_2S拮抗FA誘導的HT22細胞衰老24-26
• 5. H_2S上調HT22細胞leptin信號通路26-29
• 6. 阻斷l(xiāng)eptin信號通路可逆轉H_2S對FA誘導HT22細胞衰老的拮抗作用29-34
• 第四章 討論34-38
• 第五章 實驗結論38-40
• 參考文獻40-44
• 文獻綜述 瘦素與阿爾茲海默病44-52
• 參考文獻47-52
• 碩士期間發(fā)表的論文52-54
• 致謝54

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2 ;《干細胞衰老與疾病》已出版[J];解剖科學進展;2009年04期

3 ;細胞衰老的主導基因研究獲重要成果[J];北京大學學報(醫(yī)學版);2002年04期

4 牟坤,周庚寅;細胞衰老與腫瘤發(fā)生及藥物治療[J];生命的化學;2005年04期

5 馬杰;章靜波;;干細胞衰老[J];醫(yī)學研究雜志;2007年06期

6 胡兵;安紅梅;沈克平;;細胞衰老與腫瘤發(fā)生[J];生命科學;2008年03期

7 潘岳;;人為什么會變老[J];農家參謀;2008年08期

8 ;《干細胞衰老與疾病》[J];細胞生物學雜志;2009年05期

9 ;細胞防癌機制新發(fā)現[J];臨床合理用藥雜志;2010年06期

10 ;科學家發(fā)現抗老新法[J];品牌與標準化;2011年23期

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1 季宇彬;劉日嘉;高世勇;;細胞衰老及衰老相關信號途徑研究進展[A];腫瘤病因學研究與中西醫(yī)結合腫瘤綜合診療交流研討會論文集[C];2009年

2 曹流;王麗京;陳譽華;;細胞穩(wěn)態(tài)維系機制與疾病的發(fā)生發(fā)展[A];細胞—生命的基礎——中國細胞生物學學會2013年全國學術大會·武漢論文摘要集[C];2013年

3 朱小飛;李電東;何琪楊;;小檗堿抗過氧化氫引起的細胞衰老的機制[A];2009全國抗衰老與老年癡呆學術會議論文匯編[C];2009年

4 沈陳軍;劉曉平;;細胞衰老機制與腫瘤抑制[A];安徽省藥理學會2012年學術年會論文匯編[C];2012年

5 王倩;王嶸;苗登順;;Bmi1通過抑制氧化應激誘導骨細胞衰老而發(fā)揮延緩骨骼衰老的重要作用[A];中國解剖學會2013年年會論文文摘匯編[C];2013年

6 丁國憲;;MicroRNA and Aging[A];第三屆江浙滬三地老年醫(yī)學高峰論壇暨2012年浙江省老年醫(yī)學學術年會論文集[C];2012年

7 金軍華;張鐵梅;韓彩和;張恩毅;張延;張宗玉;童坦君;;低糖培養(yǎng)對人二倍體成纖維細胞衰老相關基因表達的影響[A];第八屆全國中西醫(yī)結合實驗醫(yī)學研討會論文匯編[C];2006年

8 王元元;陳子興;岑建農;沈宏杰;何軍;梁建英;劉丹丹;姚利;;骨髓增生異常綜合征與骨髓細胞衰老增加的相關研究[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

9 龐建新;程希遠;金宏;高楊;吳曙光;;Sp1對PHA激活的T細胞端酶活性粒酶活性的調節(jié)作用[A];第七屆中國抗炎免疫藥理學術會議論文摘要集[C];2000年

10 張濤;海春旭;;氧化應激在細胞衰老中的作用[A];中國活性氧生物學效應學術會議論文集（第一冊）[C];2011年

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1 周勇;北大醫(yī)學部深入開展細胞衰老研究[N];中國醫(yī)藥報;2006年

2 ;探尋人類細胞衰老之謎[N];中國醫(yī)藥報;2002年

3 李京華;初步揭開人類細胞衰老之謎[N];中藥報;2002年

4 記者 李京華;我國科學家解細胞衰老之謎[N];新華每日電訊;2002年

5 趙冬紅;細胞衰老秘密[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

6 記者 劉霞;美科學家揭示細胞衰老機制[N];科技日報;2009年

7 新字;北大初步闡明人類細胞衰老原因[N];中國醫(yī)藥報;2002年

8 魏衍亮;細胞和生物壽命調控專利技術掃描[N];中國知識產權報;2006年

9 付東紅;我國科學家追蹤P16基因獲重要成果[N];光明日報;2002年

10 阿勝;“陰陽失衡”癌細胞自殺[N];醫(yī)藥經濟報;2003年

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1 雷岳山;P53與細胞衰老、自噬和凋亡[D];武漢大學;2013年

2 韋釗;CUL4B通過抑制p53-ROS正反饋環(huán)減緩壓力誘導的細胞衰老[D];山東大學;2015年

3 周云;丙型肝炎病毒感染者miR-181a對CD4+T細胞衰老的調節(jié)作用及信號傳導[D];第四軍醫(yī)大學;2015年

4 白潔;zeste基因增強子同源物2對胃癌細胞衰老的影響及調控機制[D];華中科技大學;2015年

5 何玲;SWI/SNF復合物亞基調控細胞衰老及其相關機理研究[D];重慶大學;2015年

6 苗穗兵;SM22α參與血管平滑肌細胞衰老和血管老化的機制[D];河北醫(yī)科大學;2016年

7 高延妍;精氨酸甲基轉移酶PRMT1在乳腺癌細胞上皮—間質轉換和細胞衰老過程中的作用及機制研究[D];東北師范大學;2016年

8 葛海燕;糖皮質激素通過鈍化細胞衰老分泌表型誘導肺癌化療耐藥的作用研究[D];復旦大學;2013年

9 沈璐;卵巢衰老中細胞衰老現象初探[D];華中科技大學;2014年

10 伊桐凝;Aspirin抗高糖誘導的內皮細胞衰老的作用及其機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2009年

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1 沙明泉;組蛋白甲基轉移酶EZH2在力達霉素等藥物誘導人結腸癌細胞衰老中的作用及機制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2015年

2 張清和;復制性細胞衰老的觸發(fā)動力學機制研究[D];南京大學;2014年

3 寧敏;硫化氫通過上調瘦素信號通路拮抗甲醛誘導的HT22細胞衰老[D];南華大學;2016年

4 李耕;緩激肽對氧化應激誘導的心肌細胞衰老的影響及其機制[D];華中科技大學;2011年

5 張娜娜;血管緊張素Ⅱ誘導神經細胞衰老的作用及藥物干預[D];山東大學;2013年

6 韓騰龍;用慢病毒載體介導癌基因建立細胞衰老的模型[D];第四軍醫(yī)大學;2010年

7 劉靜;P16基因高表達對細胞衰老的調控作用[D];鄭州大學;2013年

8 張如;非對稱性二甲基精氨酸在老年大鼠心肌細胞衰老中的作用及其機制[D];中南大學;2010年

9 張毅;吲哚美辛對白血病細胞增殖和細胞衰老的影響[D];山西醫(yī)科大學;2015年

10 王存;骨髓源性心肌干細胞的年齡性變化以及IGF-1對干細胞衰老的調節(jié)作用[D];復旦大學;2009年

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