【摘要】：目的:觀察周細(xì)胞在癲癇持續(xù)狀態(tài)后血腦屏障開(kāi)放中的異常變化,探討周細(xì)胞對(duì)癲癇持續(xù)狀態(tài)后急性期血腦屏障開(kāi)放和慢性期血腦屏障修復(fù)中的作用,為癲癇持續(xù)狀態(tài)的臨床治療和科學(xué)研究提供新的思路和方法。研究方法:制備氯化鋰-匹魯卡品致癇大鼠模型,采用伊文思藍(lán)法和干濕重法評(píng)估癲癇持續(xù)狀態(tài)后2h、24h、3d、7d、14d和21d海馬組織中血腦屏障破壞程度;電鏡觀察發(fā)作后不同時(shí)期周細(xì)胞及血腦屏障的超微結(jié)構(gòu)改變,Western Blot法檢測(cè)發(fā)作后不同時(shí)期海馬組織中周細(xì)胞標(biāo)記蛋白pdgfrβ的表達(dá)量,免疫組織化學(xué)以及免疫熒光法半定量分析Pdgfrβ在海馬中的分布和表達(dá)情況,觀察周細(xì)胞在癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作急慢性期的破壞和恢復(fù)中的作用。結(jié)果:(1)癲癇持續(xù)狀態(tài)后血腦屏障破壞,滲透性增強(qiáng),其中發(fā)作后24h破壞最嚴(yán)重,發(fā)作3d及以后逐漸恢復(fù)正常;(2)透射電鏡結(jié)果表明SE發(fā)作后腦微血管周細(xì)胞及其連接基膜超微結(jié)構(gòu)均發(fā)生改變;(3)Western blot和免疫熒光的結(jié)果提示SE發(fā)作后24hPdgfrβ的表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組(P0.05),3d及以后逐漸趨于平穩(wěn);(4)免疫熒光檢測(cè)結(jié)果提示Pdgfrβ沿著微血管壁分布,SE發(fā)作后24hPdgfrβ表達(dá)和分布水平明顯高于對(duì)照組(P0.05),3d及以后逐漸趨于平穩(wěn)。結(jié)論:癲癇持續(xù)狀態(tài)后24h血腦屏障破壞最嚴(yán)重,3d及以后又逐漸恢復(fù)正常,周細(xì)胞在其急性期的破壞機(jī)制和亞急性期恢復(fù)機(jī)制中起到了重要的作用,可為臨床治療SE早期腦破壞提供重要作用。
【圖文】：

匹魯卡品前 30 分鐘腹腔注射東莨菪堿(應(yīng)。重程度采用修正 Racine 六級(jí)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn);、面肌痙攣如眨眼、動(dòng)須及節(jié)律性咀嚼攣表現(xiàn)為點(diǎn)頭和 /或甩尾;攣;攣伴站立;失去平衡，跌倒。搐狀態(tài)并且抽搐至少 30 分鐘定義為癲癇癇持續(xù)狀態(tài)的動(dòng)物模型。抽搐發(fā)作持續(xù)若無(wú)發(fā)作或發(fā)作未達(dá)到Ⅳ級(jí)，則每隔 30再觀察 30min，最多可追加 3 次，若追加造模失敗。正常對(duì)照組等量生理鹽水腹

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文醛經(jīng)腹腔麻醉，待麻醉后將大鼠固定在腦鼠顱骨頂部局部消毒后剪開(kāi) 3-4cm 皮膚，膜鈍性分離，仔細(xì)清除多余的皮下組織和固定到前囟位置，記錄此時(shí)定位儀上各軸 0.5 mm 的小手鉆，分別在大鼠前囟門(mén)兩個(gè)記錄電極孔，插入自制銀針 3-5cm，銹鋼電極夾夾住銀針，參考電極夾住大鼠前，先進(jìn)性 10 分鐘腦電圖記錄，腹腔注間腦電圖 30 分鐘。腦電監(jiān)測(cè)后的大鼠經(jīng)，所有操作均在冰上快速完成，，分離大鼠待統(tǒng)一進(jìn)行 Western Blot 檢測(cè)。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R742.1

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本文編號(hào)：2698747