【摘要】：研究背景:眼肌型重癥肌無力(ocular myasthenia gravis,oMG)是MG較為常見的一種亞型,相比全身型重癥肌無力(generalized MG,gMG),其病變部位局限于眼外肌,以上瞼下垂和復(fù)視等為典型臨床癥狀,故常首診于眼科。oMG的病因未明,尚無法根治,多數(shù)未經(jīng)治療或治療后控制不佳的oMG患者會(huì)進(jìn)展為gMG。目前研究認(rèn)為MG的致病機(jī)制是致病性抗體介導(dǎo)、細(xì)胞免疫依賴的,同時(shí)需要補(bǔ)體和細(xì)胞因子的參與。T、B細(xì)胞各功能性亞群的活化是機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的基礎(chǔ),然而T、B細(xì)胞亞群的活化水平和作用方式在oMG觸發(fā)及其向gMG進(jìn)展的過程中仍不明確。目的:觀察oMG患者、gMG患者T、B細(xì)胞亞群的比例及相關(guān)細(xì)胞因子水平,初步探討T、B細(xì)胞亞群在oMG致病過程中可能的作用機(jī)制。方法:收集16例oMG患者和31例gMG患者,以及20例健康對(duì)照者的外周血標(biāo)本,分離得到外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)和血清。用流式細(xì)胞儀檢測(cè)其PBMCs中CD3~+CD4~+T細(xì)胞、CD3~+CD8~+T細(xì)胞、CD4~+CD25~+CD127~-調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells,Tregs)、CD19~+CD27~+CD38~-記憶B細(xì)胞、CD19~+CD24~(hi)CD27~+調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(regulatory B cells,Bregs)、CD19~+CD38~+CD138~+漿細(xì)胞和CD19~+CD40~+B細(xì)胞的比例;用酶聯(lián)免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法檢測(cè)其血清中細(xì)胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17和IFN-γ的水平。分析和比較各組間不同T、B細(xì)胞亞群以及相關(guān)細(xì)胞因子水平的差異。結(jié)果:oMG患者組外周血中CD3~+CD4~+T細(xì)胞比例相比gMG患者組和健康對(duì)照組均無顯著差異(P=0.082;P=0.878)。但是,gMG患者組CD3~+CD4~+T細(xì)胞較健康對(duì)照組顯著升高(P=0.013)。oMG患者組、gMG患者組和健康對(duì)照組三組間外周血中CD3~+CD8~+T細(xì)胞比例無顯著差異(P=0.191)。gMG患者組外周血中CD4~+CD25~+CD127~-Tregs的比例顯著低于oMG患者組和健康對(duì)照組(P均0.001),而oMG患者組和健康對(duì)照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.059)。oMG患者組和gMG患者組CD19~+CD27~+CD38~-記憶B細(xì)胞比例較健康對(duì)照組顯著升高(P=0.004;P0.001),而oMG患者組與gMG患者組相比其比例顯著降低(P=0.001)。oMG患者組外周血CD19~+CD24~(hi)CD27~+Bregs比例較gMG患者組顯著升高(P=0.001);而oMG患者組和gMG患者組相比健康對(duì)照組則無顯著差異(P=0.103;P=0.172)。oMG患者組和gMG患者之間CD19~+CD38~+CD138~+漿細(xì)胞比例無顯著差異(P=0.192),而健康對(duì)照組未檢測(cè)到明顯CD19~+CD38~+CD138~+漿細(xì)胞表達(dá)。gMG患者組外周血中CD19~+CD40~+B細(xì)胞比例較oMG患者組和健康對(duì)照組均顯著升高(P=0.001;P0.001),而oMG患者組CD19~+CD40~+B細(xì)胞比例較健康對(duì)照組顯著升高(P=0.048)。oMG患者組血清IL-10水平顯著高于gMG患者組和健康對(duì)照組(P=0.042;P=0.002);gMG患者組血清IL-10水平相較健康對(duì)照組無顯著差異(P=0.253)。與健康對(duì)照組相比,oMG患者組和gMG患者組血清IL-2水平均顯著升高(P=0.016;P=0.002),但oMG患者組和gMG患者組之間無顯著差異(P=0.962)。gMG患者組血清IL-17水平顯著高于oMG患者組和健康對(duì)照組(P=0.013;P0.001),但oMG患者組血清IL-17水平與健康對(duì)照組相比無顯著差異(P=0.565)。此外,gMG患者組血清IL-6水平較健康對(duì)照組顯著升高(P=0.005);但oMG患者組血清IL-6水平同二者相比均無顯著差異(P=0.163;P=0.525)。最后,血清IL-4和IFN-γ水平在oMG患者組、gMG患者組與健康對(duì)照組之間均無顯著差異(P均0.05)。結(jié)論:Tregs和Bregs的比例減少,CD3~+CD4~+T細(xì)胞、記憶B細(xì)胞等的比例增加可能是oMG向gMG進(jìn)展的重要因素;同時(shí),IL-2、IL-6和IL-10等細(xì)胞因子在oMG發(fā)生發(fā)展過程中扮演重要角色;T、B細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答機(jī)制失衡觸發(fā)oMG并進(jìn)一步誘導(dǎo)gMG的產(chǎn)生。
【圖文】：

G 患者組、gMG 患者組和健康對(duì)照組中 CD3+CD4+T 細(xì)胞比例的比較（*P <細(xì)胞術(shù)分析 oMG 患者組、gMG 患者組和健康對(duì)照組中 CD3+CD4+T 細(xì)胞的

9圖 2 流式細(xì)胞術(shù)分析 oMG 患者組、gMG 患者組和健康對(duì)照組中 CD3+CD4+T 細(xì)胞的比例3.2.2 oMG 組、gMG 組與對(duì)照組 CD3+CD8+T 細(xì)胞比例同樣的，我們?cè)?PBMCs 淋巴細(xì)胞群中以 CD3+CD8+T 細(xì)胞設(shè)門，觀察CD3+CD8+T 細(xì)胞的比例，發(fā)現(xiàn) oMG 患者組外周血中 CD3+CD8+T 細(xì)胞所占淋巴細(xì)胞的百分比為（9.50 ± 2.81）%，gMG 患者組為（10.38 ± 2.98）%，健康對(duì)照組為（8.84 ± 3.02）%，三組間比較無顯著差異（P = 0.191）。詳見圖 3 和圖 4。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R746.1

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本文編號(hào)：2688544