【摘要】：目的:觀察細(xì)胞分裂周期蛋白42(Cell division cycle42,CDC42)在大鼠腦缺血再灌注后的表達(dá)情況,同時(shí)探討CDC42特異性抑制劑ML141對(duì)大鼠神經(jīng)功能缺損及腦組織梗死體積的影響。方法:隨機(jī)將雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠分為以下九組:缺血再灌注模型組(5組:再灌注6 h、24 h、72 h、1 w、2 w)、正常組、假手術(shù)組、ML141組及DMSO組,采用大腦中動(dòng)脈阻塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立腦缺血再灌注模型,通過改良的Zea-Longa評(píng)分法評(píng)估大鼠的神經(jīng)功能缺損程度,用Western blot測(cè)定CDC42的表達(dá)情況,用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)測(cè)定CDC42的表達(dá)部位情況,HE染色觀察腦缺血再灌注損傷后的病理變化,TTC染色法測(cè)定大鼠腦組織梗死體積比的變化。結(jié)果:1.Zea-Longa評(píng)分結(jié)果:正常組、假手術(shù)組大鼠得0分,缺血再灌注6 h、24 h、72 h、1 w、2 w組得分各不相同,提示有神經(jīng)功能受損,模型組與正常組相比,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.Western blot結(jié)果:CDC42在各組大鼠的缺血側(cè)腦組織中都有表達(dá),正常組與假手術(shù)組中,CDC42有基礎(chǔ)水平表達(dá),且差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,在再灌注6h、24h組中,CDC42顯著減少,與正常組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);CDC42的表達(dá)隨著再灌注時(shí)間的增加,其下降趨勢(shì)減緩,至72h及1w時(shí),CDC42表達(dá)已接近正常水平,與正常組相比較,差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,2w時(shí),CDC42表達(dá)再次下降,與正常組對(duì)比,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.HE染色結(jié)果:正常組腦組織細(xì)胞排列整齊、結(jié)構(gòu)完整清晰。1w組缺血側(cè)腦組織細(xì)胞形態(tài)及排列不規(guī)則,核固縮,且結(jié)構(gòu)紊亂。4.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:CDC42在大鼠海馬DG區(qū)細(xì)胞的胞漿區(qū)有表達(dá)。5.ML141干預(yù)后Zea-Longa評(píng)分結(jié)果:ML141組的Zea-Longa得分較1 w組低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。DMSO組得分與1 w組得分之間差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6.ML141干預(yù)后TTC染色結(jié)果:正常組腦組織無梗死灶,缺血再灌注1w組、ML141組及DMSO組均有大小不同的梗死灶,予ML141干預(yù)后,大鼠腦梗死體積比顯著縮小,與1w組對(duì)比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),DMSO組與1w組的差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。7.ML141干預(yù)后Western blot結(jié)果:ML141組CDC42表達(dá)減少,其差異與正常組、1w組相比均具具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。DMSO組CDC42的表達(dá)與1w組相比差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:CDC42在大鼠腦缺血再灌注后缺血側(cè)腦組織中的表達(dá)呈動(dòng)態(tài)變化,用CDC42特異性抑制劑ML141干預(yù)后,大鼠的神經(jīng)功能缺損程度及腦梗死體積比均有所下降,提示CDC42可能參與了大鼠腦缺血再灌注損傷。
【圖文】：

正中靠下縱向切開皮膚約 1.5cm，鈍內(nèi)動(dòng)脈，結(jié)扎頸總、頸外動(dòng)脈（如圖栓：結(jié)扎頸總動(dòng)脈（遠(yuǎn)離頸總動(dòng)脈分），用動(dòng)脈夾夾閉頸內(nèi)動(dòng)脈，在頸總動(dòng)，往頸內(nèi)動(dòng)脈方向緩慢插入消毒好的達(dá)大腦前動(dòng)脈的起始部（插入長(zhǎng)度約 時(shí)間，，再次消毒，切口處逐層縫合。緩慢拔出 MCAO 線栓。0mm 為假手術(shù)組，其余處理同上。整、保溫飼養(yǎng)。

Zea-Longa 評(píng)分法評(píng)價(jià)大鼠神經(jīng)功能缺損情況。結(jié)果示正 分，提示無神經(jīng)功能受損，其余組得分各不相同，提示均各組分?jǐn)?shù)（如表 1），發(fā)現(xiàn)各 MCAO 實(shí)驗(yàn)組的 Zea-Long如圖 2）。表 1 各組大鼠 Zea- Longa 評(píng)分結(jié)果，M (P25, P75)ab. 1 The Zea- Longa Score of rats in different groups, M (P25, Pn Zea-Longa Score（score） Z 值/ 12 0.0(0.0, 0.0)ion 5 0.0(0.0, 0.0) 0.000 2.09552.0(1.5, 3.0) -3.93153.0(2.0, 3.0) -3.94252.0(2.0, 2.5) -3.961123.0(2.0, 3.0) -4.51752.0(2.0. 3.0,) -3.942pare the differences between each group and the normal group. b comeen multiple groups within the MACO groups.
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R743.3

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本文編號(hào)：2688024