【摘要】：目的:髓母細(xì)胞瘤(medulloblastoma,MB)是一種起源于原始神經(jīng)外胚層的后顱窩惡性腫瘤,是最常見(jiàn)的兒童中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。主要發(fā)生于小腦下蚓部,常發(fā)生經(jīng)腦脊液的播散轉(zhuǎn)移。髓母細(xì)胞瘤的治療主要是手術(shù)輔以放療和化療,但是,手術(shù)不易完整切除,放療和化療也具有嚴(yán)重毒副作用,對(duì)患兒造成不同程度的智商下降及認(rèn)知能力障礙、聽(tīng)力損害、內(nèi)分泌紊亂、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育障礙、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、繼發(fā)腫瘤、心肺毒性及生殖毒性等。使患兒的正常生長(zhǎng)發(fā)育及生活質(zhì)量受到嚴(yán)重影響。降低放療和化療劑量又難以控制腫瘤細(xì)胞甚至引發(fā)治療抵抗及復(fù)發(fā)問(wèn)題。很多研究提出了許多策略來(lái)克服腫瘤細(xì)胞的放療和化療抗性,但是對(duì)腫瘤微環(huán)境介導(dǎo)的耐藥機(jī)制以及如何規(guī)避關(guān)注的較少。隨著腫瘤分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和在分子水平上對(duì)于腫瘤發(fā)病機(jī)制認(rèn)識(shí)的不斷加深,腫瘤微環(huán)境是腫瘤發(fā)生、進(jìn)展和轉(zhuǎn)移的生物學(xué)關(guān)鍵。星形膠質(zhì)細(xì)胞是一種特殊的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,在腦中廣泛分布,向神經(jīng)元提供能量代謝物,以及維持細(xì)胞外離子和神經(jīng)遞質(zhì)的穩(wěn)態(tài),在微循環(huán)中起重要作用,也是髓母細(xì)胞瘤微環(huán)境的重要組成細(xì)胞。此外,星形膠質(zhì)細(xì)胞釋放大量的生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子,可能為腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移提供一個(gè)支持性的微環(huán)境。有研究證明星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)SHH型髓母細(xì)胞瘤的發(fā)生及發(fā)展起不可或缺的作用,這突出了星形膠質(zhì)細(xì)胞在髓母細(xì)胞瘤微環(huán)境中的重要性。但就目前而言,星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)髓母細(xì)胞瘤的放療和化療過(guò)程中的影響尚缺少研究。因此,本課題旨在通過(guò)研究星形膠質(zhì)細(xì)胞這一髓母細(xì)胞瘤腫瘤微環(huán)境中的重要組分,對(duì)髓母細(xì)胞瘤放療和化療損傷的影響,為髓母細(xì)胞瘤的臨床治療及耐藥研究提供新的思路。方法:提取原代髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞,將星形膠質(zhì)細(xì)胞與髓母細(xì)胞瘤以1:10的濃度在體外共同培養(yǎng)模擬腫瘤微環(huán)境條件。經(jīng)過(guò)放療或化療處理后,對(duì)比單獨(dú)培養(yǎng)和共同培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞生存狀態(tài)差異,研究星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)髓母細(xì)胞瘤放療和化療損傷的影響。通過(guò)對(duì)比研究單獨(dú)培養(yǎng)和與星形膠質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤在放療和化療過(guò)程中,增殖能力、凋亡水平及DNA損傷程度的差異,探究星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)髓母細(xì)胞瘤放療和化療損傷保護(hù)作用的機(jī)制。結(jié)果:我們的結(jié)果顯示1.單獨(dú)培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤在1Gy放療的情況下大量死亡,而和星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤大量存活;在2μM順鉑化療的情況下,單獨(dú)培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤大量死亡,共培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤僅少數(shù)細(xì)胞死亡。2.通過(guò)對(duì)DNA損傷特異性抗體γH2AX及細(xì)胞凋亡特異性抗體Cleaved-caspase3的標(biāo)記,發(fā)現(xiàn)與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤在1Gy放療的情況下DNA損傷程度及凋亡水平均比單獨(dú)培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤低;在2μM順鉑化療的情況下,單獨(dú)培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤DNA損傷程度及凋亡水平比共培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤高。證明與星形膠質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng),可以提高髓母細(xì)胞瘤對(duì)DNA損傷的抵抗,從而降低其在放療和化療中的凋亡水平。3.運(yùn)用q PCR定量分析,發(fā)現(xiàn)與星形膠質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤在1Gy放療或2μM順鉑化療的情況下,干擾素相關(guān)DNA損傷抵抗基因(Interferon-Related DNA Damage Resistance Signature,IRDS)表達(dá)明顯比單獨(dú)培養(yǎng)的髓母細(xì)胞瘤高。結(jié)論:星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)髓母細(xì)胞瘤放療和化療損傷有保護(hù)作用。在髓母細(xì)胞瘤放療和化療過(guò)程中,星形膠質(zhì)細(xì)胞通過(guò)提高髓母細(xì)胞瘤對(duì)DNA損傷的抵抗,降低了髓母細(xì)胞瘤的凋亡水平。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)髓母細(xì)胞瘤放療和化療損傷的保護(hù)作用,可能與提高髓母細(xì)胞瘤干擾素相關(guān)DNA損傷抵抗基因(IRDS)的表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R739.4

【參考文獻(xiàn)】

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1 張晶;李春德;劉丕楠;李朋;李仕維;張順;趙赤;趙賦;;實(shí)時(shí)熒光定量PCR確定兒童和青少年髓母細(xì)胞瘤分子亞型的準(zhǔn)確性分析[J];中華神經(jīng)外科雜志;2016年09期

2 侯棟梁;房彤;宋麗楠;孫保錦;陳力;;兒童髓母細(xì)胞瘤術(shù)后全腦全脊髓放療的血液學(xué)不良反應(yīng)及近期療效觀察[J];中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志;2016年03期

3 江賢萍;徐金永;陳乾;袁秀麗;譚震;;兒童髓母細(xì)胞瘤中β-catenin的表達(dá)及意義[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2014年01期

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本文編號(hào)：2646456