本文關(guān)鍵詞：大鼠腦缺血再灌注損傷后Cathepsin L介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡與p38表達(dá)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)元凋亡程序被啟動(dòng),溶酶體組織蛋白酶L(cathepsin L)和p38蛋白均參與細(xì)胞凋亡,但兩者關(guān)系尚不明確。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)采用cathepsin L抑制劑Z-FY-DMK和p38蛋白抑制劑SB203580對(duì)大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞模型進(jìn)行干預(yù),檢測(cè)并分析cathepsin L和p38蛋白表達(dá)變化,并分析兩者間的相關(guān)性,旨在探討cathepsin L與p38蛋白的可能關(guān)系,為缺血性腦卒中的治療提供新的思路。方法:選取10~12周齡,體重為(280±20)克的SD大鼠216只,隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham組,n=54)、腦缺血再灌注模型組(IRI組,n=54)、cathepsin L抑制劑組(CLI組,n=54)、p38抑制劑組(SB組,n=54)。按Longa法制作大鼠大腦中動(dòng)腦缺血再灌注模型。缺血再灌注時(shí)間點(diǎn)分為2h、6h、12h和24h,四組的時(shí)間點(diǎn)設(shè)置相同。假手術(shù)組除了插線(xiàn)深度不同,其他手術(shù)流程同模型組。CLI組和SB組分別于造模前30分鐘右側(cè)側(cè)腦室注射Z-FY-DMK(20μg/1μl×5μl)和SB203580(0.1nmol/μl×5μl),假手術(shù)組和模型組于同一時(shí)間點(diǎn)和同一部位注射與干預(yù)劑等量10ml/L的DMSO溶液。采用Longa's的5級(jí)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分法對(duì)大鼠行神經(jīng)功能缺損評(píng)分。運(yùn)用TTC染色法檢測(cè)各組再灌注后24h亞組腦梗死體積,TUNEL法觀察各組大鼠缺血側(cè)皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡數(shù)目,western blot法檢測(cè)各組cathepsin L和p-p38蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1.造模成功率87%。2.ttc染色法檢測(cè)到,sham組未見(jiàn)明顯梗死灶,iri組、cli組、sb組梗死體積分別為22.89%、17.09%、18.37%,cli組、sb組分別與模型組比較,梗死體積明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。3.tunel法觀察到,sham組未見(jiàn)凋亡細(xì)胞,iri組2h、6h、12h、24h均可見(jiàn)到凋亡細(xì)胞(細(xì)胞核被染成黃色或棕黃色),且隨著時(shí)間點(diǎn)延長(zhǎng)凋亡細(xì)胞數(shù)逐漸升高,cli組、sb組于2h、6h、12h、24h也可見(jiàn)到凋亡細(xì)胞,且在同一時(shí)間點(diǎn)各組凋亡細(xì)胞數(shù)較iri組明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。4.westernblot法檢測(cè)cathepsinl表達(dá),sham組可見(jiàn)少量cathepsinl蛋白表達(dá),iri組cathepsinl蛋白于再灌注后2h開(kāi)始表達(dá),6h、12h呈上升趨勢(shì),12h達(dá)高峰,24h開(kāi)始下降,較sham組cathepsinl蛋白表達(dá)明顯增多,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。cli組cathepsinl蛋白于再灌注后2h開(kāi)始表達(dá),6h、12h呈上升趨勢(shì),12h達(dá)高峰,24h開(kāi)始下降,各時(shí)間點(diǎn)較iri組明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。sb組cathepsinl蛋白2h開(kāi)始表達(dá),6h、12h呈上升趨勢(shì),12h達(dá)高峰,24h開(kāi)始下降,各時(shí)間點(diǎn)與iri組比較,差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。5.westernblot法檢測(cè)p-p38蛋白表達(dá),sham組可見(jiàn)少量p-p38蛋白表達(dá),iri組p-p38蛋白的表達(dá)于再灌注后2h、6h、12h、24h呈連續(xù)上升趨勢(shì),較sham組p-p38蛋白表達(dá)明顯增多,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。cli組p-p38蛋白表達(dá)于再灌注后2h、6h、12h、24h呈連續(xù)上升趨勢(shì),各時(shí)間點(diǎn)較iri組比較明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。SB組p-p38蛋白表達(dá)于再灌注后2h、6h、12h、24h呈連續(xù)上升趨勢(shì),各時(shí)間點(diǎn)較IRI組比較明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。6.Cathepsin L和p-p38分別在IRI組和CLI組中表達(dá)呈正相關(guān)性,其中在IRI組中r=0.789、p0.01,在CLI組中r=0.889、p0.01。結(jié)論:1.大鼠腦缺血再灌注損傷后,cathepsin L與p38蛋白的表達(dá)可能相關(guān)。2.大鼠腦缺血再灌注損傷后,cathepsin L抑制劑Z-FY-DMK能減少梗死體積和細(xì)胞凋亡可能是通過(guò)下調(diào)p38蛋白表達(dá)而發(fā)揮抗凋亡作用。
【關(guān)鍵詞】：腦缺血再灌注 溶酶體 cathepsin L p38 凋亡
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R743
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-13
• 第1章 緒論13-15
• 第2章 材料與方法15-25
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料15-19
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法19-24
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析24-25
• 第3章 結(jié)果25-35
• 3.1 大鼠模型成功率及神經(jīng)功能缺損評(píng)分25-26
• 3.2 TTC染色26-27
• 3.3 TUNEL法27-29
• 3.4 Western blot法29-35
• 第4章 討論35-41
• 4.1 動(dòng)物模型評(píng)價(jià)35
• 4.2 溶酶體與細(xì)胞凋亡35-37
• 4.3 Cathepsin L與腦缺血再灌注損傷37-38
• 4.4 P38蛋白與腦缺血再灌注損傷38-39
• 4.5 Cathepsin L可能通過(guò)p38蛋白參與細(xì)胞凋亡39-40
• 4.6 展望40-41
• 第5章 結(jié)論41-43
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 綜述49-59
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 附錄59-61
• 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果61-63
• 致謝63

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 羅建忠,朱文斌;腦缺血再灌注中補(bǔ)體激活的實(shí)驗(yàn)研究[J];醫(yī)學(xué)臨床研究;2003年06期

2 周杰,馮忠堂,徐蔚;腦缺血再灌注后遲發(fā)性神經(jīng)元死亡的分子機(jī)制[J];河南實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2004年04期

3 周鵬;馬曉明;;電針治療腦缺血再灌注損傷機(jī)理的研究概況[J];云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年06期

4 蔡世昌;白波;張秋玲;;腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞再生研究進(jìn)展[J];解剖學(xué)研究;2012年01期

5 王銳;腦缺血再灌注與線(xiàn)粒體研究[J];醫(yī)學(xué)綜述;2002年07期

6 呂少萍,管勇;尼莫通對(duì)腦缺血再灌注細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)影響[J];青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年02期

7 高蕊;甘尚權(quán);;腦缺血再灌注損傷后小分子RNA的分析[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年10期

8 張瑩;舒兆瑞;沈梅紅;;線(xiàn)栓法制備腦缺血再灌注的影響因素及探討[J];遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2012年12期

9 岑德意,周蘭蘭,明亮,江勤,馬傳庚;清醒小鼠反復(fù)腦缺血再灌注法致學(xué)習(xí)記憶障礙模型的建立[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2000年02期

10 裴林,李勇,顏景芝,張光毅,崔肇春,朱正美;腦缺血再灌注后酪氨酸蛋白激酶和蛋白磷酸酶的活性變化及其機(jī)制(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2000年08期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 薛晶;馮加純;鄧方;韓冬;程瑩瑩;金桂花;;腦缺血再灌注早期的炎癥和自由基反應(yīng)的動(dòng)態(tài)變化[A];第十一屆全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

2 張美蓉;張麗;艾厚喜;王文;;參黃花顆粒抗腦缺血再灌注損傷機(jī)理研究綜述[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)補(bǔ)益藥藥理專(zhuān)業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)暨人參及補(bǔ)益藥學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)議論文集[C];2011年

3 張美蓉;王文;;參黃花顆�？鼓X缺血再灌注損傷機(jī)理研究綜述[A];2011全國(guó)老年癡呆與衰老相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議第三屆山東省神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師（學(xué)術(shù)）論壇論文匯編[C];2011年

4 張美蓉;張麗;艾厚喜;王文;;參黃花顆粒抗腦缺血再灌注損傷機(jī)理研究綜述[A];第一屆全國(guó)麻醉藥理專(zhuān)業(yè)委員會(huì)第二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

5 張美蓉;張麗;艾厚喜;王文;;參黃花顆�？鼓X缺血再灌注損傷機(jī)理研究綜述[A];中國(guó)成人醫(yī)藥教育論壇（4）[C];2011年

6 ;參黃花顆粒抗腦缺血再灌注損傷機(jī)理研究綜述[A];2012中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師分會(huì)神經(jīng)病學(xué)專(zhuān)家委員會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2012年

7 李建生;任小巧;劉軻;劉正國(guó);孔令飛;;老齡大鼠腦缺血再灌注神經(jīng)細(xì)胞凋亡變化規(guī)律研究[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)第七次全國(guó)實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2004年

8 葛林寶;徐鳴曙;方程;徐佳;;電針對(duì)腦缺血再灌注大鼠紋狀體內(nèi)單胺類(lèi)遞質(zhì)影響的動(dòng)態(tài)研究[A];全國(guó)針?lè)ň姆ㄅR床與科研學(xué)術(shù)研討會(huì)暨脊柱病研究新進(jìn)展論文匯編[C];2005年

9 陳敏;葛金文;陳懿;劉吉勇;朱惠斌;;腦泰方促腦缺血再灌注大鼠腦血管新生的實(shí)驗(yàn)研究[A];湖南省首屆生理—藥理科學(xué)青年論壇論文摘要匯編[C];2009年

10 鄧世芳;蔣紅玉;張思為;曹平;;芪棱湯對(duì)大鼠腦缺血再灌注后熱休克蛋白70的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)血栓病分會(huì)第四次學(xué)術(shù)研討會(huì)暨廣東省中醫(yī)藥學(xué)會(huì)血栓病專(zhuān)業(yè)委員會(huì)首屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 衣曉峰;哈醫(yī)大揭示靜麻對(duì)腦缺血再灌注損傷后的保護(hù)機(jī)理[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

2 ;抗呆I號(hào)對(duì)受損神經(jīng)組織有保護(hù)和修復(fù)作用[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2005年

3 羅薇;中藥治療VD實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊敏;頭針對(duì)腦缺血再灌注大鼠腦組織血管新生影響的相關(guān)機(jī)制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 徐露;貝沙羅汀對(duì)腦缺血再灌注大鼠血腦屏障的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

3 朱進(jìn);Glycogen synthase kinase 3β在大鼠腦缺血再灌注損傷過(guò)程中的作用及機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

4 沙瑩;粒細(xì)胞集落刺激因子對(duì)腦缺血再灌注大鼠的治療及其作用機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2010年

5 瞿濤;電針對(duì)腦缺血再灌注大鼠腦內(nèi)血管新生影響的研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2009年

6 張莉;針刺對(duì)大鼠腦缺血再灌注后線(xiàn)粒體損傷相關(guān)因素影響的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2004年

7 李強(qiáng);雷帕霉素對(duì)腦缺血再灌注后線(xiàn)粒體損傷的影響[D];上海交通大學(xué);2014年

8 宋銳鋒;中藥抗呆Ⅰ號(hào)對(duì)腦缺血再灌注星形膠質(zhì)細(xì)胞因子的影響[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2002年

9 鄭一;大鼠腦缺血再灌注后遲發(fā)性神經(jīng)元死亡的藥物干預(yù)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2007年

10 趙紅;高壓氧對(duì)腦缺血再灌注小鼠血腦屏障通透性的影響[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2003年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 崔曉雅;參芎化瘀膠囊預(yù)處理對(duì)腦缺血再灌注大鼠一氧化氮合酶亞型表達(dá)的影響[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

2 尤佳鋒;羥基紅花黃色素A對(duì)血管性癡呆動(dòng)物模型保護(hù)作用的研究[D];安徽理工大學(xué);2016年

3 張?zhí)?腦缺血再灌注中TIGAR對(duì)自噬的影響[D];蘇州大學(xué);2016年

4 周立兵;左卡尼汀通過(guò)抑制HMGB1對(duì)大鼠腦缺血再灌注的保護(hù)機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2016年

5 丁曉蔚;腦缺血再灌注后TLR-2與MMP-2表達(dá)的變化關(guān)系及其在缺血性腦損傷中的作用機(jī)制[D];昆明理工大學(xué);2016年

6 周蓓群;MLKL在腦缺血再灌注損傷后作用及機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2016年

7 高敏;阿托伐他汀預(yù)處理對(duì)大鼠腦缺血再灌注后MBP、GFAP及NSE表達(dá)的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

8 孫麗莉;頭穴透刺預(yù)處理對(duì)腦缺血再灌注大鼠內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的影響[D];黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院;2016年

9 米艷;腦缺血再灌注大鼠PDCD-5的表達(dá)及依達(dá)拉奉干預(yù)后對(duì)其的影響[D];湖南師范大學(xué);2016年

10 王玉;RGMa對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后血管再生的影響及機(jī)制探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：大鼠腦缺血再灌注損傷后Cathepsin L介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡與p38表達(dá)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：263342