發(fā)布時(shí)間：2020-04-16 08:33

【摘要】：腦缺血是全球人口死亡和致殘的主要原因之一,嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康。腦缺血后的損傷區(qū)域包括中心壞死區(qū)和仍處于可逆損傷狀態(tài)的缺血半暗帶。挽救和保護(hù)缺血半暗帶治療腦缺血的關(guān)鍵。已有研究表明腦缺血后的損傷能夠誘導(dǎo)神經(jīng)再生,神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cell,NSC)/神經(jīng)前體細(xì)胞(neural progenitor cell,NPC)能夠增殖、遷移到損傷區(qū),分化為不同類(lèi)型神經(jīng)細(xì)胞并整合至神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中,從而使腦的結(jié)構(gòu)和功能恢復(fù)。因此促進(jìn)新生神經(jīng)元形成也對(duì)腦缺血后腦的內(nèi)源性修復(fù)有著重要作用。腦缺血后的神經(jīng)保護(hù)與神經(jīng)再生受多種因素的調(diào)節(jié)。①顆粒前體蛋白(PGRN,progranulin)被報(bào)道有生長(zhǎng)因子、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、抗炎性因子等多種生理功能,能夠參與腦缺血損傷的多種級(jí)聯(lián)反應(yīng)。已有研究表明,PGRN參與腦缺血損傷后的神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)再生過(guò)程,其作用機(jī)制可能與神經(jīng)保護(hù)作用、保護(hù)血腦屏障和炎性反應(yīng)相關(guān),但其分子機(jī)制尚不明確。在此,我們推測(cè)PGRN能夠通過(guò)促進(jìn)腦內(nèi)神經(jīng)再生及對(duì)腦缺血發(fā)揮保護(hù)作用,并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行了進(jìn)一步的探究。本研究選用PC12細(xì)胞系并體外培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞建立了相關(guān)細(xì)胞模型,利用細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、免疫熒光和免疫印跡等分子生物學(xué)等技術(shù),研究了在缺氧缺糖損傷下,PGRN對(duì)不同細(xì)胞模型的保護(hù)機(jī)制。研究結(jié)果:1.PGRN對(duì)PC12細(xì)胞的保護(hù)作用:建立PC12細(xì)胞的氧糖剝奪(oxygen glucose deprivation,OGD)模型。研究發(fā)現(xiàn):(1)PGRN能顯著降低OGD誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的凋亡率,下調(diào)凋亡關(guān)鍵蛋白Caspase3(P0.01),維持Bcl-2/Bax的平衡;(2)PGRN上調(diào)OGD損傷下PC12細(xì)胞CyclinD1的表達(dá)量(P0.01),從而調(diào)控PC12細(xì)胞進(jìn)入分裂期,PGRN上調(diào)OGD損傷下PC12細(xì)胞Akt和Erk1/2的磷酸化水平,從而激活增殖相關(guān)信號(hào)通路,使PC12細(xì)胞的增殖能力加強(qiáng)。PGRN能從減弱凋亡和促進(jìn)增殖兩方面,保護(hù)OGD誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷。2.PGRN對(duì)缺氧條件下的NSCs作用:原代培養(yǎng)NSCs,建立NSCs的缺氧模型。研究發(fā)現(xiàn):(1)缺氧12h后,NSCs的增殖出現(xiàn)極顯著的增強(qiáng),PGRN能使NSCs的增殖能力被進(jìn)一步加強(qiáng)(P0.05),PGRN能夠升高Akt和Erk1/2的磷酸化水平(P0.01)來(lái)調(diào)控NSCs的增殖。PGRN能夠使缺氧條件下NSCs的形態(tài)更趨近神經(jīng)元,且上調(diào)未成熟神經(jīng)元標(biāo)志蛋白β-tublinⅢ和DCX(P0.01)的表達(dá)量。PGRN能夠促進(jìn)缺氧條件下NSCs的增殖與分化,可能促進(jìn)缺氧后的神經(jīng)再生。結(jié)論:1.PGRN通過(guò)減少凋亡和促進(jìn)增殖兩方面,對(duì)OGD誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的損傷進(jìn)行保護(hù)。2.PGRN促進(jìn)缺氧條件下NSCs的增殖與分化。
【圖文】：

圖１．１腦缺血損傷示意圖［１２］逡逑Ｆｉｇ．邋１．１邋Ａ邋ｐａｔｔｅｒｎ邋ｄｉａｇｒａｍ邋ｏｆ邋ｂｒａｉｎ邋ｉｓｃｈｅｍｉａ邋ｉｎｊｕｒｙ．逡逑一個(gè)復(fù)雜的生理過(guò)程，缺血發(fā)生后，存在著一系基酸的釋放量增高，且此時(shí)星形膠質(zhì)細(xì)胞功能受

圖１．２腦缺血后相關(guān)信號(hào)通路［ｌ２］逡逑Ｆｉｇ．邋１．２邋Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ邋ｐａｔｈｗａｙｓ邋ｒｅｌａｔｅｄ邋ｔｏ邋ｂｒａｉｎ邋ｉｓｃｈｅｍｉａ．逡逑１．２．３腦缺血對(duì)神經(jīng)發(fā)生的影響逡逑近年來(lái)的研宄表明，在成年哺乳動(dòng)物的ＳＶＺ和ＳＧＺ，一些生理刺能誘發(fā)神經(jīng)再生。１９９８年，Ｌｉｕ等首次發(fā)現(xiàn)短暫全腦缺血后，成年沙鼠
【學(xué)位授予單位】：陜西師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R743

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

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本文編號(hào)：2629588