【摘要】：【背景】死亡相關(guān)蛋白激酶1(DAPK1)是一種分布廣泛的絲氨酸/蘇氨酸(Ser/Thr)激酶,參與阿爾茨海默病和腦卒中發(fā)生發(fā)展,但DAPK1在帕金森病發(fā)病過程中的作用和機(jī)制仍不清楚。【目的】探究DAPK1在神經(jīng)退行性疾病帕金森病發(fā)病中的作用和分子機(jī)理�！痉椒ā孔⑸�1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP)誘導(dǎo)帕金森病模型小鼠。采用蛋白免疫印跡法、免疫組化等方法觀察DAPK1和其他蛋白的變化。用Q-PCR和FISH分析相關(guān)miRNA的表達(dá)。采用轉(zhuǎn)棒、曠場和爬桿行為學(xué)實(shí)驗(yàn)來評價(jià)運(yùn)動(dòng)能力。采用免疫熒光法、免疫印跡法和filter trap評價(jià)突觸核蛋白病變。注射相關(guān)病毒在體內(nèi)調(diào)控DAPK1的表達(dá)。采用轉(zhuǎn)基因小鼠雜交得到多巴胺神經(jīng)元特異性敲除DAPK1小鼠。采用多肽探索治療新策略�！窘Y(jié)果】我們研究發(fā)現(xiàn),帕金森病模型小鼠中DAPK1上調(diào)。C/EBPα轉(zhuǎn)錄因子缺失導(dǎo)致的miR-26a的下調(diào),導(dǎo)致DAPK1轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)。帕金森病模型小鼠中DAPK1上調(diào)與神經(jīng)元突觸核蛋白病變呈正相關(guān)。miR-26a的下調(diào)或者DAPK1的上調(diào)可以導(dǎo)致野生型小鼠出現(xiàn)突觸核蛋白病變、多巴胺神經(jīng)元丟失和運(yùn)動(dòng)障礙。與此相反,通過將DAT-cre小鼠與DAPK1-KD~(loxp/loxp)小鼠雜交,在多巴胺神經(jīng)元中敲除DAPK1,可以有效地改善慢性MPTP模型小鼠的癥狀。我們進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)DAPK1通過直接磷酸化α-synuclein的Ser129位點(diǎn)誘導(dǎo)帕金森樣表型。與此相一致的是在MPTP模型小鼠中使用一種細(xì)胞膜通透的競爭性多肽阻斷α-synuclein的磷酸化,可以改善突觸核蛋白病變、多巴胺神經(jīng)元丟失和運(yùn)動(dòng)障礙。【結(jié)論】miR-26a/DAPK1信號(hào)通路在帕金森病的分子和細(xì)胞病理過程中有重要作用。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R742.5

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本文編號(hào)：2624045