發(fā)布時間：2020-04-10 18:45

【摘要】：目的:本研究旨在探討低日照、低緯度地區(qū)視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病(Neuromyelitis optica spectrum disorder,NMOSD)患者維生素D受體(Vitamin D receptor,VDR)基因單核酸苷多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位點的分布情況,尋找NMOSD易感/保護(hù)性SNPs位點。方法:選取2017年03月至2018年09月在貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的83例NMOSD患者,采集外周血并提取DNA,通過聚合酶鏈反應(yīng)-直接測序法對VDR基因進(jìn)行分段測序,采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(electro-chemi lum i nescence immunoassay,ECLI)檢測血清維生素D水平。結(jié)果:在NMOSD患者中檢測出2個新SNPs位點,其分別位于VDR基因 NM_001017536.1:2143 CA,2296GT位置,此2個位點CA、GT基因型在NMOSD患者的頻率高于健康對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。這2個SNPs位點的突變基因型攜帶者發(fā)生NMOSD的風(fēng)險明顯升高(P0.05)。NMOSD患者CA、GT基因型攜帶者的維生素D缺乏和不足率顯著高于健康對照組(P0.05),但VDR基因新發(fā)現(xiàn)的SNPs位點與EDSS評分、復(fù)發(fā)次數(shù)無關(guān)。NMOSD患者血清維生素D水平顯著低于健康對照組(P0.05),且與EDSS評分,與C3補(bǔ)體呈正相關(guān)。維生素D缺乏及不足的NMOSD患者復(fù)發(fā)次數(shù)顯著高于維生素D足量組(P0.05)。結(jié)論:(1)本研究發(fā)現(xiàn)了NMOSD患者VDR基因2個新的SNPs位點,擴(kuò)充了NMOSD患者VDR基因突變數(shù)據(jù)庫,有助于NMOSD高危人群的篩查;(2)VDR基因新的SNPs位點與NMOSD的易感性相關(guān),且攜帶該2個SNPs位點的患者血清維生素D水平普遍低下,可能通過減弱維生素D/VDR信號傳導(dǎo)通路參與疾病發(fā)病。(3)NMOSD患者血清低維生素D水平與疾病嚴(yán)重程度、復(fù)發(fā)次數(shù)密切相關(guān),血清維生素D可能參與NMOSD的發(fā)病,并反映疾病嚴(yán)重程度。目的:探討維生素D代謝相關(guān)基因在視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病(neuromyelitis optica spectrum disorders,NM0SD)中發(fā)病機(jī)制中的作用,為NMOSD的治療提供新的思路。方法:采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法(electro-chemi luminescence immunoassay,ECLI)對40例NMOSD患者和40例健康對照者的血清維生素D進(jìn)行檢測,采用實時定量聚合酶鏈反應(yīng)n,定維生素D受體(vitamin D receptor,VDR)、GYP24A1、GYP27B1 mRNA的表達(dá)。結(jié)果:(1)NM0SD患者血清維生素D水平為18.36(95%Gl:16.27-20.44),低于健康對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(代0.001),分性別比較發(fā)現(xiàn):在女性中,NMOSD患者維生素D水平低于健康對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.006);分年齡段進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn):在小于30歲女性中,NM0SD患者維生素D水平低于健康對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001);(2)NM0SD患者VDR mRNA表達(dá)水平為3.11(95%Cl:2.24-3.97),高于健康對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001);NM0SD患者CYP27B1 mRNA表達(dá)水平為2.25(95%Cl:1.25-3.25),高于健康對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.016);NMOSD患者CYP24A1 mRNA表達(dá)水平為2.04(95%Cl:0.85-3.23),與健康對照組相比,差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.093)。(3)對NM0SD患者VDR、GYP27B1、GYP24A1 mRNA表達(dá)水平與性別、年齡、病程、AQP4-lgG進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),VDR、CYP27B1、CYP24A1 mRNA的異常表達(dá)與NM0SD患者的性別、年齡、病程、AQP4-lgG無關(guān)(P＞0.05)。(4)Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn),VDR、GYP27B1、GYP24A1與EDSS評分、復(fù)發(fā)次數(shù)無顯著相關(guān)性。結(jié)論:在NM0SD患者中,可能出現(xiàn)VDR以及CYP27B1 mRNA的增高,高表達(dá)的VDR和CYP27B1可能是維生素D加工缺陷的反應(yīng),導(dǎo)致}谼信號通路減弱,從而參與疾病的發(fā)生發(fā)展。本研究沒有觀察到CYP24A1基因表達(dá)水平的變化,可能是小樣本導(dǎo)致的統(tǒng)計誤差,需要擴(kuò)大樣本進(jìn)一步分析維生素D代謝相關(guān)基因來驗證當(dāng)前的結(jié)果。
【圖文】：

Ｃ＞Ａ位點與２２９６Ｇ＞Ｔ位點之間Ｄ’＞０．７５，邋Ｒ２＞０．３３，提示存在強(qiáng)連鎖不平衡，，逡逑此兩個位點構(gòu)成的單倍體型在ＮＭＯＳＤ患者中的頻率顯著高于健康對照組，差異逡逑具有統(tǒng)計學(xué)意義（尸＜0．0１）。詳見圖２－１、２－２、２－３、表２－４。逡逑３００邐３００逡逑■邐■邐＿■邋＿■■■■■■■■＿逡逑ａ邐Ｌ邐１邋Ｕ邐Ｌ邋Ｌ邋１邋ｎ邋ｒｔ邋ｃ邋ｃ邋Ｌ邋Ｌ邋１邋ｒ＊．邋ｒ．邋＊ｊ邋Ｉ邋ｃ邋ａ邋Ｌ逡逑２１４３邋Ｃ＞Ａ位點突變型ＣＡ雜合子（ＮＭＯＳＤ）邋２１４３邋Ｃ＞Ａ位點野生型ＣＣ純合子（ＨＣ）逡逑圖２－１邋ＶＤＲ基因２１４３邋Ｃ＞Ａ位點突變測序圖逡逑Ｆｉｇ．２－１邋ＶＤＲ邋ｇｅｎｅ邋２１４３邋Ｃ＞Ａ邋ｍｕｔａｔｉｏｎ邋ｓｅｑｕｅｎｃｅ邋ｍａｐ逡逑９逡逑

？邋？逡逑注：ｎｍｌ：邋２１４３邋Ｃ＞Ａ，ｎｍ２：邋２２９６邋Ｇ＞Ｔ逡逑圖２－３邋２１４３邋Ｃ＞邋Ａ位點與２２９６邋Ｇ＞Ｔ位點之間ＬＩ）分析逡逑Ｆｉｇ．２－３邋Ｌｉｎｋａｇｅ邋ｄｉｓｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ邋ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｏｆ邋ＶＤＲ邋ｇｅｎｅ邋ＳＮＰｓ逡逑表２－４邋ＮＭＯＳＤ患者和健康對照組ＳＮＰｓ基因型、等位基因以及單倍體型頻率比較逡逑Ｔａｂｌｅ邋２－４邋Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ邋ｏｆ邋ＳＮＰｓ邋ｇｅｎｏｔｙｐｅ，邋ａｌｌｅｌｅ邋ａｎｄ邋ｈａｐｌｏｔｙｐｅ邋ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ邋ｉｎ邋ＮＭＯＳＤ邋ｐａｔｉｅｎｔｓ逡逑ａｎｄ邋ｈｅａｌｔｈｙ邋ｃｏｎｔｒｏｌｓ逡逑基因型邐ＮＭＯＳＤ邐對照組邐ｆ邐ＱＲ［９５％ＣＩ］邐Ｐ逡逑２１４３Ｃ＞Ａ逡逑ＣＣ邐５５（６６．２７）邐７７（９２．７８）邐１？９0２邐６．５３３［２．５３４－１６．８４６］邐０．０００＊逡逑ＣＡ邐２８（３３．７）邐６（７．２３）邐Ｌ邐Ｊ逡逑Ａｌｌｄｔ邋Ｃ邐丨３８（８３．１３）邐１６０（９６．３８）邐１５邋ｇ５９邐５．４１１邋［２．１７６－１３．４５０］邐０．０００＊逡逑Ａｌｌｅｌｅ邋Ａ邐２８（１６．８７）邐６（３．６１）邐Ｊ逡逑２２９６Ｇ＞Ｔ逡逑（，（，邐６５（７８．３１）邐７８（９ｊ＇９８）邐８．５３０邐４．３２０［１．５２Ｍ２．２７２］邐０．００３＊逡逑ＧＴ邐１８（２１．６９）邐５（６．０２）邐Ｌ邐Ｊ逡逑ＡＭｄｅＧ邐，４８（８９，６）邐，６１（％－９９）邐７．８９５邐３．fⅲ圬村遑澹福鰨蒎危�，０�(dān)義希粒歟歟澹歟邋澹藻危保福ǎ

本文編號：2622584