【摘要】：目的探討micro RNA-124在大鼠腦缺血再灌注損傷中的作用及其對細(xì)胞焦亡的調(diào)控機(jī)制。方法選取8周齡雄性SD大鼠80只,隨機(jī)分為正常對照組(control組)、假手術(shù)組(sham組)、腦缺血再灌注組(分再灌注3、6、12、24小時(shí))、溶劑對照組(NC組)、micro RNA-124激動(dòng)劑組(ago-mi RNA-124組)、micro RNA-124抑制劑組(antago-mi RNA-124組)、STAT3抑制劑組(S31-201組),每組8只。采用改良Zea-Longa線栓法建立大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)模型。運(yùn)用HE、TTC染色和神經(jīng)功能評分法在細(xì)胞、組織、行為學(xué)水平對腦損傷程度進(jìn)行評估;運(yùn)用q RT-PCR技術(shù)分析腦組織中micro RNA-124相對表達(dá)變化;采用熒光素酶報(bào)告基因技術(shù)和Western blot技術(shù)驗(yàn)證micro RNA-124下游靶基因(STAT3);運(yùn)用免疫組化和Western blot技術(shù)進(jìn)一步分析腦組織中焦亡相關(guān)蛋白Caspase-1、Gasdermin D和促炎因子IL-1β、IL-18的表達(dá)及分布。結(jié)果1與正常對照組比較,假手術(shù)組的神經(jīng)功能評分、micro RNA-124及細(xì)胞焦亡相關(guān)蛋白的表達(dá)量無明顯差異,模型組不同時(shí)間點(diǎn)的神經(jīng)功能評分、micro RNA-124及細(xì)胞焦亡相關(guān)蛋白前體及活性體的表達(dá)量均明顯升高(P0.05),其中micro RNA-124的表達(dá)量于再灌注后12小時(shí)達(dá)高峰,24小時(shí)下降,Caspase-1、IL-18前體及活性體的表達(dá)量在24小時(shí)內(nèi)呈現(xiàn)遞增趨勢(P0.05),Gasdermin D活性體和IL-1β的前體及活性體的表達(dá)量在12小時(shí)達(dá)高峰,24小時(shí)下降。2與溶劑對照組比較,micro RNA-124高表達(dá)組的腦梗死面積明顯減小(17.37±1.47 vs38.30±3.44,P0.05),神經(jīng)功能評分明顯下降(1.60±0.54 vs 2.40±0.55,P0.05),表達(dá)焦亡相關(guān)蛋白的陽性細(xì)胞數(shù)也明顯減少,而micro RNA-124抑制劑組的上述指標(biāo)均明顯升高(P0.05)。3熒光素酶報(bào)告基因技術(shù)中,與陰性對照劑組比較,mi RNA-124+野生型STAT3質(zhì)粒組細(xì)胞中螢光素酶活性明顯下降(0.50±0.02 vs 1.00±0.05,P0.05),而micro RNA-124+突變型STAT3質(zhì)粒組的熒光素酶活性未出現(xiàn)明顯變化(0.95±0.03 vs 1.00±0.04,P0.05);Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與溶劑對照組比較,micro RNA-124高表達(dá)組STAT3及p-STAT3的表達(dá)量均明顯下降(0.27±0.02 vs 0.47±0.02;0.38±0.02 vs 0.46±0.03,P0.05),S31-201組焦亡相關(guān)蛋白的表達(dá)量也明顯下降,Caspase-1p20(0.43±0.02 vs0.80±0.03,P0.05)、Gasdermin D活性體(0.34±0.03 vs 0.75±0.03,P0.05)、Activated-IL-1β(0.30±0.03 vs 0.71±0.03,P0.05)、Activated-IL-18(0.27±0.02vs 0.67±0.03,P0.05)。結(jié)論micro RNA-124可通過負(fù)向調(diào)控STAT3降低腦缺血再灌注損傷中細(xì)胞焦亡的發(fā)生進(jìn)而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用,為micro RNA-124應(yīng)用于臨床治療腦缺血再灌注損傷提供新的靶點(diǎn)。圖31幅;表14個(gè);參140篇。
【圖文】：

圖 1 模型組腦組織 HE 染色（400×，n=3）Fig.1 HE staining of rat brain tissue in model group6h 12h 24h

圖 2 模型組大鼠神經(jīng)功能評分(***P<0.05)Fig.2 Neurological score of model group rats(***P<0.0注損傷早期大鼠腦組織中 miRNA-124 的表達(dá)變
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R743

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 季巾君;潘潔莉;謝冠群;徐莉;;Stat3的功能多樣性[J];生命科學(xué);2014年07期

2 鄔皓晨;陳勇軍;徐易塵;沈萍萍;;Caspase-1在炎癥及程序性細(xì)胞死亡過程中的作用[J];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2011年02期

3 王利峰;楊應(yīng)明;;白介素18與腦損傷[J];汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年01期

4 張國紅,王春霖,呂平,王永利;大鼠局灶性腦缺血再灌注后不同時(shí)間E-選擇素、P-選擇素和細(xì)胞間粘附分子-1的表達(dá)[J];中國藥理學(xué)通報(bào);2005年10期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 王惠清;MiR-124通過靶基因Bim調(diào)節(jié)MPTP帕金森病模型中細(xì)胞凋亡和自噬[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 王仕平;miRNA-124/STAT3信號通路減輕大鼠腦出血后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2017年

，

本文編號：2621873