【摘要】：目的:血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)和功能的變化在急性缺血性卒中(Acute ischemic stroke,AIS)的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。將循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞(Circulating endothelial cells,CECs)作為反映血管內(nèi)皮損傷的生物標(biāo)志物由來已久。本研究通過觀察急性缺血性卒中患者發(fā)病初期和疾病過程中的循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞水平及DNA損傷程度的變化,以進(jìn)一步探討急性缺血性卒中與內(nèi)皮損傷的潛在相關(guān)性。方法:我們研究了急性缺血性卒中患者60例,同時選取了20例健康成年人作為對照組。根據(jù)是否合并危險因素將急性缺血性卒中患者進(jìn)行亞組分類。使用美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評估神經(jīng)功能缺損程度。我們將CECs定義為CD146(+)FITC-UEA-1陽性,采用生物素化免疫磁性分離技術(shù)分離并計數(shù)CECs,通過單細(xì)胞凝膠電泳(Single cell gel electrophoresis,SCGE)測定CECs DNA損傷。結(jié)果:1.相比于健康對照組,AIS組第1天和第7天CECs水平均明顯增加(P0.0001)。2.AIS組第1天CECs水平明顯高于第7天CECs水平(P0.0001)。這表明急性缺血性卒中發(fā)病初期CECs水平明顯升高;同時隨著疾病的發(fā)展,CECs水平在第7天是下降的,但是并沒有觀察到CECs恢復(fù)至正常水平。3.AIS亞組分析結(jié)果顯示第7天CECs水平在糖尿病亞組間存在顯著性差異(P0.05)。多元線性回歸結(jié)果進(jìn)一步顯示AIS亞組第7天CECs水平在糖尿病亞組間存在顯著性差異(P0.05;R=0.343,R~2=0.118,F=7.749,P=0.007),說明AIS組第7天CECs水平與合并糖尿病存在線性回歸關(guān)系。然而,合并糖尿病僅能解釋AIS組第7天CECs水平變異的11.8%,這可能提示合并糖尿病對AIS組第7天CECs水平的影響甚微。4.AIS組第1天CECs水平與入院NIHSS評分無顯著相關(guān)性(r=0.135,P=0.302);AIS組第7天CECs水平與第7天NIHSS評分也無顯著相關(guān)性(r=0.246,P=0.058)。5.相比于健康對照組,AIS組第1天和第7天CECs DNA電泳均呈現(xiàn)明顯的彗星狀,彗尾DNA含量增高(P0.0001)。這表明AIS組的CECs DNA相比于健康對照組損傷加重。6.AIS組第1天CECs DNA損傷程度和第7天CECs DNA損傷程度無顯著性差異(P=0.3601)。表明急性缺血性卒中疾病過程中并沒有觀察到CECs DNA損傷程度的進(jìn)一步變化。結(jié)論:急性缺血性卒中發(fā)病初期CECs水平明顯升高,表明CECs與急性缺血性卒中的發(fā)生密切相關(guān)。急性缺血性卒中疾病過程中CECs明顯高于正常水平且呈現(xiàn)中度損傷,這些現(xiàn)象可能提示CECs與急性缺血性卒中的內(nèi)皮損傷密切相關(guān)。
【圖文】：

圖 1 內(nèi)皮細(xì)胞（EA.hy926 細(xì)胞株）Fig.1 Endothelial cells (EA.hy926 cells)(A)Immunomagnetic isolation(Optical Microscope). (B)Ulex europaeuslectin-1 stain (green)(Fluorescence Microscopy). (C)EA.hy926 cellmorphology. (D)Observation of immunomagnetic beads adsorbed by cellunder bright field.

圖 2 AIS 患者 CECs 形態(tài)Fig.2 The morphology of CECs inAIS patients(A)Numerous immunomagnetic beads are present on the surface of CECs.(B)Observation of immunomagnetic beads adsorbed by CECs under brightfield.(C) Oval. (D) Irregular shape.
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R743.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2620051