【摘要】：本研究通過檢測顱內(nèi)動脈瘤患者血清、腦脊液及顱內(nèi)動脈瘤壁中腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system,RAS)相關(guān)蛋白,血管緊張素 Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(angiotensin converting enzyme,ACE)和血管緊張素Ⅱ 1型受體(angiotensinⅡ type 1 receptor,AT1R)的含量,探究其與炎癥系統(tǒng)的相關(guān)性,來揭示RAS在顱內(nèi)動脈瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的潛在作用。進一步,采用meta分析方法評估ACE基因多態(tài)性對于顱內(nèi)動脈瘤破裂的風險。本論文的研究表明:在顱內(nèi)動脈瘤中,RAS與炎癥呈正相關(guān)性,RAS可能促進了炎癥的發(fā)生從而進一步導致了顱內(nèi)動脈瘤形成。Meta分析證明ACE基因多態(tài)性會增加顱內(nèi)動脈瘤破裂的風險。第一部分RAS-炎癥系統(tǒng)在顱內(nèi)動脈瘤發(fā)生中的作用研究研究目的:利用酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)、免疫組織化學和定量即時聚合酶鏈鎖反應(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)等技術(shù)檢測顱內(nèi)動脈瘤患者中腎素-血管緊張素系統(tǒng)及炎癥相關(guān)蛋白的表達,探究腎素-血管緊張素系統(tǒng)在顱內(nèi)動脈瘤形成過程中的潛在作用。研究方法:實驗組選取滿足經(jīng)CT血管造影(CT angiography,CTA)或數(shù)字減影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)明確有顱內(nèi)動脈瘤、且直徑不小于3 mm、治療選擇開顱動脈瘤夾閉術(shù)的患者,在術(shù)中留取動脈瘤壁標本。此外,留取血液標本和腦脊液標本。對照組選取選擇顱腦外傷后需行開顱血腫清除術(shù)的患者,在清除血腫及壞死腦組織時留取切除組織的血管標本;并留取腦脊液標本。血清標本的對照組選取頭皮腫物患者。利用ELISA、免疫組織化學和qRT-PCR等技術(shù)檢測顱內(nèi)動脈瘤患者及對照組血清、腦脊液、顱內(nèi)動脈瘤壁組織中AngⅡ、ACE、ATIR,及白介素 6(interleukin-6,IL-6)、白介素 1β(interleukin-1β,IL-1 β)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、基質(zhì)金屬蛋白酶 9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、脂蛋白α(lipoprotein α,Lp-α)的含量,進行比較,探究腎素-血管緊張素系統(tǒng)與炎癥的相關(guān)性,揭示RAS在顱內(nèi)動脈瘤形成過程中的潛在作用。結(jié)果:ELISA、免疫組織化學結(jié)果顯示顱內(nèi)動脈瘤患者血清、腦脊液、顱內(nèi)動脈瘤壁組織中AngⅡ、ACE、AT1R表達均增加(p0.05),除血清中AT1R增加不顯著(p0.05)。ELISA顯示顱內(nèi)動脈瘤患者除動脈瘤壁中eNOS表達下降外,血清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量及動脈瘤壁中MMP-9、Lp-α表達也均增加(p0.05)。qRT-PCR結(jié)果顯示動脈瘤壁組織中miRNA-566表達量下降(p0.01)。相關(guān)性分析顯示顱內(nèi)動脈瘤組腦血管壁組織中RA S相關(guān)蛋白與各炎癥因子都顯示出較好的正相關(guān)性。結(jié)論:顱內(nèi)動脈瘤患者中RAS和炎癥被激活,RAS可能通過促進炎癥發(fā)生,破壞腦血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞穩(wěn)定性和完整性,降解細胞外基質(zhì),抑制內(nèi)皮細胞生成,使腦血管壁結(jié)構(gòu)重構(gòu),導致顱內(nèi)動脈瘤形成。第二部分ACE基因多態(tài)性與顱內(nèi)破裂動脈瘤的meta分析研究目的:血管緊張素轉(zhuǎn)換酶在顱內(nèi)脈管系統(tǒng)調(diào)節(jié)過程中有重要作用,而且研究顯示血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因插入/缺失多態(tài)性與顱內(nèi)動脈瘤有關(guān),但未顯示與顱內(nèi)動脈瘤破裂風險相關(guān)性。因此,本研究對血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因插入/缺失多態(tài)性與顱內(nèi)破裂動脈瘤進行meta分析,以明確其相關(guān)性。研究方法:利用計算機檢索PubMed,Medline,Web of Science及萬方、中國知網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫,同時通過手工檢索相關(guān)研究文獻的參考文獻作為補充。檢索日期從建庫截止到2018年1月,檢索已公開發(fā)表的研究破裂顱內(nèi)動脈瘤患者的ACE基因插入/缺失多態(tài)性隨機對照研究(randomizedtrolled trials,RCTs)。觀測指標包括:基因檢測方法、基因檢測結(jié)果等。采用Ⅰ2和卡方檢驗檢測納入研究的統(tǒng)計學異質(zhì)性,基因多態(tài)性變量采用比值比(odds ratio,OR)和95%置信區(qū)間(confidence interval,CI)表示。結(jié)果:按照檢索策略共查到80篇文獻,最終6各RCTs,包括2387名患者符合標準并納入研究。Meta分析結(jié)果顯示:ACE基因多態(tài)性會增加顱內(nèi)動脈瘤破裂風險,等位基因Ⅰvs.D中OR=1.26,95%CI=1.10-1.44,POR=0.001,共顯性模型純合子Ⅱ vs.DD 中 OR=1.60,95%CI= 1.26-2.03,POR=0.00,顯性模型(Ⅱ+ID)vs.DD 中OR=1.32,95%CI=1.00-1.73,POR=0.047。在亞組分析中發(fā)現(xiàn),對于東亞人,共顯性模型純合子Ⅱ vs.DD 中(OR=2.04,95%CI=1.12-3.70,POR=0.02)和顯性模型(Ⅱ+ID)vs.DD 中(OR=1.93,95%CI=1.32-2.80,POR=0.001),ACE 基因多態(tài)性也會增加IA破裂風險,然而在白種人中卻沒有顯著相關(guān)性。在人群來源分析中,基于醫(yī)院的研究結(jié)果顯示除去隱性模型(OR=1.12,95%CI=0.73-1.74,POR=0.602)外,在其余模型中ACE基因多態(tài)性都會增加IA破裂風險,而在對于基于人群的研究中也是相似結(jié)果,等位基因模型Ⅰ vs.D(OR=1.28,95%CI=1.08-1.52,POR=0.005))和共顯模型純合子Ⅱ vs.DD(OR=1.56,95%CI=1.12-2.17,POR=0.009)。結(jié)論:ACE基因多態(tài)性會增加顱內(nèi)動脈瘤破裂風險,而且這種風險在東亞人中較白種人中更高。
【圖文】：

圖１．１炎癥在顱內(nèi)動脈瘤形成、發(fā)展、破裂過程中的作用［４３］逡逑盡管目前在顱內(nèi)動脈瘤方面已經(jīng)取得了較大的進展，但血流動力學下炎癥誘逡逑發(fā)的具體分子機制仍是未知。有一些學者通過比對破裂顱內(nèi)動脈瘤和未破裂顱逡逑內(nèi)動脈瘤，報道了一些破裂顱內(nèi)動脈瘤的組織病理學特點，如大量炎癥細胞浸逡逑潤、血管壁的胞外基質(zhì)降解、血管壁細胞缺失等事４４］。而在大部分未破裂動脈瘤逡逑中，炎癥浸潤和胞外基質(zhì)降解程度較輕。盡管如此，顱內(nèi)動脈瘤破裂具體機理逡逑還有待研究。逡逑１．２腎素－血管緊張素系統(tǒng)的促炎作用研究逡逑ＲＡＳ是人體內(nèi)重要的體液調(diào)節(jié)系統(tǒng)，在調(diào)節(jié)血壓、水分、電解質(zhì)和保持體內(nèi)逡逑環(huán)境穩(wěn)定性中發(fā)揮著巨大作用。目前已證實，Ａｎｇ邋ＩＩ作為腎素－血管緊張素系統(tǒng)的逡逑

５）將－ＡＡＣｔ作為２的指數(shù)冪進行計算。２．邋２．邋２．邋６統(tǒng)計學分析逡逑實驗數(shù)據(jù)以ｍｅａｎ士ＳＥＭ表示，采用ＧｒａｐｈＰａｄ邋Ｐｒｉｓｍ５．邋０統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分逡逑析，僅有兩組時，組間比較采用ｔ檢驗，ｐ＜０．邋０５為差異有統(tǒng)計學意義。逡逑２．３實驗結(jié)果逡逑２．３．１各樣本中ＲＡＳ相關(guān)蛋白表達逡逑２．３．１．１血清中ＲＡＳ相關(guān)蛋白表達逡逑采用ＥＬＩＳＡ方法檢測各組血清中Ａｎｇｌｌ、ＡＣＥ、ＡＴ１Ｒ含量，，結(jié)果如圖２．邋１顯逡逑示，相比對照組，顱內(nèi)動脈瘤組患者血清中ＲＡＳ相關(guān)蛋白Ａｎｇｌｌ、ＡＣＥ含量明顯逡逑增加（／Ｋ０．邋０５），而ＡＴ１Ｒ雖然也有增加，但并不顯著（ｐ＞0．0５），這表明了顱逡逑內(nèi)動脈瘤組患者外周血中腎素－血管緊張素系統(tǒng)被激活。逡逑
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R743

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 嚴建泉;錢東翔;胡波;;顱內(nèi)動脈瘤患者血清脂蛋白(a)水平分析[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2013年09期

2 劉力生;;中國高血壓防治指南2010[J];中華高血壓雜志;2011年08期

3 賈文清;王嶸;姜中利;趙繼宗;;NOS在顱內(nèi)動脈瘤壁的表達[J];河北醫(yī)藥;2008年08期

4 周京紅;;一氧化氮和動脈粥樣硬化[J];生物技術(shù)通訊;2007年05期

5 于書卿,趙繼宗,張東,畢智勇,康帥;血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因插入/缺失多態(tài)性與顱內(nèi)動脈瘤發(fā)病關(guān)系的相關(guān)性研究[J];首都醫(yī)科大學學報;2005年04期

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 韓亮;顱內(nèi)動脈瘤壁顯著性差異基因miRNA研究[D];吉林大學;2012年

本文編號：2610860