【摘要】：背景:α-硫辛酸(alpha-lipoic acid,ALA)是體內(nèi)的強(qiáng)力抗氧化劑和神經(jīng)保護(hù)劑,可以內(nèi)源性產(chǎn)生于線粒體細(xì)胞膜上,也可以外源性攝取。它在臨床常見神經(jīng)病變,如糖尿病性神經(jīng)病變、中樞神經(jīng)缺血再灌注損傷等疾病中已經(jīng)廣泛應(yīng)用。坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷可導(dǎo)致背根神經(jīng)節(jié)(Dorsal root ganglion,DRG)內(nèi)神經(jīng)元結(jié)構(gòu)及功能改變,包括神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡、纖維化、興奮閾值降低及痛覺過敏等。目的:本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ屯ㄟ^對大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)扎來模擬坐骨神經(jīng)慢性壓迫引起的背根神經(jīng)節(jié)損傷。旨在研究ALA對坐骨神經(jīng)損傷局部氧化應(yīng)激水平的影響,以及對背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞Bcl-2表達(dá)的影響。方法:將成年Sprague-Dawley大鼠54只隨機(jī)分成ALA治療組、NS對照組及假手術(shù)組。在ALA治療組中,沿脊柱旁斜行切開皮膚,分離臀肌,牽開梨狀肌,顯露大鼠右側(cè)坐骨神經(jīng),4-0不可吸收線結(jié)扎大鼠右側(cè)坐骨神經(jīng)形成動物模型,術(shù)后每天腹腔注射ALA30mg/kg治療量。NS對照組手術(shù)操作同ALA治療組,術(shù)后每天給于腹腔注射同等體積NS。假手術(shù)組大鼠僅手術(shù)顯露右側(cè)坐骨神經(jīng),不做結(jié)扎操作,術(shù)后不藥物干預(yù)。三組大鼠在同等條件下飼養(yǎng)3w,進(jìn)行一般觀察。術(shù)前1d,術(shù)后1d、7d、14d分別測定熱縮足潛伏期(paw withdrawal latency,PWL)。術(shù)后3w分別取三組大鼠坐骨神經(jīng)進(jìn)行HE染色、測定丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量;取L5的DRG進(jìn)行HE、Bcl-2免疫組化染色,觀察DRG神經(jīng)元形態(tài)學(xué)變化、變性、凋亡情況和Bcl-2表達(dá)陽性數(shù)。結(jié)果:一般觀察:大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)扎后,ALA治療組及NS對照組術(shù)側(cè)下肢即刻呈現(xiàn)跛行步態(tài)、伸趾無力等運(yùn)動功能障礙。隨著時(shí)間的推進(jìn)出現(xiàn)足趾萎縮、趾甲脫落、皮膚毛發(fā)失光澤、足部腫脹等表現(xiàn)。NS對照組有1例出現(xiàn)了嚴(yán)重的自噬現(xiàn)象。假手術(shù)組大鼠未出現(xiàn)異常變化。HE染色觀察:術(shù)后NS對照組DRG神經(jīng)元數(shù)量明顯減少,胞體水腫嚴(yán)重、出現(xiàn)空泡樣變性。可見核固縮明顯,并呈現(xiàn)出典型細(xì)胞凋亡。ALA治療組神經(jīng)元細(xì)胞體水腫、變性和凋亡程度較NS對照組輕,神經(jīng)元染色較深。熱縮足潛伏期測試結(jié)果:術(shù)前1d三組大鼠PWL比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。于術(shù)前1d相比,ALA治療組和NS對照組術(shù)后1d時(shí)PWL均縮短,P0.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;術(shù)后1d ALA治療組與NS對照組PWL比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05。術(shù)后7d、14dALA治療組PWL時(shí)間長于NS對照組,P0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。坐骨神經(jīng)MDA檢測結(jié)果:術(shù)后3w與假手術(shù)組對比,ALA治療組、NS治療組在術(shù)后MDA水平增高(P0.05);ALA治療組與NS治療組比較,術(shù)后3w時(shí)MDA水平較低(P0.05)。背根神經(jīng)節(jié)Bcl-2檢測結(jié)果:術(shù)后3w時(shí),假手術(shù)組僅見少量陽性細(xì)胞;ALA治療組染色明顯較深,可見較多陽性細(xì)胞;NS對照組亦可見陽性細(xì)胞。Bcl-2陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行組間對比,術(shù)后3w時(shí)NS對照組陽性計(jì)數(shù)明顯高于假手術(shù)組,P0.05;ALA組Bcl-2陽性細(xì)胞多于NS對照組,P0.05。結(jié)論:1.大鼠坐骨神經(jīng)結(jié)扎后局部氧化應(yīng)激水平增高,ALA可降低局部氧化應(yīng)激水平。2.ALA可上調(diào)DRG神經(jīng)元細(xì)胞Bcl-2的表達(dá)。
【圖文】：

大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)足出現(xiàn)萎縮、趾甲脫落

大鼠實(shí)驗(yàn)側(cè)足出現(xiàn)自噬現(xiàn)象
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R745

【參考文獻(xiàn)】

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1 戚雪;龐東渤;趙海雁;譚歆;黎笑楠;;α-硫辛酸對大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷中P53和Bax表達(dá)的影響[J];國際眼科雜志;2011年01期

2 王玲;鄭開俊;董德勇;孫悅;王永明;;氧化應(yīng)激在實(shí)驗(yàn)性糖尿病神經(jīng)病變中的作用[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;2008年01期

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本文編號：2600791