【摘要】：背景:α-硫辛酸(alpha-lipoic acid,ALA)是體內的強力抗氧化劑和神經保護劑,可以內源性產生于線粒體細胞膜上,也可以外源性攝取。它在臨床常見神經病變,如糖尿病性神經病變、中樞神經缺血再灌注損傷等疾病中已經廣泛應用。坐骨神經慢性壓迫損傷可導致背根神經節(jié)(Dorsal root ganglion,DRG)內神經元結構及功能改變,包括神經節(jié)神經元細胞凋亡、纖維化、興奮閾值降低及痛覺過敏等。目的:本實驗模型通過對大鼠坐骨神經結扎來模擬坐骨神經慢性壓迫引起的背根神經節(jié)損傷。旨在研究ALA對坐骨神經損傷局部氧化應激水平的影響,以及對背根神經節(jié)神經元細胞Bcl-2表達的影響。方法:將成年Sprague-Dawley大鼠54只隨機分成ALA治療組、NS對照組及假手術組。在ALA治療組中,沿脊柱旁斜行切開皮膚,分離臀肌,牽開梨狀肌,顯露大鼠右側坐骨神經,4-0不可吸收線結扎大鼠右側坐骨神經形成動物模型,術后每天腹腔注射ALA30mg/kg治療量。NS對照組手術操作同ALA治療組,術后每天給于腹腔注射同等體積NS。假手術組大鼠僅手術顯露右側坐骨神經,不做結扎操作,術后不藥物干預。三組大鼠在同等條件下飼養(yǎng)3w,進行一般觀察。術前1d,術后1d、7d、14d分別測定熱縮足潛伏期(paw withdrawal latency,PWL)。術后3w分別取三組大鼠坐骨神經進行HE染色、測定丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量;取L5的DRG進行HE、Bcl-2免疫組化染色,觀察DRG神經元形態(tài)學變化、變性、凋亡情況和Bcl-2表達陽性數(shù)。結果:一般觀察:大鼠坐骨神經結扎后,ALA治療組及NS對照組術側下肢即刻呈現(xiàn)跛行步態(tài)、伸趾無力等運動功能障礙。隨著時間的推進出現(xiàn)足趾萎縮、趾甲脫落、皮膚毛發(fā)失光澤、足部腫脹等表現(xiàn)。NS對照組有1例出現(xiàn)了嚴重的自噬現(xiàn)象。假手術組大鼠未出現(xiàn)異常變化。HE染色觀察:術后NS對照組DRG神經元數(shù)量明顯減少,胞體水腫嚴重、出現(xiàn)空泡樣變性�？梢姾斯炭s明顯,并呈現(xiàn)出典型細胞凋亡。ALA治療組神經元細胞體水腫、變性和凋亡程度較NS對照組輕,神經元染色較深。熱縮足潛伏期測試結果:術前1d三組大鼠PWL比較無統(tǒng)計學意義,P0.05。于術前1d相比,ALA治療組和NS對照組術后1d時PWL均縮短,P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義;術后1d ALA治療組與NS對照組PWL比較無統(tǒng)計學意義,P0.05。術后7d、14dALA治療組PWL時間長于NS對照組,P0.05,差異有統(tǒng)計學意義。坐骨神經MDA檢測結果:術后3w與假手術組對比,ALA治療組、NS治療組在術后MDA水平增高(P0.05);ALA治療組與NS治療組比較,術后3w時MDA水平較低(P0.05)。背根神經節(jié)Bcl-2檢測結果:術后3w時,假手術組僅見少量陽性細胞;ALA治療組染色明顯較深,可見較多陽性細胞;NS對照組亦可見陽性細胞。Bcl-2陽性細胞計數(shù)進行組間對比,術后3w時NS對照組陽性計數(shù)明顯高于假手術組,P0.05;ALA組Bcl-2陽性細胞多于NS對照組,P0.05。結論:1.大鼠坐骨神經結扎后局部氧化應激水平增高,ALA可降低局部氧化應激水平。2.ALA可上調DRG神經元細胞Bcl-2的表達。
【圖文】：

大鼠實驗側足出現(xiàn)萎縮、趾甲脫落

大鼠實驗側足出現(xiàn)自噬現(xiàn)象
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R745

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

1 戚雪;龐東渤;趙海雁;譚歆;黎笑楠;;α-硫辛酸對大鼠視網膜缺血再灌注損傷中P53和Bax表達的影響[J];國際眼科雜志;2011年01期

2 王玲;鄭開俊;董德勇;孫悅;王永明;;氧化應激在實驗性糖尿病神經病變中的作用[J];中國應用生理學雜志;2008年01期

3 謝益寬,肖文華,李惠清;The Relationship Between New Ion Channels and Ectopic Discharges From a Region of Nerve Injury[J];Science in China,Ser.B;1993年01期

，

本文編號：2600791