發(fā)布時間：2020-03-22 00:35

【摘要】：目的:FZD7,是Wnt信號受體。其在物種進化過程中高度保守,參與生物體重要的生長發(fā)育過程,如神經嵴誘導、原腸胚形成、調控消化系統(tǒng)發(fā)育及維持腸內穩(wěn)態(tài)等。近年來研究發(fā)現FZD7也在人類不同種類腫瘤的增殖、遷移、侵襲、上皮間質轉化和凋亡中扮演重要角色。然而,其在膠質瘤惡性進展過程中的具體作用及機制尚不清楚。因此,本研究的目的是評估FZD7表達上調對膠質瘤患者預后的影響,了解其在膠質瘤中調控的惡性生物學行為以及可能的作用機制。方法:通過使用公共數據庫數據比較膠質瘤組織和正常腦組織中FZD7轉錄組表達水平差異,研究FZD7表達水平與膠質瘤級別的聯(lián)系,并通過臨床樣本驗證。通過生存曲線與COX比例風險回歸模型評估FZD7對膠質瘤患者預后的影響,并通過生物信息軟件對FZD7進行膠質瘤相關功能學注釋。然后,通過轉染慢病毒過表達或敲低FZD7,運用CCK-8、克隆形成和裸鼠皮下成瘤實驗研究FZD7對膠質瘤細胞增殖及成瘤能力的影響。通過劃痕實驗和侵襲小室實驗研究FZD7對膠質瘤細胞遷移、侵襲等生物學行為的影響。并進一步研究過表達或敲低FZD7后膠質瘤細胞上皮間質轉化標志物和WNT通路標志物蛋白的表達水平變化。最后,結合基礎實驗結果和生物信息學分析FZD7與膠質母細胞瘤間質亞型的聯(lián)系和其轉化到臨床的應用意義。結果:我們發(fā)現FZD7在膠質母細胞瘤中較正常腦組織表達上調,且其表達值隨著膠質瘤級別的增高而增高。在膠質母細胞瘤患者中,FZD7表達水平高的患者較低的患者總體生存率降低,并證明FZD7是膠質瘤患者預后的獨立預測因子。通過GO、GSEA和GSVA三種算法,我們發(fā)現FZD7可能與膠質瘤增殖、遷移、細胞粘附,上皮間質轉化等生物學行為相關。其后,通過細胞學實驗證明敲低FZD7可以顯著抑制膠質瘤細胞增殖、遷移、侵襲和上皮間質轉化。且敲低FZD7后,WNT通路相關分子即磷酸化的GSK-3?與?-catenin表達均降低。除此之外,我們還發(fā)現FZD7在膠質母細胞瘤的間質亞型中表達水平最高,且其可作為膠質母細胞瘤間質亞型和上皮間質轉化的標志物。研究的最后發(fā)現在術后接受放療或化療的膠質母細胞瘤患者中,FZD7表達水平高的患者1、2、3、4、5年生存率均較低表達患者低。結論:FZD7促進膠質瘤細胞的增殖、遷移、侵襲和上皮間質轉化,是膠質瘤患者預后的獨立預測因子,也是將來可用于膠質瘤靶向治療的新靶點。
【圖文】：

16圖 1 FZD7 表達高低與膠質瘤惡性程度相關A：膠質母細胞瘤患者 FZD7 表達水平較正常腦組織增高。B: 膠質母細胞瘤患者 FZD7 表達水平較 WHOⅠ-Ⅲ級患者增高。C：ROC 曲線驗證 FZD7 作為診斷膠質瘤患者惡性度級別的

圖 2 K-M 曲線評估 FZD7 表達高低在膠質母細胞瘤中的預后意義3.3 在膠質瘤中，FZD7 與增殖、遷移、粘附、上皮間質轉化（EMT）生物學過程相關使用GO分析FZD7相關基因和差異基因，發(fā)現在膠質瘤中 FZD7 與細胞增殖、細胞生長、EMT、細胞粘附、細胞遷移相關。運用 GSEA 分析全基因組數據發(fā)現高風險組和低風險組差異基因主要富集在 EMT、肌動蛋白細胞骨架的調控、黏著斑、粘附連接。肌動蛋白參與到細胞遷移等重要的生物學過程中。而黏著斑組成了細胞外基質與細胞的肌動蛋白細胞骨架之間的物理聯(lián)系，通過整聯(lián)蛋白發(fā)揮作用，參與調控細胞粘附。因為在 GO 分析和 GSEA 分析均發(fā)現 FZD7 與 EMT、細胞粘附、細胞遷移相關，接下來我們用 GSVA 算法進行驗證。運用 GSVA 針對選定的功能基因集對每一個患者計算評分，發(fā)現 FZD7 表達水平與 EMT、細胞遷移、細胞粘附的評分呈正相關，與間質上皮轉化（MET）、負調控 EMT、細胞增殖調控、對藥物反應
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R739.4

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 胡建宏;王茂林;潘亞文;;高遷移率族蛋白B1在膠質瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及其機制研究[J];國際神經病學神經外科學雜志;2019年02期

2 楊海霞;李曉鳴;;外泌體與膠質瘤關系的研究進展[J];臨床與病理雜志;2017年11期

3 秦麗娟;賈永森;趙喜慶;張?zhí)?張偉;孫娜;;鴉膽子油乳注射液對膠質瘤細胞侵襲性的影響及其可能機制[J];四川大學學報(醫(yī)學版);2016年03期

4 齊玲;徐俊杰;紀朋艷;呂士杰;韓磊;王瑋瑤;;西蘭花多肽抑制膠質瘤細胞生長的機制研究[J];中國藥學雜志;2014年12期

5 萬政強;陳晨;伏林山;孫關;;吡格列酮對膠質瘤細胞生長的抑制研究[J];東南大學學報(醫(yī)學版);2013年01期

6 李嗍,王楓,繆珊,駱文靜;過量鋅對鼠膠質瘤細胞體外生長的影響[J];解放軍預防醫(yī)學雜志;2001年04期

7 楊偉廉,王堯,韋永新,阮長耿,杜子威;抗膠質瘤細胞單克隆抗體SZ-38及其識別抗原的生化特征[J];生物化學雜志;1988年06期

8 斯可哉;;在體外和體內用利血平調節(jié)C_6膠質瘤細胞亞系對ACNU的抗藥性[J];國外醫(yī)學(腫瘤學分冊);1988年02期

9 楊偉廉;抗膠質瘤細胞單克隆抗體SZ—38及其識別抗原的生化特征[J];蘇州醫(yī)學院學報;1989年01期

10 李方園;高翼之;王世浚;;四種人癌基因在腦瘤中的擴增和重排(摘要)[J];鐵道醫(yī)學;1989年01期

相關會議論文 前10條

1 楊鵬宇;李強;張建生;;雷帕霉素聯(lián)合尼莫司汀抑制膠質瘤細胞的研究[A];2011中華醫(yī)學會神經外科學學術會議論文匯編[C];2011年

2 俞文華;車志豪;張祖勇;許培源;陸鏞民;傅林;朱強;陳鋒;杜權;;骨橋蛋白在膠質瘤細胞中的表達及其信號傳導途徑[A];2005年浙江省神經外科學術會議論文匯編[C];2005年

3 潘冬生;;多基因修飾膠質瘤細胞疫苗的抗腫瘤免疫反應[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經外科醫(yī)師分會第六屆全國代表大會論文匯編[C];2011年

4 張玉寶;孫金龍;孟祥靖;魏麟;劉廣存;崔友強;;膠質瘤細胞中VEGF、MMP-2、MMP-9的表達及臨床觀察[A];中華醫(yī)學會神經外科學分會第九次學術會議論文匯編[C];2010年

5 趙世光;;膠質瘤細胞周期動力學研究[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經外科醫(yī)師分會成立大會資料匯編[C];2004年

6 張瑞;胡佩珊;臧清策;岳小飛;周幟;徐曉宇;韓為;張瑞萍;再帕爾·阿不力孜;;基于液相色譜-質譜聯(lián)用技術的膠質瘤細胞代謝組學分析[A];中國化學會第十一屆全國生物醫(yī)藥色譜及相關技術學術交流會（大會特邀報告及墻報）論文摘要集[C];2016年

7 宋楊英;劉英姿;單保恩;;IL-18基因轉染對大鼠9L膠質瘤細胞生長特性的影響[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術會議論文匯編[C];2011年

8 楊孔賓;趙世光;劉炳學;陳曉豐;戴欽舜;;K~+通道阻斷劑四乙胺對大鼠膠質瘤細胞的增殖和凋亡影響[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經外科醫(yī)師分會第四屆全國代表大會論文匯編[C];2009年

9 李格;黃益玲;;MiR-19a靶向LRIG1對腦膠質瘤發(fā)生發(fā)展的影響[A];中國生物化學與分子生物學會第十二屆全國會員代表大會暨2018年全國學術會議摘要集[C];2018年

10 李子超;姜東伯;楊舒雅;王靜;孫元杰;趙國慶;楊琨;;B細胞受體相關蛋白31對膠質瘤細胞行為的影響[A];第十一屆全國免疫學學術大會摘要匯編[C];2016年

相關重要報紙文章 前2條

1 特約記者 李岳冰;中國膠質瘤放療專家共識發(fā)布[N];健康報;2018年

2 張獻懷　張文;瘤區(qū)埋雷 持續(xù)殺傷[N];健康報;2007年

相關博士學位論文 前10條

1 邵瑩;可變剪接產生的ITSN1亞型在膠質瘤進展中的作用研究[D];天津醫(yī)科大學;2019年

2 于圣平;營養(yǎng)競爭微環(huán)境下PKM2在膠質瘤增殖侵襲和免疫抑制中的作用[D];天津醫(yī)科大學;2019年

3 馬輝輝;膠質瘤術后放射治療的輻射抵抗分子因素研究[D];中國科學技術大學;2018年

4 蘇輝;缺氧相關circDENND2A/miR-625-5p/HMGA1調控通路在促進膠質瘤惡性進展中的作用及其機制研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2019年

5 王群;磁共振影像對膠質瘤IDH基因表型特征預測的應用研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2019年

6 朱丹化;MicroRNA-497通過靶向調控mTOR及Bcl-2增強膠質瘤對替莫唑胺的耐藥性[D];蘇州大學;2018年

7 孫偉力;LncRNA OIP5-AS1通過調節(jié)miR-410表達靶向調控Wnt-7b在膠質瘤細胞中的作用及機制研究[D];河北醫(yī)科大學;2019年

8 余楊;ATP1A1對人膠質瘤干細胞增殖和凋亡的影響及機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2019年

9 高夢琦;ISG20促進膠質瘤局部微環(huán)境免疫應答導致不良預后[D];中國醫(yī)科大學;2019年

10 李振航;miR-196a/GATA6介導膠質瘤干細胞增殖及間質表型轉化機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

相關碩士學位論文 前10條

1 胡軒豪;長鏈非編碼RNA-SNHG5通過Wnt/β-catenin信號通路調節(jié)膠質瘤細胞生物學行為的研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

2 王珊珊;HOTAIRM1在膠質瘤干細胞中的作用和機制探索[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2019年

3 王瑤;FZD7對膠質瘤細胞惡性生物學行為及預后的影響[D];中國醫(yī)科大學;2019年

4 郭寶光;E2F-1基因沉默對人膠質瘤U251細胞生物學特征的影響[D];中國醫(yī)科大學;2019年

5 譚春玉;STK32B在膠質瘤中的表達及預后研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

6 段瑾;CD30L在小鼠腦膠質瘤微環(huán)境中的作用機制研究[D];中國醫(yī)科大學;2019年

7 羅雨松;阿片生長因子受體OGFR在人類膠質瘤上的表達及預后分析[D];中國醫(yī)科大學;2019年

8 岳金娟;ADC值在腦膠質瘤術后復發(fā)診斷中的應用價值[D];青島大學;2018年

9 秦子英;TLR3調節(jié)HCMV相關惡性膠質瘤PD-L1表達的機制研究[D];青島大學;2019年

10 鄢騰峰;MiR-512-5p靶向JAG1抑制膠質瘤細胞增殖并誘導細胞周期阻滯[D];南昌大學;2019年

，

本文編號：2594174