發(fā)布時間：2020-02-20 05:03

【摘要】：目的探討蛋白精氨酸甲基化酶(PRMT)在外周神經(jīng)損傷背根神經(jīng)節(jié)(DRG)轉(zhuǎn)錄表達(dá)與疼痛行為關(guān)系。方法構(gòu)建C57BL6小鼠雙側(cè)L4脊神經(jīng)結(jié)扎(SNL)外周神經(jīng)損傷神經(jīng)病理性疼痛模型,假手術(shù)Sham組作對照,收集SNL或Sham術(shù)后第7天DRG組織,行RNA-Seq測序全面分析PRMT家族9個基因在轉(zhuǎn)錄表達(dá)規(guī)律和組織分布情況,篩選出差異表達(dá)基因;建立小鼠單側(cè)L4 SNL模型(Sham組作對照),測量各組在SNL術(shù)前(0 d)、術(shù)后3、7和14 d不同時點機(jī)械縮爪反應(yīng)頻率(PWF)和熱縮爪反應(yīng)潛伏期(PWL),收集兩組上述不同時點患側(cè)和對側(cè)DRG行RT-qPCR驗證差異基因表達(dá)情況;建立坐骨神經(jīng)結(jié)扎慢性縮窄損傷(CCI)模型,假手術(shù)組Sham作對照,疼痛行為檢測方法和時間點同SNL模型,RT-qPCR進(jìn)一步驗證CCI術(shù)后上述時點差異基因表達(dá)情況。結(jié)果(1)RNA-Seq測序結(jié)果表明,9個PRMT基因均表達(dá)與DRG內(nèi),其基礎(chǔ)表達(dá)量最多的是Prmt2和Prmt3,最少的是Prmt6。與Sham組比較,SNL神經(jīng)損傷上調(diào)DRG Carm1轉(zhuǎn)錄表達(dá)(增加1.7倍),抑制Prmt5、Prmt8和Prmt9這3個基因轉(zhuǎn)錄,其中Prmt8抑制最明顯(下降16.3倍)。(2)RT-qPCR驗證表明,與Sham組較,SNL外周神經(jīng)損傷增加術(shù)后3、7和14 d PWF,降低PWL,上調(diào)DRG Carm1轉(zhuǎn)錄表達(dá),而僅抑制Prmt8轉(zhuǎn)錄表達(dá),Prmt1、Prmt5和Prmt9無明顯改變。(3)同樣的,CCI坐骨神經(jīng)損傷亦增加CCI術(shù)后3、7和14 d PWF,降低PWL,上調(diào)DRG Carm1,抑制Prmt8在上述時點的表達(dá)。結(jié)論外周神經(jīng)損傷致機(jī)械痛覺高敏和熱痛覺過敏的同時,上調(diào)DRG Carm1轉(zhuǎn)錄表達(dá),抑制Prmt8基因轉(zhuǎn)錄。

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本文編號：2581223